快速祛除组织中黑色素的改良方法

一些黑色素细胞增生性病变与恶性黑色素瘤的鉴别极为困难,有的到目前还没有定论[1]。黑色素瘤的细胞形态组织结构极其多样,在一些标本中黑色素沉积过多,掩盖了细胞的形态和组织学结构,而且给免疫组织化学的标记造成影响,给疾病的诊断造成了一定的困难。

TTF-1、CK7在胸水细胞块中鉴别肺腺癌诊断的应用

目的探讨TTF-1、CK7在胸水细胞块中鉴别肺腺癌中表达的敏感性和特异性及在肺腺癌诊断中的应用。方法临床资料和影像学资料诊断为肺癌的病人,胸水离心涂片中见到癌细胞,胸水再离心制成细胞块,HE显微镜观察有肿瘤细胞,进行免疫组化Max Vision法检测TTF-1及CK7等抗体。结果10例肺癌中有7例肺腺癌和1例肺小细胞癌都表达TTF-1、CK7;2例肺鳞癌中TTF-1、CK7不表达。结论 TTF-1、CK7在肺腺癌中表达有较高的敏感性和特异性,胸水细胞块诊断后,可作为鉴别肺腺癌的可靠标记抗体。

不同固定方法对胸水细胞块组织形态及免疫细胞化学的影响

目的:探讨不同固定液对细胞块的固定效果和免疫细胞化学标记的影响,寻找一种理想的细胞块的固定液及制作方法。方法:利用4%中性甲醛、乙醇乙醚(1∶1)混合固定液、丙酮三种不同固定液对同一阳性胸水进行固定,制作出细胞块3μm切片,行HE和免疫细胞化学染色,观察染色效果和抗体标记情况。结果:4%中性甲醛固定细胞块HE染色鲜艳清晰,细胞无变性,免疫标记定位准确清晰;乙醇乙醚固定HE染色鲜艳,细胞略有变性,免疫标记欠佳;丙酮固定HE染色鲜艳,细胞略有萎缩变性。结论:在病理制片过程中,固定相当重要,在细胞块的固定液选择中,通过对比,4%中性甲醛是胸水离心细胞块最理想的固定液。

一种快速提取恶性胸水中肿瘤细胞DNA的方法

病理标本石蜡和新鲜组织肿瘤细胞的DNA提取方法有好多种。胸水离心肿瘤细胞提取DNA方法报道比较少见，笔者用一种快速提取胸水肿瘤细胞的DNA方法，进行基因测序和EGFR基因突变检测，取得了良好的效果，现报道如下。

胸水细胞块在荧光原位杂交检测肺癌EGFR基因中的应用

目的将胸水制成细胞块应用于荧光原位杂交(FISH),为肺癌的EGFR基因检测建立无创标本收集平台。方法采用肺癌患者阳性胸水离心获取肿瘤细胞制作成石蜡细胞块,免疫组化分型后进行FISH检测,荧光显微镜观察EGFR基因扩增情况。结果胸水细胞块技术应用于FISH检测EGFR基因检测取得了良好的效果。结论胸水细胞块完全能够为肺癌患者提供准确的EGFR基因扩增情况的结果,指导肺癌患者的靶向治疗。

基层医院科研精细化管理

从医院建设研究型医院的历程探讨其精细化科研管理的主要做法,从科管人员配备、科研管理制度、科研经费使用、全程科研服务、学术氛围营造等五个方面的精细化科研管理进行阐述。经过医院精细化的科研管理建设,提高医院科研水平,提升科研成果的数质量,促进研究型医院的建设与发展。

病理质量管理的实践与经验

病理诊断作为疾病诊断的最后诊断,最具有权威性,在医疗活动中占有重要地位。病理诊断的质量管理和质量控制不仅对相关科室,甚至对医院整体的医疗质量构成极大的影响。本文就建立严格的室内质控制度;加强人员继续教育,提高工作人员业务素质;参加省室间质量控制,进一步完善质量管理制度三个方面实践进行病理科质量管理和质控总结,着重总结了室内质量控制环节方面的实践与经验,旨在提高病理科工作的高质、高效和标准化,促进病理科的整体发展,提高病理工作质量。

尼氏小体染色方法的改进及其在神经病理学研究中的应用

组织或细胞的染色在病理学诊断、科学研究和教学工作中,都具有非常重要的意义和使用价值。组织切片染色的质量好坏对于医学诊断,科研和教学至关重要。为了更好的研究神经组织,使医学诊断、科研和教学工作更为方便,本文对Toluidine Blue(甲苯胺蓝)染色方法做了一些改进。在传统的甲苯胺蓝染色过程中,仅考虑对细胞核和尼氏小体进行染色,未考虑细胞浆和其他细胞器:而改进后的甲苯胺蓝染色方法在甲苯股蓝染色后用伊红再染色,既考虑对细胞核和尼氏小体进行染色,也对细胞浆进行了染色。结果显示传统的Toluidine Blue染色结果光镜下观察,细胞核和尼氏小体都可见,即尼氏小体为深蓝色,细胞核为蓝色,染色背景为淡蓝色;改进后的染色结果光镜下观察,尼氏小体为紫蓝色,细胞核为蓝色,染色背景为粉红色。可见,改进后的染色方法染出的组织切片比传统的要清晰、美观。随着科学技术的飞速发展,病理学的研究也随之发展,病理技术势必进一步提高,来适应科技的进步和医学的发展。改进的尼氏小体染色法能够使脑组织切片更清楚观察,更有利于医学工作者对神经组织及尼氏小体的研究。

基层部队医学科研现况及发展探讨

本文阐述了基层部队医学科研现况及特点,探讨了基层部队医学科研发展策略,从健全科研组织,完善科研管理制度,调动积极因素等方面形成合理的科研机构,进而推动部队科研工作,促进科研水平的不断提高,切实提升我军基层部队医疗保障能力和战斗力。

徕卡RM2145半自动切片机保养与维护

切片机是目前病理科最重要的医疗仪器，也是非常精密的医疗器械．对环境及操作要求比较严格，它是否正常工作将直接影响病理科的日常工作．所以病理工作者在工作过程中应细心维护及保养，规范操作，保证工作质量，以便保障仪器的使用价值和延长其使用寿命．以下是我们维护和保养切片机的经验与体会，供大家参考。

一种细针穿刺抽吸细胞团制作石蜡切片方法

细针穿刺（fineneedleaspiration。FNA）细胞涂片诊断是病理科常用的检查手段。但是对转移性肿瘤的来源及分型诊断存在很大困难。有学者用琼脂浓缩细胞方法制作细胞块，具有一定的应用价值。但是琼脂浓缩细胞块制作比较复杂，笔者应用一种简单收集细针穿刺抽吸细胞团制作石蜡切片方法，取得了良好的效果，对肿瘤原发灶的寻找有很大帮助，并对部分肿瘤晚期患者的穿刺细胞团切片可以进行荧光原位杂交（FISH）检测，为患者的靶向治疗提供参考。

肺癌胸水细胞块与组织学EGFR基因扩增检测对比研究

目的:对比肺癌胸水细胞块与组织学中EGFR基因扩增情况,探讨非小细胞肺癌患者阳性胸水细胞块检测EGFR基因扩增情况及临床意义。方法:收集60例非小细胞肺癌患者阳性胸水离心获取肿瘤细胞制作成石蜡细胞块,其中有28例的组织学对照,免疫组化分型后进行FISH检测EGFR基因,荧光显微镜观察基因扩增情况。结果:28例细胞块有组织学EGFR基因检测对照,在有组织学对照细胞块EGFR基因检测相符率100%。肺腺癌31例中,EGFR基因簇状扩增4例(12.9%),点状扩增14例(45.2%),无扩增13例(41.9%),肺腺癌扩增率为58.1%;肺鳞癌25例中,EGFR基因簇状扩增2例(8.0%),点状扩增9例(36.0%),无扩增14例(56.0%),肺鳞癌扩增率为44.0%;其他类型NSCLC患者4例中2例点状扩增,扩增率为50%。结论:肺腺癌及肺鳞癌胸水细胞块EGFR检测结果与组织学一致,EGFR基因在肺腺癌的扩增率高于肺鳞癌。应用FISH技术检测胸水细胞块中的EGFR基因扩增情况具有临床应用价值。

肝癌及肝硬化组织中ICAM-1和TopoⅡ的表达

目的 探讨细胞间黏附分子 1(ICAM 1)和拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )作为判断肝硬化及肝癌发展程度及预后指标的可能性。方法 应用免疫组化S P法对 32例肝细胞癌和癌旁组织、2 6例肝硬化和 10例正常肝组织标本进行ICAM 1和TopoⅡ标记。结果 ICAM 1和TopoⅡ表达率分别为肝癌 84 3%、6 2 5 % (2 7/32 ,2 0 /32 ) ;癌旁组织为 6 8 7%、4 6 8% (2 2 /32 ,15 /32 ) ;肝硬化为 6 5 3% ,38 4 % (17/2 6 ,10 /2 6 )。 10例正常肝组织无表达及弱表达 ,阳性率与组织学分类相关 ,肝癌组织中I CAM 1和TopoⅡ含量明显高于癌旁及肝硬化组织 (P <0 0 1) ,而癌旁及肝硬化组织中表达差异无显著性 (P >0 0 5 )。 结论肝组织中ICAM 1和TopoⅡ的过度表达在一定程度上可以反应肝癌、肝硬化发展及细胞增殖活性 ,有可能作为判断预后的指标之一。

血性胸腔积液细胞块制作方法研究及其应用

目的:探讨一种适合血性胸腔积液的细胞块制作方法。方法:收集细胞学涂片中见到肿瘤细胞的血性胸水48例,分别用直接离心沉淀法、去红细胞离心沉淀法和富集有核细胞层沉淀法制作细胞块,对三种方法获得的细胞块的HE染色效果、免疫组化效果及提取DNA的合格率进行比较。结果:直接离心沉淀法、去红细胞离心沉淀法、富集有核细胞层沉淀法制作细胞块的提取DNA合格率分别为72.9%(35/48)、85.4%(41/48)和93.8%(45/48),富集有核细胞层沉淀法提取DNA的合格率明显高于直接离心沉淀法,两者合格率差异有统计学意义(P<0.01)。富集有核细胞层沉淀法提取DNA的合格率高于去红细胞离心沉淀法,但两者合格率差异无统计学意义(P>0.05)。HE、免疫组化效果富集有核细胞层沉淀法最好,去红细胞离心沉淀法次之,直接离心沉淀法最差。结论:血性胸水细胞块推荐的方法依次是富集单个核细胞层沉淀法、去红细胞离心沉淀法、直接离心沉淀法。

HRM方法检测肺腺癌胸水细胞块中EGFR基因突变的临床意义

目的:探讨应用HRM方法检测肺腺癌患者胸水细胞块中癌细胞EGFR基因突变的临床价值。方法:收集43例肺癌阳性胸水标本,制作胸水细胞块,经HE及免疫组化染色确诊为肺腺癌,常规提取DNA,应用HRM方法检测EGFR基因第18-21外显子突变。所有标本均经基因测序法验证。结果:43例肺腺癌胸水细胞块中,HRM法检测出EGFR基因突变共15例,总突变率为34.88%。基因测序检测出EGFR基因突变共14例,总突变率为32.56%。两者的突变率差异有统计学意义。结论:对难以获得肺癌组织标本的肺腺癌患者可应用HRM方法检测胸水细胞块,筛查EGFR基因突变,指导EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂应用。

富血小板血浆复合物对腱-骨愈合界面力学性能影响的组织学研究

目的通过对健康成年新西兰大白兔行生物力学拉伸试验后标本的腱骨界面、移植物及其断裂层面进行组织学及组织化学观察,评价富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)复合异体脱蛋白骨(deproteined bone,DPB)对前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建后腱骨愈合的影响。方法 36只成年新西兰大白兔,随机分为3组,每组12只:富血小板血浆复合异体脱蛋白骨组(PRP+DPB组),异体脱蛋白骨组(DPB组),空白对照组。建立双侧自体单股半腱肌肌腱重建ACL模型,前2组骨隧道内分别植入PRP凝胶与DPB复合物、DPB,空白对照组行单纯ACL重建。术后4、8、12、24周取材行生物力学测试(单一轴向的拉伸试验)后,采用HE、Alcian blue、Masson染色及VEGF免疫组织化学观察各组腱骨愈合、移植物及其断裂层面组织学特点,分析各自的力学薄弱点。结果行拉伸试验后,术后4、8周各组标本肌腱移植物均从股骨隧道内断裂拉出,但PRP+DPB组术后8周时标本肌腱断裂处靠近股骨隧道内口,DPB组及空白对照组断裂部位位于隧道中段。术后12周时PRP+DPB组6个标本中有5个肌腱断裂部位在关节腔内部分,另2组仍从隧道内断裂拉出。术后24周时各组标本均在关节腔内部分断裂。组织学观察:术后4周时PRP+DPB组HE染色见断裂层面在腱骨结合部,可见少许疏松的纤维组织,Alcian blue染色未见细胞异染,Masson染色见肌腱断端纤维排列紊乱,VEGF免疫组化染色见较多阳性细胞表达;DPB组及空白对照组断裂层面在腱骨界面,断端见瘢痕组织。术后8周时PRP+DPB组HE染色见断裂层面在隧道内口处腱骨结合部,可见较致密的纤维结缔组织,Alcian blue染色未见细胞异染,Masson染色见肌腱断端纤维排列较前规则,VEGF免疫组化染色仍有较多阳性细胞表达,但较之前少;DPB组及空白对照组在靠近隧道中段处腱骨界面断裂,断端见疏松纤维组织。术后12周时PRP+DPB组肌腱断端见胶原纤维排列较前有序,梭形细胞散在分布,Alcian blue染色见断端有少量细胞异染,VEGF免疫组化阳性细胞数量少;DPB组及空白对照组在靠近隧道内口处腱骨界面断裂,断端见较致密的纤维组织,肌腱断端纤维排列紊乱,Alcian blue染色未见异染。术后24周时各组断端纤维排列整齐,PRP+DPB组可见椭圆形细胞,Alcian blue染色呈异染,较另2组明显,VEGF免疫组化3组均难以检出。术后4、8、12周,PRP+DPB组VEGF表达与DPB组、空白对照组有显著性差异(P<0.05),即表达增强;DPB组与空白对照组各时间点VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05);术后24周3组标本的VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ACL重建术后早期(8周以内)的薄弱点在腱骨界面,晚期在于移植肌腱。PRP可以提高腱骨间骨向肌腱内长入,从而增加腱骨愈合后的抗拉伸力。