云芝产漆酶发酵条件的研究

研究了培养基初始pH值、通气量、温度、表面活性剂、诱导剂、金属离子对云芝(Trametes versi-color)HS-03产漆酶发酵条件的影响.研究发现培养基的初始pH、培养温度、表面活性剂、诱导剂和金属离子等因子对该菌漆酶产量均有明显的影响.结果表明,云芝摇瓶产漆酶的最佳培养条件为培养基初始pH为3.5,转速150 r/min,培养温度28℃,另加1 mL/L吐温-80,1 mL/L愈创木酚,终浓度为0.5 mmol/L的Cu2+.在该条件下,该菌的漆酶酶活力达到291 U/L,比优化前提高了8倍,同时产酶高锋也提前了5 d.

云芝漆酶同工酶的分离纯化及酶学性质

采用DEAE-Sephrose Fast Flow和Sephadex G-100两步柱层析,得到2种漆酶同工酶,分别命名为Lc-cA和LccB.以ABTS为底物在适当条件下与酶带反应呈绿色谱带鉴定出漆酶谱带.LccA的纯化倍数和回收率分别为53.88和7%,LccB的纯化倍数和回收率分别为208.21和29%.用SDS-PAGE测定两漆酶的分子量分别为64.2 ku和60.7 ku;LccA和LccB的最适作用温度分别是40℃和50℃;最适反应pH值为3.5和4.0;其N-末端部分氨基酸序列为AIGPK和GIGPV,与其他真菌漆酶相比显示很高的同源性,以ABTS为底物的Km值分别为68.96μmol/L和76.92μmol/L.Cu2+对两同工酶都有明显的激活作用,Fe2+,Ag+完全抑制两同工酶的活性.

全基因关联研究及其在精神分裂症中的应用进展

全基因组关联研究(GWAS)是目前研究复杂遗传性疾病的重要手段。单核苷酸多态性(SNPs)和拷贝数变异(CNVs)已成为复杂疾病易感基因定位的优选标记。基于SNPs和CNVs的GWAS在疾病易感基因定位分析中实现了高通量的全基因组覆盖和无假设分析,与以往遗传学研究方法相比,效率更高、可信度更强,在糖尿病、肥胖等疾病中被广泛应用。精神分裂症(SP)是复杂遗传性疾病的典型代表,GWAS为SP的研究带来了突破。本文就GWAS及其在SP研究中的应用进展做一综述。

DNA分子标记技术在中药材品质鉴定中的应用进展

目的了解DNA分子标记技术在中药材品质鉴定中的应用进展。方法检索本领域国内外相关文献资料并进行分析、整理和总结。结果DNA分子标记技术在该领域中得到了广泛应用。结论DNA分子标记技术可以作为中药材品质鉴定的重要手段。

网状内皮素4受体基因多态性与中国汉族精神分裂症关联分析

目的:分析网状内皮素4受体(RTN4R)基因上的5个单核苷酸多态性(SNP)与中国汉族精神分裂症关联,探讨RTN4R基因单核苷酸多态性与精神分裂症易感性的关系。方法:收集符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-Ⅳ)诊断的528名偏执型精神分裂症患者,在同一地域招募健康体检者528名作为对照,并采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评估234例首次发病患者的临床症状,采用基因分型芯片对RTN4R基因上的5个功能单核苷酸多态性位点进行基因分型,分析多态性与疾病的关联性,以及PANSS因子分与RTN4R多态性的关联。结果:成功检测5个单核苷酸多态性位点的基因型,关联分析显示这些位点基因型和等位基因频率分布病例和对照之间差异无统计学意义。与携带rs696880位点GG基因型患者相比,携带AA基因型患者PANSS阳性分[(23.5±5.6)vs.(25.1±7.6),P<0.05]、一般精神病理症状分[(42.6±9.9)vs.(46.0±13.4),P<0.05]均较低,携带AA基因型患者发病年龄晚于携带GG型患者[(24.9±8.1)岁vs.(22.2±6.2)岁,P<0.05]。结论:在中国汉族人群中,RTN4R基因多态性与精神分裂症可能不存在关联,但可能影响疾病表现。

RELN基因rs12705169位点与女性偏执型精神分裂症关联

目的以中国汉族偏执型精神分裂症患者为研究对象,重复验证RELN(Reelin)基因单核苷酸多态性与精神分裂症的关联性。方法以美国精神障碍诊断与统计手册第四版为诊断标准(Diagnostic and StatisticalManual of Mental Disorders-Fourth Edition,DSM-Ⅳ)在河南省北部地区收集326例偏执型精神分裂症患者(男女各半),在同一地域招募健康体检者334名(男女各半)作为对照,检测RELN基因rs12705169、rs11764507和rs17157643单核苷酸多态性位点。结果仅发现患者组和对照组之间rs12705169位点的基因型和等位基因频率差异有统计学意义(P<0.01)。按性别分层后进一步分析,rs12705169在女性患者和对照之间基因型和基因频率分布差异具有统计学意义(CC:OR=0.27,95%CI=0.18～0.45;AC:OR=0.43,95%CI=0.29～0.63,P<0.01)。结论RELN基因多态性与中国女性偏执型汉族精神分裂症存在关联,RELN基因可能是精神分裂症的易感基因。

卒中后抑郁大鼠海马区芳烃受体核转位蛋白2的表达

目的探讨卒中后抑郁(PSD)大鼠海马区芳烃受体核转位蛋白2(ARNT2)的表达。方法 24只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、单纯抑郁组、单纯卒中组和PSD组,每组6只。采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,在此基础上综合孤养、不可预测应激处理复合制备PSD大鼠模型。采用半定量反转录聚合酶链反应、免疫组织化学法检测大鼠海马区ARNT2 mRNA和蛋白的表达。结果单纯卒中组和PSD组大鼠海马区ARNT2 mRNA的相对表达量均高于假手术组(P<0.05),PSD组大鼠海马区ARNT2 mRNA的相对表达量高于单纯卒中组和单纯抑郁组(P<0.05)。单纯抑郁组与假手术组大鼠海马区ARNT2蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05),单纯卒中组和PSD组大鼠海马区ARNT2蛋白表达均高于假手术组(P<0.05),PSD组大鼠海马CA2区ARNT2蛋白表达显著高于单纯抑郁组和单纯卒中组(P<0.05)。结论 ARNT2参与了PSD发生的生物学过程。

儿茶酚胺氧位甲基转移酶基因多态性与精神分裂症数量性状

儿茶酚胺氧位甲基转移酶（COMT）是一种广泛存在于人体内的酶，它通过催化儿茶酚胺第三位羟基上的甲基化而降解底物，是具有生物活性或毒性的儿茶酚胺的主要代谢酶，也是中枢神经元外多巴胺主要的降解酶，COMT缺乏的小鼠有特定区域（尤其是前额叶皮层）存在多巴胺水平改变。

壳聚糖修饰的PLGA纳米粒作为蛋白多肽类药物载体的研究

采用溶剂挥发法,以乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)制备了载牛血清白蛋白(BSA)的PLGA纳米粒(PLGA NP),采用两种修饰方式(直接吸附法和共价交联法)以壳聚糖(chitosan,CS)修饰纳米粒表面,通过考察修饰方法对纳米粒的理化性质、释药性质以及对BSA构型的影响,吸附法修饰的纳米粒(ADCSNP)包封率提高,达到(87.8±3.1)%,突释效应显著;共价交联法修饰的纳米粒(CBCS NP)包封率降低,释药速率增加。3组纳米粒释放速率顺序为V(CBCSNP)>V(ADCS NP)>V(PLGA NP)。PLGA NP与ADCS NP包载的BSA构象未见明显改变,而CBCSNP包载的BSA的圆二色谱中α-螺旋含量降低,β-折叠增加。因此,ADCS NP更适合作为蛋白多肽类药物载体。

碳源氮源对白腐真菌漆酶合成的影响

从本实验室保藏的菌种中筛选到一株高漆酶合成的白腐真菌,通过单因子和正交试验对该菌株进行了碳源和氮源的利用研究.结果表明,其漆酶合成的最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母浸出汁.碳氮源的最佳组成为:葡萄糖10g/L,酵母浸出汁7g/L.

用于环境监测的生物传感器

生物传感器是一项综合了多门学科的高新技术,具有特异性好、灵敏度高、分析速度快、能在复杂体系中在线连续监测等特点,被广泛用于生命科学、医学检验、食品安全及环境监测等多个领域。其中,在环境检测中的应用尤为令人瞩目。该文概括了生物传感器的原理、发展以及分类。并以各类生物学识别元件为依据将生物传感器分为酶传感器、微生物传感器、组织器官传感器、细胞器传感器、免疫传感器、DNA传感器等几种基本类型,分别回顾了各类生物传感器在环境监测中的应用情况,并对其应用前景进行了展望。

抗肿瘤药用植物及其内生菌活性代谢产物的研究

综述近年来药用植物及其内生菌抗肿瘤活性代谢产物的研究成果。药用植物内生菌的次生代谢产物中,具有抗肿瘤作用的成分主要包含萜类化合物、生物碱类化合物、苯丙素类化合物、黄酮类化合物等多种活性物质,该研究结果为利用药用植物内生菌开发抗癌药物提供一条新的途径。

金针菇降解木质素的能力及相关酶活研究

通过对10个金针菇菌株研究发现,在液体培养下不同菌株降解木质素的能力有较大差异,其中金针菇J89-6具有一定的降解木质素的能力,降解率达46%.本文还测定了不同菌株的漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶三种木质素降解酶的酶活,结果显示漆酶的产量与木质素降解率呈正相关关系.

合欢花中总黄酮的提取工艺及对羟自由基清除作用的研究

采用乙醇为浸提溶剂从合欢花中提取黄酮类化合物,采用分光光度法测定提取液中黄酮类化合物的含量,通过单因素实验考察了乙醇浓度、料液比、浸提时间、浸提温度对合欢花总黄酮提取率的影响,在单因素实验基础上确定正交实验因素及水平,对提取条件进行优化,并且研究了合欢花提取液中黄酮类化合物对.OH的清除作用。实验结果表明,各因素对合欢花总黄酮提取率的影响程度依次为:乙醇浓度>料液比>浸提温度>浸提时间;提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度50%,料液比1∶25,提取时间2h,浸提温度70℃,在此条件下,合欢花总黄酮提取率为2.53%;合欢花中总黄酮提取液对.OH自由基有一定的清除作用,当合欢花总黄酮浓度达到0.06mg/mL时,对.OH自由基清除率为62.81%。

云芝漆酶的生物降解与染料脱色作用研究

［目的］研究云芝漆酶的生物降解和染料脱色作用。［方法］以云芝HS03发酵后所得漆酶粗制品，对麦草和锯末进行生物降解，并对几种常用染料进行脱色研究。［结果］结果表明：漆酶粗制品与纤维素酶、木聚糖酶协同作用大大提高了木质纤维素降解率，比单一组分酶获得还原性糖含量提高5～6倍。漆酶粗制品具有广谱的脱色作用，尤其对孔雀石绿、RB亮蓝的脱色率都超过了85％，脱色较为彻底，脱色高峰期为48～72 h。

胶原/纤维蛋白胶/载BSA微球复合支架的制备及体外性能研究

为改善组织工程支架材料内部营养供应不足及分布不均的问题,制备胶原/纤维蛋白胶/载BSA微球复合支架(SCFM)并研究其理化性质及其BSA释放行为。本研究中采用戊二醛交联并冷冻干燥制备多孔胶原海绵支架,纤维蛋白与载BSA的PLGA微球混合后加入凝血酶,注入胶原膜中制备复合支架,研究支架形态学、孔隙率、机械强度等理化性质;通过BCA试剂盒法测定支架内部不同部位BSA含量及释放行为,圆二色谱法检测BSA的二级结构。扫描电镜结果显示制备的胶原支架孔径分布均匀,孔径平均(130±45)μm;相对于胶原/纤维蛋白胶/BSA支架(SCFB),在体外释放48 h时累积释放率为75.20%±2.74%,随后BSA即不再显著增加;而支架SCFM中的BSA释放时间延长,持续释放144 h,测定其累积释放量为72.36%±3.48%;测定支架SCFM代表性的3个部位的BSA含量均匀,在释放96 h内均高于支架外BSA含量,且圆二色谱结果表明BSA二级结构未见异常。支架SCFM可长时间维持支架内部BSA含量,且持续均匀释放,是理想的组织工程支架材料。

云芝漆酶理化性质及动力学研究

主要研究pH值、金属离子、温度对云芝漆酶活性和稳定性的影响,以及该酶底物浓度效应和Km值测定.实验结果表明:Cu2+、Co2+对漆酶有激活作用,而Ag+则有抑制作用;该酶最适pH为4.8,在pH4～4.8表现出较强的稳定性;最适反应温度为40 ℃,低于50 ℃时有较好的热稳定性;Km值为4.2×10-3 mol/L.

谷氨酸能低下精神分裂症模型大鼠不同脑区核因子-κB表达分析

目的了解地卓西平马来酸盐[Dizocilpine maleate,MK-801]所致谷氨酸能低下精神分裂症大鼠前额皮质、海马、纹状体核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)基因的表达,探讨其参与精神分裂症的病理机制。方法12只雄性Spragus-Dawley大鼠随机分为模型组和对照组,前者给予腹腔注射MK-801(0.8mg/kg)建立精神分裂症模型,后者只注射生理盐水。采用小动物行为分析系统记录大鼠90min内自发活动,采用TransAM技术检测大鼠前额皮质、海马、纹状体的NF-κBp65亚基蛋白活性,半定量PCR检测NF-κBp65亚基基因mRNA的表达。结果①与对照组相比,模型组大鼠自发活动增加(P<0.05),并有典型的刻板行为和共济失调,表现出了类似精神分裂症的行为。②模型组前额皮质、海马、纹状体的NF-κBp65亚基蛋白活性均低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。③模型组前额皮质、海马、纹状体3个脑区NF-κBp65亚基mRNA表达均不同程度高于对照组相应脑区,但只有在前额皮质和纹状体两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论谷氨酸能低下精神分裂症模型大鼠前额皮质、海马、纹状体NF-κB的活性受到了抑制,而mRNA表达上调,提示NF-κB可能参与了精神分裂症的病理过程。

金属硫蛋白医学研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在于生物界的金属结合蛋白,因其功能独特,近年来对MT的研究日益受到重视。对MT的分子结构、性质、参与体内微量元素代谢、解除重金属的毒性、清除体内自由基、抗氧化损伤、防止机体衰老、应激能力等生物学功能进行了阐述,并对MT与肿瘤和其它疾病的关系等方面的研究进行了综述,并提出了MT研究中存在的问题及展望。

云芝产漆酶发酵条件的正交试验筛选

利用正交试验设计对影响云芝(Trametes versicolor)菌株HS-03产漆酶的7种单因素发酵条件进行系统优化。结果表明,培养基中碳源和氮源用量、培养基初始pH值、培养基体积等因子对该云芝漆酶产量均有明显的影响,云芝HS-03摇瓶产漆酶的最佳发酵条件为:葡萄糖7.5 g/L,酵母浸出液6 g/L,培养基初始pH值4.5,培养基初始体积70 mL(250 mL三角瓶)。同时培养基中含有2 mL/L Tween-80、2 mL/L愈创木酚、终浓度为0.5 mmol/L的Cu2+。