白桦脂酸通过RRAGD/mTOR/ULK1促进自噬改善血管平滑肌细胞钙化

目的 探讨白桦脂酸(Betulinic acid, BA)对高磷诱导血管平滑肌细胞钙化的作用机制。方法 采用2.6μmol·g^(-1)高磷诱导小鼠主动脉平滑肌细胞体外钙化模型,CCK8检测白桦脂酸对细胞活力的影响;加入白桦脂酸低、中、高剂量(5μmol·L^(-1)、10μmol·L^(-1)、20μmol·L^(-1))及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA,5μmol·g^(-1))。慢病毒过表达Ras相关GTP结合蛋白D(Ras-related GTP-binding Protein D,RRAGD)转染血管平滑肌细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR验证转染效率。采用茜素红染色、细胞内钙含量、碱性磷酸酶活性检测细胞钙化程度;Western blot检测血管平滑肌细胞钙化指标RUNT相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2),骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein, BMP2),平滑肌蛋白22α(Smooth muscle protein 22α,SM22α)和平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA);UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK1),自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ),泛素结合蛋白P62(P62),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin, mTOR)以及RRAGD的表达。结果 根据CCK8细胞活力结果选择白桦脂酸5、10、20μmol·L^(-1)剂量进行后续实验;钙水平、碱性磷酸酶活性及茜素红染色实验结果显示白桦脂酸改善高磷诱导血管平滑肌细胞钙化;Western blot结果显示白桦脂酸下调RUNX2、BMP2、RRAGD、p-mTOR、P62(P<0.05),上调SM22α、α-SMA、LC3Ⅱ/Ⅰ、p-ULK1的蛋白表达(P<0.05)。白桦脂酸减轻高磷诱导血管平滑肌细胞钙化的作用被自噬抑制剂3-MA和过表达RRAGD阻断。结论 白桦脂酸可能通过RRAGD/mTOR/ULK1信号通路促进自噬抑制血管平滑肌细胞钙化。

双反星形整流器的功率密度提升方法研究

为提高双反星形整流器的功率密度,文章提出了一种基于电力电子变压器的双反星形整流器拓扑。在该拓扑中,电力电子变换器和高频移相变压器构成电力电子变压器取代工频移相变压器,电力电子变换器采用AC-DC-AC式结构。为权衡系统的效率和功率密度,将变压器的工作频率提升至500 Hz。文章分析了两组三相半波整流电路的工作模态,推导了输入线电流和负载电压的解析表达式。仿真和实验均表明,该拓扑可在复制传统双反星形整流器性能的基础上,将变压器的体积降至工频变压器的1/3,提高系统的功率密度。

心阳片含药血清调控NLRP3介导细胞焦亡保护心肌细胞炎症损伤的作用及机制研究

目的通过观察心阳片含药血清调控NLRP3介导的细胞焦亡对心肌细胞炎症损伤的保护作用,探讨心阳片防治心力衰竭的作用机制。方法随机将40只雄性SD大鼠分成空白组、心阳片低、中、高剂量组,分别给予临床等效剂量的1、2、4倍心阳片(0.24、0.48、0.96 g/kg)灌胃;空白组给予等量蒸馏水进行灌胃。各组大鼠灌胃2次/d, 2 mL/次,连续灌胃7 d。末次给药灌胃后,腹主动脉取血,分离血清。用LPS/ATP(1μg/mL LPS刺激细胞24 h,再用5 mmol/L ATP刺激细胞4 h)处理HL-1心肌细胞,并分为:空白组(NC)、模型组(LPS/ATP+空白血清)、心阳片低剂量组(LPS/ATP+低剂量心阳片血清)、心阳片中剂量组(LPS/ATP+中剂量心阳片血清)、心阳片高剂量组(LPS/ATP+高剂量心阳片血清)。CCK8检测细胞活性,免疫荧光检测各组细胞NLRP3的表达情况,RT-qPCR检测NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA转录水平,Western Blot检测心肌细胞NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达情况。结果与空白组相比,LPS/ATP组HL-1细胞活力明显降低,NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA水平升高(P<0.05),NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达明显升高(P<0.05);与LPS/ATP组相比,心阳片含药血清低、中、高剂量组细胞活力增加,NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA水平降低(P<0.05),NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论心阳片含药血清能改善LPS/ATP诱导HL-1细胞炎症损伤,其机制可能是通过抑制NLRP3/IL-1β介导的细胞焦亡发挥作用。

卫星胶质细胞对痛性糖尿病周围神经病变影响的研究进展

痛性糖尿病周围神经病变是糖尿病常见并发症,是以疼痛症状为主的周围神经性痛。卫星胶质细胞(SGC)是外周神经的胶质细胞,广泛存在于背根神经节中。SGC通过缝隙连接蛋白相互联系在周围神经中,表达多种神经活性递质及嘌呤受体,是感觉神经节信号沟通和传递的参与者,并在神经痛觉过敏中发挥重要作用。神经损伤后SGC上的嘌呤受体P2X7会被高浓度的三磷腺苷激活,发生自身通透性改变。SGC之间缝隙连接蛋白表达异常,导致神经元兴奋,增强机械和热痛觉过敏,加重神经性疼痛。因此,了解周围神经元中SGC的细胞交流及病理条件下促进感觉神经元产生慢性疼痛的作用机制非常关键。本文就SGC与周围神经元的作用机制加以综述,旨在为痛性糖尿病周围神经病的治疗提供研究方向和潜在靶点。

心阳片含药血清调控MLK3介导的铁死亡对心肌细胞的保护作用及机制研究

目的探讨心阳片含药血清调控MLK3介导的铁死亡对心肌细胞的保护作用及机制。方法20只SD大鼠随机分为对照组和含药血清组,含药血清组按照人与动物体表面积等效剂量换算,给予心阳片0.24 g/kg进行灌胃,每日2次,对照组给予等量生理盐水灌胃,连续灌胃7 d后制备血清。将心肌细胞HL-1分为空白组(Control)、FIN56组、FIN56+URMC-099组(FIN56+U-099)、FIN56+心阳片含药血清组(FIN56+XYP)。收集上述各组细胞,ROS荧光染色检测HL-1细胞活性氧水平,测定HL-1细胞MDA、T-SOD和GSH表达水平,RT-PCR检测各组细胞ANP和BNP mRNA水平,Western Blot法检测各组细胞MLK3、p53、GPX4和FTH1蛋白表达水平。结果与空白组相比,FIN56组细胞ROS、MDA表达水平显著升高(P<0.01),T-SOD和GSH表达水平降低(P<0.01)。ANP和BNP mRNA表达水平显著升高(P<0.01),MLK3和p53蛋白表达水平显著升高(P<0.01),GPX4和FTH1蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与FIN56组比较,给予URMC-099和心阳片含药血清能降低ROS、MDA表达水平(P<0.01),升高T-SOD和GSH表达水平(P<0.01)。显著抑制ANP和BNP mRNA的表达(P<0.01)以及MLK3和p53蛋白表达(P<0.01),激活GPX4和FTH1蛋白表达(P<0.01)。结论心阳片含药血清可能通过调控MLK3,抑制心肌细胞铁死亡改善心肌损伤。

恋爱推理类真人秀《心动的信号》节目模式创新研究

我国恋爱类真人秀节目近几年来发展迅速,作为其分支,恋爱推理类真人秀《心动的信号》因其独特的节目形式深受观众的喜爱。本文选取《心动的信号》作为研究对象,对其创新之处进行讨论和分析,并针对恋爱推理类真人秀节目未来的发展提出一些建议。

基于电力电子变压器的串联型12脉波整流器

针对串联型多脉波整流器中移相变压器体积大与重量高等问题,研究一种基于电力电子变压器的串联型12脉波整流器。该整流器由AC-AC变换器及高频多脉波整流器组成;分析了AC-AC变换器的工作原理,并根据工作原理设计了其控制策略,获得了AC-AC变换器输入、输出电压之间的定量关系;设计了Y/Δ/Y型移相变压器,并根据其结构获得了其输入电压与整流桥输入电压之间的数学关系;利用开关函数法确定了2个三相二极管整流桥的导通模态,建立了电力电子变换器输入电压与整流器输出电压之间的定量关系;引入等效电阻的概念,建立了整流器解析模型,获得了电力电子变压器输入电流以及输入功率因数的表达式。仿真和实验结果表明,使用电力电子变压器代替工频主变压器后,主变压器体积和重量减小三分之二,电力电子变压器输入电流THD值为6.5%左右,负载电压和电流保持恒定。

心脉康增强血管平滑肌细胞自噬改善ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化

目的探讨心脉康(鳖甲、三棱、莪术等组成)调节血管平滑肌细胞(VSMC)自噬改善动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法72只敲除载脂蛋白E基因(ApoE^(-/-))的小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物(阿托伐他汀钙片)对照组(2.6 mg·kg^(-1))及心脉康低、中、高(30、60、90 g·kg^(-1))剂量组,每组12只。空白组小鼠喂养常规饮食,余下各组喂养高脂饮食12周,建立AS模型。模型复制成功后给予心脉康灌胃6周,每天1次。检测小鼠血清血脂四项:总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C);油红O、HE和Masson染色观察小鼠主动脉根部血管组织病理变化;免疫荧光检测主动脉根部血管组织微管相关蛋白l轻链3B(LC3B)和平滑肌22 alpha蛋白(SM22α)的表达;采用Western Blot法检测主动脉血管组织中LC3B、自噬效应蛋白1(Beclin-1)和SM22α蛋白的表达水平;qRT-PCR法检测主动脉中LC3B、Beclin-1和SM22αmRNA的表达。结果与空白组比较,模型组小鼠血清血脂四项结果显示,HDL-C下降,TC、TG、LDL-C均升高(P<0.05);油红O、HE和Masson染色结果显示,小鼠主动脉根部血管组织斑块面积增多,内壁增厚并伴有大量胆固醇结晶以及炎症细胞浸润,胶原纤维含量减少;免疫荧光结果显示,LC3B和SM22α共定位面积明显减少(P<0.05);qRT-PCR和Western Blot结果显示,LC3B,Beclin-1和SM22α蛋白及m RNA表达下降(P<0.05)。与模型组比较,心脉康低、中、高剂量组及阳性药物对照组HDL-C水平明显升高,TC、TG、LDL-C水平明显降低(P<0.05);主动脉内斑块面积减少,胆固醇结晶以及炎症浸润降低,胶原纤维含量增多;LC3B和SM22α共定位面积明显增加(P<0.05);LC3B、Beclin-1、SM22α蛋白以及mRNA表达增加(P<0.05)。结论心脉康能降低血脂水平,减少斑块面积,改善动脉粥样硬化,其机制可能与增强血管平滑肌细胞自噬水平有关。

莪术醇通过PTEN/PI3K/AKT通路调控肝癌细胞自噬和上皮间质转化的机制

目的:探讨莪术醇对肝癌细胞自噬和上皮间质转化的的调控机制。方法:采用CCK-8、Transwell和划痕实验检测莪术醇对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响。Western Blot检测不同浓度莪术醇对磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇-3肌酶(PI3K)/蛋白激酶(AKT)通路、上皮间质转化和自噬相关蛋白的影响。加入Rapa或3-MA后,单丹磺酰尸胺(MDC)染色法检测自噬囊泡的聚集情况,Western Blot检测上皮间质转化和自噬相关蛋白的表达水平,划痕实验检测细胞迁移能力的变化。结果:莪术醇以时间、剂量依赖的方式抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移。莪术醇干预后,PI3K、p-AKT蛋白水平下降(P<0.01)、PTEN蛋白水平升高(P<0.01);Vimentin蛋白下调(P<0.01)、E-cadherin蛋白上调(P<0.01);LC3-Ⅱ蛋白上调、P62蛋白下调。3-MA能够逆转莪术醇对HepG2细胞的抑制效应。结论:莪术醇可显著抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能是调控PTEN/PI3K/AKT通路介导的细胞自噬和上皮间质转化。

黄芪甲苷通过AMPK/ACSS2/PPARα信号通路改善心肌细胞能量代谢的机制研究

目的:探讨黄芪甲苷对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的HL-1心肌细胞肥大的作用机制。方法:将HL-1心肌细胞分为空白组,AngⅡ组,黄芪甲苷低、中、高剂量组,共同培养24 h。收集各组细胞,CCK8检测细胞活性,检测细胞ATP含量,免疫荧光检测细胞ACSS2的表达情况,RT-PCR、Western Blot检测细胞心肌肥大相关指标mRNA及蛋白表达情况。结果:与AngⅡ组比较,黄芪甲苷各剂量组细胞活力显著增加(P<0.01),细胞内ATP含量显著升高(P<0.01),ANP、BNP、Myh7 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.01),AMPK、ACSS2、PPARαmRNA水平显著升高(P<0.01),p-AMPK/AMPK、ACSS2、PPARα、PGC-1α蛋白表达显著增加(P<0.01)。结论:黄芪甲苷可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,改善心肌细胞能量代谢,其机制可能与激活AMPK/ACSS2/PPARα信号通路有关。

心阴片通过MLK3调控巨噬细胞M1极化对慢性心力衰竭心肌纤维化的机制研究

目的:观察心阴片调控混合谱系激酶3(MLK3)对慢性心力衰竭(CHF)心肌纤维化的作用。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为假手术组,模型组,心阴片低、中、高剂量组、培哚普利组,每组25只。构建压力负荷小鼠模型并连续给药1周,进行心脏超声检测。通过组织病理学染色观察心肌胶原纤维改变,RT-qPCR、Western Blot检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、白细胞介素-6(IL-6)、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA和MLK3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达情况。结果:与模型组比较,心阴片各组及培哚普利组小鼠心功能显著提高(P<0.05),炎症细胞浸润减少、纤维化程度降低,纤维化及炎症因子相关蛋白MLK3、α-SMA、iNOS、IL-6、TNF-α和MMP2、IL-6、CollagenⅠ、CollagenⅢmRNA表达显著下降(P<0.05)。结论:心阴片能抑制心肌纤维化改善CHF小鼠疾病进展,其机制可能通过MLK3调控巨噬细胞M1极化发挥作用。