葶苈生脉方对慢性心衰大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6及心肌胶原的影响

目的探讨葶苈生脉方治疗压力超负荷致慢性心衰(Chronic heart failure,CHF)大鼠的作用机理。方法采用腹主动脉缩窄法建立慢性心衰大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、葶苈生脉方高剂量组(简称高剂量组)、葶苈生脉方低剂量组(简称低剂量组)、心宝丸对照组(简称心宝丸组),各组给予相应处理因素4周后,采用放免法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6),Motic6.0图象分析系统分析心肌胶原容积分数(CVF)。结果模型组与假手术组比较TNF-α、IL-6表达显著增强(P<0.01),CVF明显升高;各治疗组与模型组比较,TNF-α、IL-6表达显著减弱(P<0.01),CVF明显降低,其中高剂量组明显低于低剂量组和心宝组(P>0.01)。结论葶苈生脉方可能通过抑制炎性细胞因子的表达,调节心肌胶原代谢,从而阻止或逆转心室重构,改善心功能,达到治疗CHF的目的。

短肽AKRA(Ala-Lys-Arg-Ala)对酒精性肝损伤保护作用的研究

该研究采用一种短肽AKRA(Ala-Lys-Arg-Ala)分别处理人源肝细胞LO2和酒精性肝损伤小鼠,从体内和体外分别进行验证,研究AKRA是否能够缓解由偶氮二异丁脒盐酸盐(2,2′-azobis-2-methyl-propanimidamide,AAPH)在肝细胞内引起的氧化应激和食用酒精在实验动物体内造成的酒精性肝损伤。取处于对数生长期的LO2细胞,分为正常组和AKRA处理组,采用细胞增殖-毒性检测法(cell counting kit-8,CCK8)测定并计算细胞活力。采用AAPH诱导LO2细胞氧化损伤;然后以不同浓度AKRA处理细胞,检测LO2细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽还原型(glutathione,GSH)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;通过蛋白免疫印迹(Western blotting,WB)评价氧化、自噬和炎症相关标志性蛋白表达情况;利用食用酒精灌胃小鼠制备酒精性肝损伤病理模型同时,通过腹腔注射高、中、低剂量AKRA注射液,连续30 d,处死小鼠并观察肝组织病理形态学改变;并进行小鼠生理生化和肝脏中氧化相关指标的检测。结果提示,AKRA在0~6.4 mg/mL对LO2细胞增殖无明显影响和毒性作用,细胞活力正常;AKRA能够不同程度改善由AAPH处理引起的CAT、GSH、SOD等抗氧化酶的活性改变,并降低MDA含量;进一步研究发现,AKRA可促进核因子E-2-相关因子(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)与Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)解离,并进入细胞核,调控下游抗氧化及抗炎蛋白的表达水平;AKRA促进P62蛋白(sequestosome 1)降解,LC3蛋白(light chain 3)生成,从而提高自噬活性。此外,AKRA腹腔注射后,酒精引起的小鼠肝组织细胞变性程度较轻;血清中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)下降,总胆固醇(total cholesterol,T-cho/TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)水平降低,而高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)水平升高,氧化相关指标CAT、GSH及SOD活性出现不同程度的改善和MDA含量降低。通过该研究可知,短肽AKRA可能通过调控肝细胞抗氧化水平,提高自噬活性及抗炎能力达到缓解肝损伤的目的。

新疆葡萄酒对大鼠肝脏功能及肝细胞自噬的影响

该实验为了探讨新疆葡萄酒对肝脏及肝细胞自噬的影响,将雄性SD大鼠随机分为6组:空白组(1)、酒精组(2)、吐哈盆地干白葡萄酒组(3)、天山北麓干红葡萄酒组(4)、伊犁河谷干红葡萄酒组(5)、焉耆盆地干红葡萄酒组(6),用新疆不同产区葡萄酒灌胃雄性SD大鼠8周后,检测6组大鼠体重变化和肝脏系数、肝脏组织病理形态学变化、血清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)含量,并通过Western blotting检测肝脏组织中自噬相关蛋白LC3、p62表达水平。结果表明,与空白组相比,3、4、5、6葡萄酒组大鼠体重增长趋势较缓,酒精组大鼠体重增长趋势最缓,与酒精组相比,3、4、5、6葡萄酒组肝脏系数显著降低(P<0.05),肝脏未见明显病变,大鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、AST、ALT、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、血糖(blood glucose,GLU)呈降低趋势,高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoproteincholesterol,HDL-C)有上升趋势(P>0.05),球蛋白(globulin,GLOB)含量无显著差异,LC3蛋白含量升高,p62蛋白含量降低,且都达到了显著水平(P<0.05)。机体适量摄入葡萄酒一定程度上能降低肝脏系数、调节大鼠体内血清理化指标及肝脏功能、促进肝细胞自噬水平,从而减少酒精对肝脏的损伤,这可能与葡萄酒中含有的酚类物质有关。

饮料酒饮用舒适度及健康评价体系的研究与应用

中国是饮料酒生产与消费大国,随着我国经济的不断发展以及中国白酒、黄酒的国际化,饮料酒的饮用舒适度和饮用健康得到越来越多消费者的关注和重视。有鉴于此,针对目前国内外对饮料酒饮用舒适度和健康的认识、影响其饮用舒适度和健康的主要因素及其评价方法的研究进行了总结,并对存在问题进行了分析,供本领域内的研究学者参考。

4-甲基愈创木酚对酒精性肝损伤小鼠的保护作用

研究4-甲基愈创木酚对酒精性肝损伤小鼠的保护作用。将50只小鼠随机分为5组,分别为空白组、模型组及4-甲基愈创木酚低、中、高3个剂量组,经口灌胃按照分组分别给予等量的生理盐水、50%食用酒精和低、中、高剂量浓度的4-甲基愈创木酚,实验持续8周,末次灌胃后各组实验动物隔夜禁食12 h;12 h后从眼球采血,测定小鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density liptein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)浓度及谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的活力;肝脏组织匀浆中总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度。4-甲基愈创木酚低、中、高剂量组小鼠血清中TC、TG、LDL-C浓度均低于模型组,AST、ALT活力均低于模型组,HDL-C浓度高于模型组;4-甲基愈创木酚低、中、高剂量组小鼠肝组织匀浆中SOD活力、CAT活力、GSH-Px活力和GSH浓度均高于模型组,而MDA浓度均低于模型组(P<0.05),且与4-甲基愈创木酚浓度有关。4-甲基愈创木酚对酒精性肝损伤具有保护作用且与剂量有关。4-甲基愈创木酚通过降低肝组织的损伤、减少脂质过氧化,提高机体抗氧化能力,防止氧化应激的发生,改善酒精对小鼠造成的脂质代谢紊乱来发挥护肝作用。

基于高通量测序分析黄酒对D-半乳糖致衰老小鼠模型肠道微生物菌群的影响

该文用D-半乳糖(D-galactose,D-gal)颈脊皮下注射建立衰老小鼠模型,评价黄酒对衰老小鼠模型肠道菌群结构的影响。通过设立空白对照、模型组、黄酒组,6周后测定其抗氧化酶活力,同时采用Morris水迷宫对小鼠的认知能力进行测试。收集小鼠粪便,利用IonS5TMXL高通量测序平台对肠道细菌16S rDNA基因进行测序,探索黄酒摄入对衰老小鼠肠道微生物菌群的影响。结果表明,D-gal致衰老小鼠模型的抗氧化相关酶活性明显降低,丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平显著增高(P<0.05);黄酒干预后,各剂量组小鼠体内多种抗氧化酶活性升高,MDA含量显著下降(P<0.05);在行为学实验中,适量黄酒干预能够显著提高D-gal致衰老小鼠的认知能力(P<0.05);高通量测序发现黄酒干预显著改善了D-gal致衰老小鼠的肠道菌群结构;进一步分析菌群组成发现,黄酒显著改善了衰老小鼠模型的Firmicutes和Bacteroidetes的相对丰度(P<0.05),显著提升了Bacteroides、Lactobacillus、Bifidobacterium、Lachnospiracea和Butyricicoccus的相对丰度(P<0.05)。适量黄酒摄入可一定程度上改善衰老所致的肠道菌群结构失衡现象,有助于延缓衰老。

酱香型白酒饮后舒适度与主要风味成分相关性分析

酱香型白酒因其独有的酱香风味闻名于世,随着生活水平的提高,“适量饮酒,有益健康”已经达成了共识,因此提升饮酒舒适度是当前研究的重点。本研究通过招募志愿者,设计、收集问卷,对不同酱香型白酒中的风味成分进行定量并与问卷结合分析相关性。结果显示,酱香型白酒中适当含量的醇类和酯类不会对白酒饮后舒适度造成很大影响,较高含量的高级醇如正己醇、正丁醇会降低饮后舒适度。正丁醇、正丙醇、正己醇等可作为影响饮后舒适度的负向因子,四甲基吡嗪、3-羟基-2-丁酮、丙酮等可作为正向因子。

萜烯类化合物基于细胞自噬的初步探究

通过采用不同浓度的萜烯类化合物处理细胞,探究青稞酒中所含有的7种萜烯类化合物是否会对细胞自噬产生影响。LO2细胞设立对照组和不同质量浓度萜烯类化合物处理组;采用细胞增殖检测试剂盒8法检测细胞存活率;采用蛋白免疫印迹法检测LO2细胞中微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3,LC3)的表达情况;采用实时荧光定量(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测LC3和P62蛋白的mRNA表达水平;采用荧光免疫法观察LC3和P62/SQSTM1蛋白的表达水平。结果表明,在营养及饥饿条件下,α-蒎烯处理后的LC3蛋白表达水平和mRNA表达水平呈浓度依赖性上调,P62的mRNA表达水平降低。其余6种萜烯类化合物:香茅醇、β-石竹烯、月桂烯、罗勒烯、柠檬烯、β-紫罗酮对细胞自噬均无显著影响。在LO2细胞中,萜烯类化合物α-蒎烯或具有促进细胞自噬的作用,其具体作用机理仍需进行深入研究。

短肽(Pro-His-Pro,PHP)预防酒精性肝损伤

采用脯氨酸-组氨酸-脯氨酸(Pro-His-Pro,PHP)分别处理人源肝细胞LO2和酒精性肝损伤小鼠,研究PHP是否能够缓解由肝细胞氧化损伤和食用酒精对小鼠造成的肝损伤。构建肝细胞氧化应激模型,通过不同浓度PHP处理后,检测抗氧化酶相关含量,评价氧化相关蛋白情况。构建小鼠酒精性肝损伤模型,观察肝组织病理形态学改变及生理生化和氧化相关指标。与偶氮二异丁脒盐酸盐(2,2′-azobis-2-methyl-propanimidamide,AAPH)处理组相比较,不同浓度的PHP处理组会导致抗氧化酶升高;在氧化通路方面,细胞核内核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)蛋白增加,胞质Kelch ECH相关蛋白1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)蛋白增多。与食用酒精组相比较,PHP处理组小鼠肝组织细胞变性程度较轻,相关指标均恢复正常,抗氧化酶氧化升高。短肽PHP可以通过调控氧化相关指标和氧化通路关键蛋白Nrf2来达到预防酒精性肝损伤的目的。

葶苈生脉饮对慢性心衰大鼠心肌MMP-9、TIMP-1表达及胶原影响的研究

目的:探讨葶苈生脉饮治疗慢性心力衰竭(CHF)的相关作用机制。方法:采用腹主动脉缩窄法建立心力衰竭大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、葶苈生脉饮高剂量组、葶苈生脉饮低剂量组、心宝丸组,施以相应治疗因素4周后,采用免疫组化法检测各组大鼠心肌组织MMP-9、TIMP-1的表达及胶原容积百分比(CVF)。结果:模型组与正常组比较MMP-9表达显著增强,TIMP-1表达显著减弱,CVF显著升高;各治疗组与模型组比较,MMP-9表达显著减弱,TIMP-1表达显著增强,CVF显著降低,其中葶苈生脉饮高剂量组明显优于葶苈生脉饮低剂量组和心宝丸组。结论:葶苈生脉饮可能通过调控MMP-9和TIMP-1的表达,调节胶原代谢,逆转心室重构,改善心脏功能,是治疗CHF的作用机制之一。