血小板活化因子参与血小板-中性粒细胞活化的研究

本研究的目的是探讨全血中血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)参与血小板中性粒细胞相互作用的病理生理机制,为PAF受体拮抗剂的临床应用提供理论依据。将PAF受体拮抗剂银杏内酯B(ginkgolidesB,GBBN52021)加入全血中,以阻断PAF对血小板中性粒细胞的活化作用;将已知的PAF及二磷酸腺苷(ADP)分别加入全血中,用流式细胞术(FCM)检测血小板CD62P的表达;将已知的PAF及ADP分别加入全血中,用FCM检测中性粒细胞细胞CD11b的表达;将PAF及ADP分别加入全血中,用FCM检测血小板白细胞聚集物(PLA),即PLA/L包括百分率及CD42b中位荧光浓度(MFI)。结果表明:PAF及ADP均增加CD62P、CD11b、PLA的表达;PAF受体拮抗剂(银杏内酯B)明显抑制PAF诱导的CD62P、CD11b的表达及PLA的形成,但不能完全抑制血小板、中性粒细胞的活化及血小板白细胞之间的相互作用;银杏内酯B也抑制ADP诱导的CD62P、CD11b的表达,但不能完全抑制血小板、中性粒细胞活化;银杏内酯B对ADP诱导的血小板白细胞的聚集无明显抑制作用。结论:血小板中性粒细胞的相互作用机制复杂,有多种细胞因子、化学介质参与其中,有多种配基受体介导血小板中性粒细胞的交互作用。PAF受体拮抗剂—银杏内酯B有明显拮抗PAF的作用,在防治血栓形成与炎症过程中可能具有广泛的应用?

急性白血病细胞DNA指数、DNA倍体变化的临床意义

目的观察不同病期急性白血病患者外周血白血病细胞DNA指数及DNA倍体的变化,探讨其与预后的关系,指导临床诊断和治疗。方法应用流式细胞术(FCM)检测58例急性白血病患者DNA指数和DNA倍体。结果急性白血病完全缓解(CR)者DNA指数、DNA非整倍体率均明显低于复发者,初治CR者明显低于初治非CR者。结论初诊时表现为DNA整倍体及低DNA指数的急性白血病患者具有较好的治疗效果。DNA指数和DNA非整倍体率可作为制定急性白血病患者化疗方案时的重要参考指标。

白细胞介素-1B基因多态性分布与胃癌易感性的相关性研究

目的 研究白细胞介素 - 1B(IL- 1B)基因多态性与胃癌间的相关性 ,建立本地区 IL- 1B基因多态性正常分布。方法 应用基因芯片测定了 5 4例济南地区正常人群中 IL - 1B基因启动子区域内 - 31(T- C转换 )和 -5 11(C- T转换 )位点多态性。结果 本组 - 31CC、- 31CT、- 31TT和 - 31C携带者出现的频率分别为 2 7%、70 %、3%和 97% ;- 5 11CC、- 5 11CT、- 5 11TT和 - 5 11T携带者出现的频率分别为 39%、35 %、2 6 %和 6 0 % ;- 31CC/- 5 11TT基因频率 (14 .5 % )高于 - 31TT/- 5 11CC基因频率 (5 % )。结论 不同地区和不同种族间 IL - 1B- 31和 - 5 11位点多态性分布存在差别 ,这种差别与不同地区和种族间胃癌的易感性相关。

蛋白芯片在健康查体人群CA125普查中的应用

目的 :探讨蛋白芯片和ELISA法在普通人群CA12 5普查中的应用价值。方法 :应用肿瘤标志物蛋白芯片系统 (芯片法 )和酶联免疫吸附试验 (ELISA )对2 2 7例健康查体成人血清中CA12 5进行测定。结果 :在 2 2 7例中 ,CA12 5法有 7例升高 ,ELISA法有 4例升高。两种方法存在高度相关 ,P <0 0 0 0 1。在 7例CA12 5升高的人中 ,2例证实为卵巢癌 ,4例为结直肠癌 ,1例为肺癌。结论 :芯片法用于普通人群CA12 5普查可及时发现肿瘤。

雷公藤多甙致再生障碍性贫血3例报告并文献复习

目的 :探讨雷公藤多甙所致药源性再生障碍性贫血的发病机制。方法 :对 3例服用雷公藤多甙导致再生障碍性贫血患者的临床资料进行分析 ,并结合文献复习。结果 :雷公藤多甙所致药源性再障均为急性发病 ,服药与起病之间关系不定 ,服药剂量与再障的发生无明显相关性 ;为可逆性骨髓造血功能衰竭。结论 :雷公藤多甙可引起服药者发生异常免疫反应 ,损伤造血干 (祖 )细胞 。

深静脉血栓患者抗凝与纤溶功能研究

目的 :通过对深静脉血栓形成 (DVT)患者抗凝和纤溶系统各种指标的检测 ,探讨高凝状态在DVT患者发病机制中的重要作用。方法 :选择 72例经超声和 (或 )静脉造影确诊的DVT患者 ,以 70例健康体检者作为对照组测定抗凝血酶 Ⅲ (AT Ⅲ )活性、蛋白C(PC)活性、总蛋白抗原S(PS)、纤溶酶原 (Plg)活性、纤溶酶原激活剂抑制物 1(PAI 1)、D 二聚体 (D dimer)、尿激酶 (uPA)和尿激酶受体 (uPAR)含量。结果 :DVT患者的AT Ⅲ活性、PC活性和PS含量明显低于对照组 ,患者组中抗凝蛋白AT Ⅲ、PC和PS缺陷的发生率明显高于对照组 ,其中复发组的AT Ⅲ、PC和PS缺陷的发生率明显高于初发组。DVT患者的Plg含量明显低于对照组 ,而PAI 1、D dimer、uPA、uPAR水平明显高于对照组。患者组中D dimer含量 >5 0 0ng/L者占97.2 % ,而对照组仅占 1.4 %。结论 :DVT患者中普遍存在抗凝功能的降低 ,表现为各种抗凝蛋白水平的降低 ,DVT患者中抗凝蛋白缺陷的发生率明显高于对照组 ,复发DVT患者的抗凝蛋白缺陷发生率明显高于初发患者 ,证明抗凝蛋白缺陷是DVT发生和复发的重要因素之一。DVT患者普遍存在纤溶功能的降低 ,表现为Plg含量的降低和PAI 1含量的升高 ,患者组uPA和uPAR含量明显高于对照组 ,主要是由于uPA/uPAR介导的纤溶活性在DVT发生后?

高表达Delta4增加Notch基因的表达

Notch信号传导系统在介导造血细胞增殖与分化过程中具有重要作用。通过分子克隆技术成功构建含标记基因FLAG的Notch配基Delta4的高表达载体pTracer CMV Delta4 FLAG ,瞬时转染COS7细胞 ,4 8h后收获细胞并制备融合蛋白 ,SDS PAGE凝胶电泳和Western blot证实后 ,将其稳定转染CHO细胞 ,Western blot鉴定并筛选高表达Delta4的Delta4 CHO1 4及Delta4 CHO1 5细胞株 ,利用Luciferase分析方法进行Delta4功能性研究。研究结果发现Delta4对Notch1及Notch2均具有信号功能活性 ,且对后者的活性功能水平大于前者 ,说明Delta4为Notch1及Notch2的配基。与其他配基功能比较 :对Notch1,Delta4的功能活性高于Delta1及Jagged1,但略低于Jagged2 ;对Notch2 ,Delta4的功能活性低于Delta1、Jagged1及Jagged2 ,但亦具有较强的活性水平。

银杏内酯B抑制中性粒细胞活化的研究

目的研究银杏内酯B(GB,抗血小板聚集)抑制血小板活化因子(PAF)介导的中性粒细胞活化。方法将银杏内酯B加入抗凝全血中,阻断PAF对中性粒细胞活化;用PAF及二磷酸腺苷(ADP)活化下述各组的中性粒细胞,包括对照组、PAF组、PAF+GB组、ADP组和ADP+GB组,用流式细胞术检测中性粒细胞整和素(CD11b)平均荧光强度。结果 PAF及ADP均可明显增加中性粒细胞CD11b的平均荧光强度,银杏内酯B可明显抑制PAF及ADP诱导的CD11b的平均荧光浓度。结论银杏内酯B可明显抑制PAF介导的中性粒细胞活化。

Delta4的功能性研究及与其他Notch配体的比较

目的:探讨Delta4基因在Notch传导机制中的作用。方法:构建pTracer.CMV.Delta4.FLAG载体,瞬时转染COS7细胞、稳定转染CHO细胞,筛选高表达Delta4的稳定CHO细胞系。用Luciferase分析,观察并比较Delta4对Notch1-CHO及Notch2-CHO两个宿主细胞的信号功能活性,与Delta1、Jagged1及Jagged2比较,从而对此基因定性并获知其信号功能活性水平。结果:Western-blot证实pTracer.CMV.Delta4.FLAG可瞬时转染COS7细胞及稳定转染CHO细胞,并根据Delta4蛋白表达条带的强弱筛选高表达Delta4-CHO细胞系。Delta4对Notch1及Notch2均具有信号功能活性,且对后者的活性功能水平大于前者。对Notch1,Delta4的功能活性略低于Jagged2,但高于Delta1及Jagged1;对Notch2,Delta4的功能活性低于Delta1、Jagged1及Jagged2,但亦具有较强的活性水平。结论:建立的Delta4-CHO细胞系功能稳定,Delta4为Notch1及Notch2的配体,且对Notch2的活性水平高于Notch1。

急性脑梗塞溶栓治疗的IL-1β、IL-6、TNF-α动态变化研究

采用溶栓疗法治疗 32例急性脑梗塞患者 ,并与用常规方法治疗者进行对照 ,观察两组疗法对白细胞介素 1β (IL - 1β)、白细胞介素 6 (IL - 6 )及肿瘤坏死因子 (TNF-α)的影响 ,并对其疗效进行分析。结果显示 ,溶栓组 IL- 1β、IL- 6及 TNF- α在溶栓后 2小时及 6小时明显下降 ,与其疗效及预后显著相关 ;与对照组比较 ,其欧洲卒中评分 (ESS)和 3个月后的每日生活活动 (Bathal)指数明显改善。提示溶栓组的近、远期效果均明显优于对照组。

急性白血病M4Eo型患者ETV6基因重排及其意义

目的探讨在急性髓细胞白血病(AML)M4Eo型患者中检测到ETV6基因重排的临床意义。方法对3例AML-M4Eo患者骨髓标本进行细胞培养,制备染色体,分析核型,Split-signal FISH技术分析12p13染色体易位,RT-PCR检测ETV6/ARG融合基因产物。结果核型分析显示3例患者均有inv(16),Split-signal FISH检出12p13染色体易位1例,RT-PCR证实患者ETV6/ARG融合基因产物阳性。这是国际上第2例报道ETV6/ARG融合基因在AML-M4Eo中表达。结论伴有ETV6/ARG融合基因的患者对化疗不敏感,预后较ETV6/ARG融合基因阴性者差。Split-signal FISH是检测ETV6基因重排准确可靠的手段。

急性白血病血浆Ⅷ和Ⅸ凝血因子活性测定意义

目的:探讨急性白血病患者凝血因子Ⅷ和Ⅸ的活性变化。方法:采用ACL-200型血凝自动分析仪,测定了20例化疗后急性白血病患者新鲜血浆中凝血因子Ⅷ和Ⅸ活性水平。结果:患者因子Ⅷ和Ⅸ活性水平明显高于正常对照(P<0.05),与化疗疗效无关(P>0.05),其升高程度在M_3中最高,其次是ALL(P<0.05),而在M_5中与对照组相比无明显差异。结论:化疗后急性白血病患者因子Ⅷ和Ⅸ活性水平明显高于正常人,可能与患者体内纤溶亢进引起的代偿性反应有关。

血小板活化因子参与血小板-中性粒细胞活化的研究

血小板活化因子是一种内源性脂类介质,在血栓形成、急性炎症等病理生理过程中起重要作用,血小板活化因子作为最强的血小板聚集诱导剂,一种很强的炎性因子,在参与血小板-中性粒细胞的活化中起着重要作用。许多血小板活化因子受体拮抗剂,可以拮抗特异性受体,抑制其对血小板-中性粒细胞的活化作用。研究表明,血小板活化因子参与血小板-中性粒细胞的相互作用,是多种细胞因子、化学介质参与其中的病理生理过程,不同配体-受体系统介导血小板-中性粒细胞的相互作用。

血小板活化因子拮抗剂对抗血小板活化研究

目的:用全血流式细胞术方法,研究血小板活化因子(PAF)激活血小板的病理-生理过程,为PAF特异性拮抗剂的临床应用,提供理论依据。方法:将PAF受体拮抗剂银杏内酯B(GB)加入全血中,以阻断PAF对血小板的活化作用;用PAF及二磷酸腺苷(ADP)分别加入全血中,激活血小板,流式细胞术(FCM)检测活化后血小板P-选择素(CD62P)的表达。结果:①PAF组、ADP组和对照组CD62P百分率分别为76.08±7.36、64.74±9.92、24.92±4.49,各组之间差异有统计学意义(P<0.01)。②PAF组、PAF加GB组和对照组CD62P百分率分别为76.08±7.36、57.83±7.04、24.92±4.49,各组之间差异有统计学意义(P<0.01)。③ADP组、ADP加GB组和对照组CD62P百分率分别为64.74±9.92、52.67±8.93、24.92±4.49,各组之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:①PAF及ADP均增加CD62P的表达,但PAF较ADP有更强的血小板活化作用。②GB明显抑制PAF诱导的CD62P的表达,但不能完全抑制血小板的活化,表明许多细胞因子及递质参与其中。③PAF受体拮抗剂(GB)也抑制ADP诱导的CD62P的表达,但不能完全抑制血小板的活化,表明PAF的自分泌作用及多种细胞之间的相互作用。④GB有明显拮抗PAF的作用,在血体形成具有广泛的应用前景。

ETV6-NTRK3融合基因研究进展

ETV6-NTRK3融合基因是在研究先天性纤维肉瘤具有的染色体重排t(12;15)(p13;q25)时发现的,它编码的蛋白是通过ETV6转录因子的螺旋-环-螺旋结构域与NTRK3的蛋白酪氨酸激酶结构域连接在一起的。ETV6-NTRK3融合蛋白通过胰岛素样生长因子受体底物1连接蛋白与多种信号级联放大相连接。研究发现,一种功能性的胰岛素生长因子1受体和高重复序列的多聚体在ETV6-NTRK3融合基因的致癌性中起着重要作用,其他一些肿瘤如分泌型乳腺癌也表达ETV6-NTRK3融合基因。因此,ETV6-NTRK3融合基因可以表达在多种细胞来源的肿瘤中,这一点比较具有特殊性。

ETV6-NTRK3融合基因与肿瘤相关性研究

ETV6 NTRK3为一新近发现的融合基因 ,应用逆转录聚合酶链反应和染色体免疫荧光原位杂交等技术研究发现 ,ETV6 NTRK3在先天性纤维肉瘤、先天中胚层肾瘤等多种肿瘤中均有表达 ,并具有独特的生物学特征。现就ETV6 NTRK3融合基因与肿瘤相关性研究作一综述。

骨髓浸润非霍奇金淋巴瘤患者中TEL重排表达及意义

目的:检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)中TEL重排的表达,探讨TEL重排与伴骨髓浸润NHL临床特征、实验室检查及疗效的关系。方法:收集163例(伴骨髓浸润者38例,不伴骨髓浸润者125例)NHL骨髓,应用Split-FSIH技术检测TEL重排,依据结果将伴骨髓浸润NHL分为阳性组和阴性组,比较两组初诊时临床特征、实验室检查及疗效。结果:163例NHL中,TEL重排总检出率为3.68%,其中38例伴骨髓浸润NHL中,TEL重排检出率为13.2%,其余患者为0.8%,两者比较差异有统计学意义;TEL重排与年龄、白细胞数、血清LDH水平相关,而与性别、B症状、肝脾及淋巴结肿大、细胞来源、血红蛋白水平、血小板计数无关。5例重排阳性者,1例化疗有效,中位生存期3个月,33例重排阴性者,除2例放弃治疗外,23例化疗有效,中位生存期15个月。结论 :TEL重排阳性者易合并骨髓侵犯,此类患者侵袭性更高,预后更差。

检测骨髓增生异常综合征的ETV6/JAK2融合基因产物的意义

目的:探讨在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者中检测ETV6/JAK2融合基因产物的临床意义。方法:对66份来自MDS患者的骨髓标本进行骨髓细胞培养,制备染色体,做核型分析,对涉及9p24与12p13易位的患者检测ETV6/JAK2融合基因产物。结果:66例MDS中检出染色体畸变24例,染色体畸变率36%;其中低危MDS的染色体畸变率为25%(5/20);高危MDS的染色体畸变率为63%(19/30),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。涉及9p24和12p13易位1例,为RAEB-t患者,核型为46,XX,-6,t(9;12;22)(p24;p13;q11),+mar。行逆转录PCR检测ETV6/JAK2融合基因产物(+)。该患者在诊断MDS后5个月死于感染。结论:对MDS患者进行骨髓的ETV6/JAK2融合基因产物检测有助于了解病情的严重程度,便于指导治疗。