黄芩素与黄芩苷联合用药对口腔鳞癌细胞增殖、迁移的影响

目的探讨黄芩素与黄芩苷联合用药在体外条件下对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)CAL-27细胞的增殖、迁移能力的影响。方法应用MTT法检测黄芩素、黄芩苷及联合用药时对CAL-27细胞增殖能力的影响;应用划痕实验检测黄芩素、黄芩苷及联合用药时对CAL-27细胞迁移能力的影响;应用免疫荧光实验检测上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的上皮标志物E钙粘蛋白(E-cadherin)与间充质标志物N钙粘蛋白(N-cadherin)的表达情况。结果MTT结果显示黄芩素与黄芩苷对CAL-27细胞的增殖均有抑制作用,随着浓度的增加,抑制率逐渐增强,而联合用药组对CAL-27细胞的抑制作用明显高于黄芩素及黄芩苷单药组(P=0.045,P=0.001),联合用药指数(Combination Index,CI)<1;划痕实验结果显示,24 h时,联合用药组和单药组的细胞愈合率均显著低于对照组(P=0.001,P=0.002,P=0.001),且联合用药组低于单药组(P=0.003,P=0.002);免疫荧光结果显示,黄芩素、黄芩苷及联合用药组与对照组相比,E-cadherin蛋白的表达升高,N-cadherin蛋白的表达降低,且联合用药组较单药组差异更为显著。结论黄芩素与黄芩苷均可抑制CAL-27细胞的增殖及迁移,且联合用药对CAL-27细胞增殖及迁移的抑制能力强于黄芩素与黄芩苷组,抑制作用可能与EMT的逆向表达有关。

大蒜素对口腔鳞状细胞癌治疗作用的研究

目的通过体外实验探讨大蒜素对口腔鳞癌的治疗作用,并运用网络药理学方法分析其可能的机制。方法通过CCK-8方法、划痕实验及Transwell实验在体外检测大蒜素对SCC-15细胞增殖活性、迁移能力及侵袭活力的影响。获取口腔鳞癌致病基因数据集,根据大蒜素的2D和3D结构预测潜在作用靶基因,构建蛋白互作网络并分析富集网络中的KEGG通路及GO功能。结果大蒜素浓度在200μmol/L以上时可明显抑制SCC-15细胞增殖,且抑制作用随时间及浓度增高而增大(P<0.01)。筛选出的大蒜素潜在靶基因中,有12个基因与口腔鳞癌靶致病基因相交集。KEGG分析揭示交集与细胞周期、p53信号通路等有关。GO分析提示交集对口腔鳞癌细胞的生物进程、分子功能及细胞组分有多重影响。结论大蒜素可能通过多靶点影响多信号通路,从而对口腔鳞癌细胞起到治疗作用。

微波消融对骨肉瘤肺转移的影响

目的:探讨微波消融治疗骨肉瘤对其肺转移的影响及可能机制。方法:用含有1×10~7个大鼠源骨肉瘤UMR106细胞的悬液于SD大鼠右下肢皮下注射建立骨肉瘤移植模型,将其随机分为对照组和消融组。消融组大鼠肿瘤予以微波消融治疗10 min,50℃,空白对照组大鼠模拟消融10 min,0℃,检测和比较两组大鼠肿瘤直径变化,于治疗15天后处死大鼠,取大鼠肿瘤及肺组织,通过HE染色以及免疫组化检测基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMPs)及其拮抗因子(Tissue inhibitors metalloproteinase),即MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表达。结果:消融组大鼠肿瘤直径明显小于对照组大鼠肿瘤直径,消融组大鼠肿瘤组织及肺组织MMP-2及MMP-9的阳性表达均显著高于对照组(P<0.05),而TIPM-2的阳性表达则明显低于对照组(P<0.05)。结论:微波消融技术治疗骨肉瘤可以抑制骨肉瘤细胞的增殖,甚至引起细胞凋亡,并且通过上调MMP-2、MMP-9以及下调TIMP-2的表达,可能会提高其远处转移发生的风险。

蜂毒肽对口腔鳞癌细胞的增殖及迁移能力的影响

目的探讨蜂毒肽对人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞系Scc-15、Tca8113、Cal-27增殖性、迁移性的影响及其作用机制。方法以用四种不同浓度梯度(2、4、8、16μg/ml)的蜂毒肽分别处理的OSCC细胞系为蜂毒肽组,以不含药的培养液处理的细胞系为对照组。采用MTT实验检测蜂毒肽对OSCC细胞系Scc-15、Tca8113、Cal-27增殖的抑制作用;划痕实验观察蜂毒肽对Scc-15细胞迁移能力的抑制效果;Transwell实验验证蜂毒肽对Scc-15细胞侵袭能力的抑制作用;Western blot检测蜂毒肽作用于Scc-15细胞后核因子(NF)κB、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9的表达情况。结果MTT检测结果示,相对于对照组,2、4、8、16μg/ml蜂毒肽组的Scc-15、Tca8113、Cal-27细胞增殖存活率均明显降低,且呈浓度依赖性(P均<0.01)。划痕实验结果示,在细胞划痕培养6、12和24 h时相对于对照组,8、16μg/ml蜂毒肽组的Scc-15细胞划痕愈合率均明显降低,且呈浓度依赖性(P均<0.01)。Transwell侵袭实验结果示,对照组与16μg/ml蜂毒肽组穿过滤过膜的Scc-15细胞数分别为(46.0±2.3)个/视野和(21.0±1.7)个/视野,蜂毒肽组显著少于对照组(P<0.01)。Western blot结果示,相对于对照组,加入蜂毒肽后,Scc-15细胞的NF-κB蛋白表达量显著下降(P<0.01)、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量显著升高(P均<0.01)。结论蜂毒肽可显著抑制OSCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力,还可促进OSCC细胞凋亡,其作用机制可能与NF-κB的生成减少相关。