黑果腺肋花楸酵素的抗氧化活性研究

以黑果腺肋花楸(简称黑果)为原料,利用植物乳杆菌发酵制备黑果酵素,探讨了黑果酵素发酵过程中总酚含量和体外抗氧化活性的变化及其对D-半乳糖致衰小鼠的抗氧化作用。结果表明,酵素发酵12 d后总酚含量、清除超氧阴离子能力、清除DPPH自由基能力较未发酵前分别提高了2.42、1.69、0.088倍,体外抗氧化活性显著增强(p<0.05);与模型组、未发酵组相比,黑果发酵组小鼠体重增加量、免疫器官指数、血清和肝脏中T-SOD、CAT活力、对羟自由基的清除能力显著提高(p<0.05),MDA的含量显著下降(p<0.05)。综上可知,黑果腺肋花楸酵素具有抗氧化作用。

浒苔降解菌的筛选及发酵条件优化

本文以具有腐烂病状的浒苔为样品,从中筛选分离得到产浒苔降解酶的海洋微生物菌株X-5,同时对菌株X-5生长特性、最适发酵条件进行了研究。通过单因素实验确定菌株X-5产浒苔降解酶的最适发酵条件为:浒苔浓度为2.5%;氯化铵浓度为0.8%;NaCl浓度为3%;在接种量7%,26℃下恒温培养时间60h,获得菌株酶活力最高。

葡萄糖氧化酶产生菌的紫外诱变及发酵条件优化

利用紫外诱变黑曲霉的方法产生葡萄糖氧化酶并研究酶的最适发酵条件。以酶活力、蓝紫色透明圈的直径为主要指标,确定了紫外诱变法最佳诱变条件为:15 W的紫外灯在照射时间为8 min,照射距离20 cm处,获得1株优良的正向突变株,其产葡萄糖氧化酶的能力是出发菌株的11.8倍。并且通过单因素实验,确定酶的最适发酵条件。实验结果表明:在30℃、5%接种量、转速160 r/min条件下恒温培养72 h,为酶的最适发酵条件,优化后酶活力是优化前的9.56倍。

RC-3产硫酸软骨素酶的条件优化及酶的分离纯化

研究了菌株RC-3产硫酸软骨素酶的最适发酵条件及酶的分离纯化,分别优化了碳源种类、碳源浓度、氮源种类、氮源浓度和NaCl浓度等条件,在最适发酵条件下对RC-3进行发酵培养,收集菌体进行细胞破碎制备粗酶液。粗酶液依次经过Q-Sepharose Fast Flow(QFF)阴离子交换层析与Sephacryl S-1000凝胶过滤层析和高效液相色谱(HPLC)进行逐级分离纯化,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的方法验证纯化酶活力。结果表明,最优碳源为0.5%的岩藻多糖(Fucoidan)加乳糖、最优氮源为1.0%的牛肉膏、NaCl的最优浓度为0.3%,在上述条件下发酵48h,获得的菌体生物量最高,酶活力较优化前提高3倍,达1066.89 U/mL。粗酶经过QFF离子交换层析和Sephacryl S-1000葡聚糖凝胶纯化后获得相对较纯的酶,该酶经过HPLC检测表明主要有2个峰,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了此二峰均具有酶活力。