纯化血小板对大鼠软骨细胞增殖及膝骨关节炎大鼠软骨修复的作用研究

目的:观察纯化血小板(purified platelet rich plasma,pPRP)对大鼠软骨细胞增殖及膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠软骨修复的作用。方法:取5只SD大鼠抽取腹主动脉血,经多次离心后获得pPRP,并制成低(1×10~6个·mL^(-1))、中(1×10~7个·mL^(-1))、高(1×10~8个·mL^(-1))3种浓度的pPRP。5只SD大鼠抽取腹主动脉血后脱颈处死,取膝关节软骨分离软骨细胞。将培养的第3代软骨细胞分为生理盐水组、pPRP低浓度组、pPRP中浓度组和pPRP高浓度组,每组设5个复孔。各组细胞以无血清IMDM培养基处理后,生理盐水组更换为含10%FBS的培养基,pPRP低浓度组、pPRP中浓度组和pPRP高浓度组分别更换为含10%FBS和低、中、高浓度pPRP的培养基。分别于培养24、48、72 h后采用CCK-8法测定细胞增殖情况。另外选取30只SD大鼠随机分为空白组、KOA模型组和pPRP治疗组,每组10只。KOA模型组、pPRP治疗组大鼠通过向双侧膝关节腔内注射碘乙酸进行KOA造模,空白组不进行造模。1周后,向pPRP治疗组大鼠双侧后肢膝关节腔各注射50μL高浓度pPRP,向空白组和KOA模型组大鼠膝关节腔注射等量生理盐水,每周1次,共注射4次。药物干预结束后分别对各组大鼠进行步态分析、膝关节X线检查及膝关节病理学观察。结果:①软骨细胞增殖测定结果。培养24、48、72 h后4组软骨细胞活力比较,组间差异均有统计学意义(0.411±0.014,0.458±0.052,0.473±0.029,0.489±0.011,F=5.860,P=0.007;0.502±0.003,0.551±0.022,0.568±0.019,0.572±0.029,F=12.196,P=0.000;0.619±0.008,0.747±0.006,0.754±0.031,0.763±0.018,F=67.065,P=0.000)。培养24 h后,pPRP低浓度组、pPRP中浓度组、pPRP高浓度组细胞活力均高于生理盐水组(P=0.026;P=0.003;P=0.000);pPRP高浓度组和pPRP中浓度组的细胞活力均高于pPRP低浓度组(P=0.028;P=0.008);pPRP高浓度组的细胞活力高于pPRP中浓度组(P=0.002)。培养48 h后,pPRP低浓度组、pPRP中浓度组、pPRP高浓度组细胞活力均高于生理盐水组(P=0.002;P=0.008;P=0.006);pPRP高浓度组和pPRP中浓度组的细胞活力均高于pPRP低浓度组(P=0.033;P=0.027);pPRP高浓度组的细胞活力高于pPRP中浓度组(P=0.002)。培养72 h后,pPRP低浓度组、pPRP中浓度组、pPRP高浓度组细胞活力均高于生理盐水组(P=0.000;P=0.000;P=0.000);pPRP高浓度组和pPRP中浓度组的细胞活力均高于pPRP低浓度组(P=0.016;P=0.033);pPRP高浓度组的细胞活力高于pPRP中浓度组(P=0.029)。②步态分析结果。3组大鼠跑步过程中单位时间内(1 s)左后肢和右后肢着地面积比较,组间差异均有统计学意义[(2.36±0.49)cm^2,(1.68±0.18)cm^2,(1.98±0.26)cm^2,F=10.320,P=0.005;(2.82±0.59)cm^2,(1.91±0.29)cm^2,(2.41±0.31)cm^2,F=11.790,P=0.002]。空白组、pPRP治疗组大鼠左后肢着地面积均大于KOA模型组(P=0.002;P=0.008);空白组、pPRP治疗组大鼠右后肢着地面积均大于KOA模型组(P=0.001;P=0.002);空白组与pPRP治疗组大鼠左后肢及右后肢着地面积比较,组间差异均无统计学意义(P=0.050;P=0.068)。③X线检查结果。X线片显示空白组大鼠膝关节软骨完整,关节面平整;KOA模型组关节软骨明显退变,胫骨平台与股骨远端关节面均不平整,有骨赘样组织形成,并有软骨缺损迹象;与KOA模型组相比,pPRP治疗组大鼠膝关节软骨退变程度较轻微。④病理学检查结果。与空白组相比,KOA模型组大鼠膝关节软骨面明显缺损,缺损处软骨细胞丢失,软骨细胞排列紊乱,软骨下骨硬化,骨小梁面积明显减小,骨髓腔细胞增生、排列紊乱,骨小梁中的骨细胞明显减少;pPRP治疗组大鼠膝关节软骨面基本光滑,表面未见明显缺损或裂隙,部分区域内可见软骨细胞丢失,软骨下骨骨小梁排列尚整齐,骨小梁稀疏变窄,部分断裂。结论:pPRP可促进大鼠软骨细胞增殖;高浓度的pPRP可以在一定程度上修复KOA大鼠退变的关节软骨,改善运动能力。

温针联合刺络拔罐治疗膝骨关节炎疗效观察

目的观察温针联合刺络拔罐治疗膝骨关节炎(KOA)的临床疗效。方法选取KOA患者90例为研究对象,按就诊顺序编号随机分为观察组、对照组,每组45例。对照组采取常规西医疗法,观察组在此基础上予以温针联合刺络拔罐治疗,比较两组总有效率、治疗前后病情严重程度[Lequesne指数、膝关节西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数量表(WOMAC)]、疼痛度(简化McGill疼痛量表)、膝关节血流信号分级、关节滑液相关因子水平[白介素-1(IL-1)]、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、不良反应。结果观察组总有效率(95.6%)明显高于对照组(82.2%)(P<0.05);观察组治疗后Lequesne、WOMAC、McGill评分均低于对照组(P<0.01);治疗后3个月,观察组血流信号分级低于对照组(P<0.05);治疗后3个月,观察组关节滑液IL-1、TNF-a、MMP-3含量下降幅度大于对照组(P<0.05);观察组不良反应发生率(2.2%)低于对照组15.6%(P<0.05)。结论在西医治疗基础上采用温针联合刺络拔罐治疗优于单纯西医治疗,可明显改善患者病情、膝关节血流,减少疼痛及不良反应,可能通过下调IL-1、TNF-a、MMP-3含量而发挥作用。

电针围刺疗法联合龙胆泻肝汤加减治疗带状疱疹急性期疼痛的临床观察

目的观察电针围刺疗法联合龙胆泻肝汤加减治疗带状疱疹(AHZ)急性期疼痛的临床疗效。方法AHZ患者80例随机分为两组,对照组进行西医常规综合治疗,观察组在此基础上联合电针围刺疗法与龙胆泻肝汤加减治疗,均连续治疗15 d。比较两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群水平、治疗3、7、15 d疼痛视觉模拟评分(VAS)、皮损面积、临床症状积分,评价综合疗效并记录并发症发生情况。结果观察组治疗总有效率为92.50%,显著高于对照组的80.00%(P<0.05);两组治疗后疼痛VAS评分、皮损面积以及临床症状积分均显著降低,且观察组治疗后7、15 d上述指标显著低于对照组(P<0.05),治疗3 d组间比较差异无统计学意义(P<0.05);两组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+显著升高,CD8+显著下降(P<0.05),治疗后观察组优于对照组(P<0.05);两组并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针围刺疗法联合龙胆泻肝汤加减治疗能够显著缓解AHZ急性期疼痛,减少皮损面积,提高免疫功能,临床疗效更优。

激光针配合耳穴及中药治疗小儿抽动症的疗效观察

目的:探讨激光针配合耳穴及中药治疗小儿抽动症的疗效。方法:选择2013年1月-2016年1月80例小儿抽动症患儿分组。对照组单纯采用中药治疗,实验组给予激光针配合耳穴及中药治疗。比较效果。结果:实验组小儿抽动症治疗效果高于对照组,短暂性抽动障碍、慢性运动或发声抽动障碍消失时间短于对照组,干预后实验组耶鲁抽动症严重程度量表(YGTSS)评分优于对照组(P<0.05)。两组患儿治疗过程未出现严重不良反应。结论:激光针配合耳穴及中药治疗小儿抽动症的疗效确切,可缓解各种抽动障碍症状,改善患儿预后,缩短疗程,且无严重不良反应,安全性高。

高中语文课堂要注重的情境教学

诱思探究教学理论认为,创设情境,激发情意是教学过程中的重要贯穿要素,应贯彻于课堂教学的始终。在整个教学过程中,"都应该根据教学实际的需要,适时的创设最佳教学情境,以便通过情意的体验和意志的发挥,形成学习动机,激发学习兴趣,使学生始终保持一种最优化的心理情意状态,为顺利完成教学任务奠定动力基础。"因此,在教学过程中。