肾康制剂治疗糖尿病肾病的作用机制及临床研究进展

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN或diabetic kidney disease,DKD),是一种糖尿病所致的慢性肾脏病(CKD),主要临床表现为肾小球滤过率<60 ml·min^(-1)·1.73 m^(-2)和(或)尿白蛋白/肌酐比值≥30 mg/g并持续3个月以上[1]。DN是糖尿病(DM)中最常见的微血管并发症之一,在全球范围内,DN是CKD的首要病因,是导致终末期肾病(ESRD)的第二原因,亦是DM患者发生心血管病变和早发死亡的重要危险因素[2]。国外临床资料显示DM患者中DN的患病率为20%~40%[3],我国DN的患病率亦呈快速增长趋势,一项荟萃分析显示,我国2型DM患者的DN患病率为21.8%[4],并处于不断上升趋势。DN已然成为全球关注的重点话题,但现阶段尚无根治的特效疗法。

通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路的影响研究

目的探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法于2014年3月,选取无特定病原体(SPF级)雄性SD大鼠70只,10只为对照组;60只制作糖尿病足大鼠模型,然后随机分为模型组、西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组、西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组、通心络+外周血间充质干细胞移植组各10只。完成相应实验操作28 d后,检测并比较各组大鼠的外周血间充质干细胞及缺血下肢肌组织中的内皮糖蛋白(CD)105、细胞周期蛋白(cyclin D_1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)表达水平。结果通心络+外周血间充质干细胞移植组大鼠的干细胞数、积分光密度高于外周血间充质干细胞移植组、西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义(P<0.05);西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组大鼠的干细胞数、积分光密度高于外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义(P<0.05)。6个造模组大鼠缺血下肢肌组织中CD_(105)、cyclin D_1、p-Akt表达水平低于对照组,p-GSK-3β表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);5个用药组大鼠缺血下肢肌组织中CD_(105)、cyclin D_1、p-Akt表达水平高于模型组,p-GSK-3β表达水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);通心络+外周血间充质干细胞移植组大鼠缺血下肢肌组织中CD_(105)、cyclin D_1、p-Akt表达水平高于西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组,p-GSK-3β表达水平低于西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通心络联合外周血间充质干细胞移植可以通过调节PI3K/Akt信号通路,促进内皮细胞增殖、分化,从而促进糖尿病足大鼠的新生血管形成。

糖尿病足的中医药治疗的研究进展

糖尿病足(DF)可归属于中医'脱疽'范畴,早在2000多年前《黄帝内经》中就有关'脱疽'的病名、病因病机、症候、治疗等描述,足部病变也有'脱痈、脉痹、脱骨疽、脱骨疔、敦痈、甲疽、蛀节疔、蜣螂蛀'之称,DF是消渴日久,五脏气血阴阳俱损,肌肤失养,血脉瘀滞,日久化热,灼伤肌肤和(或)感受外邪致气滞血瘀痰阻热毒积聚,肉腐骨枯所致〔1〕。中医学对DF的治疗历史悠久,经验丰富,远期疗效肯定。

通心络对糖尿病足大鼠缺血下肢移植外周血间充质干细胞的微环境影响

研究发现,通心络联合外周血间充质干细胞移植可通过调节HIF-1/VEGF通路及miR-210表达来促进内皮细胞增殖、分化,进而促进新生血管形成。然而,局部恶劣的微环境,如缺血缺氧、炎症反应、氧化应激等,不利于心肌梗死区干细胞移植后的生存、分化,致使其疗效受限。因此,本实验研究就通心络是否改善糖尿病足（dibetic foot,DF）大鼠缺血下肢外周血间充质干细胞移植炎症水平,以探讨其促进外周血间充质干细胞移植治疗血管新生效果的作用.

桑苏二陈汤加味干预支气管哮喘大鼠模型细胞因子的研究

目的:运用"桑苏二陈汤加味"治疗哮喘发作期Wistar大鼠模型,观察治疗前后大鼠一般生活状态、细胞因子等指标的变化,探讨桑苏二陈汤加味对哮喘发作期的疗效及作用机制,为临床应用桑苏二陈汤加味治疗哮喘提供实验依据。方法:雄性Wistar大鼠90只按随机数字表分为6组:空白组,桑苏二陈汤加味高剂量组、中剂量组、低剂量组,定喘汤组,模型组,每组15只。大鼠哮喘模型参照吕国平[1]等介绍的方法复制。观察治疗前后大鼠一般生活状态变化;测定大鼠血清中的ET-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NO含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠ET-1?IL-1?IL-6?TNF-α、NO含量显著升高,提示哮喘炎症存在。与模型组比较,治疗组炎症有减轻,ET-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NO含量下降。与定喘汤组比较,桑苏二陈汤加味高、中剂量组ET-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NO含量升高(P<0.01),桑苏二陈汤加味低剂量组无统计学意义。桑苏二陈汤加味高中低剂量组比较,低剂量组较高、中剂量ET-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NO含量降低(P<0.05,P<0.01)。结论:桑苏二陈汤加味低剂量组能显著降低哮喘大鼠血清中TNF-α、ET-1、IL-1、IL-6、NO含量,有效控制气道炎症,从而改善气道重塑。

通心络对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)损伤血管内皮细胞是动脉粥样硬化的重要起始环节之一。文中旨在观察通心络对ox-LDL诱导损伤的血管内皮细胞的保护作用。方法采用ox-LDL(终浓度为30mg/L)造成血管内皮细胞氧化应激损伤模型,将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)分为正常对照组、模型组、通心络高、中、低剂量组,正常对照组给予无血清DMEM培养基培养,模型组给予含ox-LDL(终浓度为30 mg/L)的无血清DMEM培养基培养24 h,通心络低、中、高剂量组给予含不同浓度通心络(终浓度为50、100、150 mg/L)预培养4 h后加入ox-LDL(终浓度为30 mg/L)继续培养24 h。MTS法检测各组细胞的生存活性;试剂盒检测各组细胞上清液中NO含量、SOD的活力和线粒体膜电位变化;Western blot法检测各组细胞诱导型NO合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9,MMP9)、核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,模型组HUVEC生存活性明显降低[(100.00±2.23)%vs(73.89±0.67)%,P<0.01],与模型组比较,通心络中、高剂量组HUVECs生存活性[(92.15±0.76)%、(97.19±1.45)%]明显提高(P<0.01)。与正常对照组细胞线粒体膜电位、细胞培养液中NO含量、SOD活力比较,模型组明显降低(P<0.01);而通心络低、中、高剂量组较模型组明显升高(P<0.01)。与正常对照组i NOS、MMP9、NF-κBp65蛋白表达比较,模型组明显升高(P<0.01);而通心络低、中,高剂量组较模型组明显降低(P<0.05)。结论通心络有较强的抗氧化、抗炎能力,可减轻ox-LDL对血管内皮细胞的损伤。

发育成熟心脏中血管内皮细胞和心肌细胞的关系

在正常成年哺乳动物的心脏中大约有30%的细胞是心肌细胞,另外的70%为内皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞和免疫细胞〔1〕。各细胞间的相互诣调作用对心脏的发育至关重要〔2〕。内皮细胞已经成为目前心血管系统结构其功能的重要因素之一〔3〕,是血管张力和附近细胞生长的动态调节器〔4〕。心肌细胞不仅有赖内皮细胞提供血氧和营养物质,更需要内皮细胞自分泌和旁分泌信号,从而引导和促进心肌细胞发育、舒缩功能、

通心络对高脂饮食喂养大鼠糖脂代谢的影响

肥胖常并发糖脂代谢紊乱等疾病，体脂堆积引起的代谢紊乱严重影响人类健康。通心络胶囊由人参、水蛭等中药组成，具有益气活血的功效，研究报道通心络胶囊具有调节大鼠血脂的作用，本研究观察通心络对高脂饮食喂养大鼠糖脂代谢及糖脂代谢相关蛋白的影响，以探讨其调节糖脂代谢的相关机制。

桑苏饮对哮喘模型大鼠气道重塑及肺组织上皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:探讨桑苏饮对哮喘发作期大鼠的疗效及作用机制。方法:雄性Wistar大鼠90只按随机数字表法分为6组:空白组,桑苏饮高剂量组、中剂量组、低剂量组,定喘汤组,模型组,每组15只。哮喘模型参照文献方法复制,观察治疗前后大鼠一般生活状态、肺组织形态学变化,免疫组化法测定细胞间黏附分子-1(ICAM-1)。结果:治疗后大鼠一般生活状态、肺组织形态学变化各治疗组较模型组皆有显著性差异,尤以桑苏饮低剂量组及定喘汤组疗效较好。桑苏饮不同剂量组间比较,低剂量组较高、中剂量组肺组织上皮细胞ICAM-1表达明显下调,有非常显著性差异(P<0.01)。结论:低剂量桑苏饮能减轻嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润,下调哮喘模型大鼠肺组织上皮细胞ICAM-1的表达,从而有效控制气道炎症,改善气道重塑。

补肾通络方治疗支气管哮喘缓解期疗效观察

目的观察从补肾、通络立法所拟方剂补肾通络方治疗支气管哮喘缓解期的临床效果。方法将60例支气管哮喘缓解期患者随机分为2组,对照组予沙美特罗/丙酸氟替卡松(50μg/250μg)早晚各1吸,治疗组在对照组治疗基础上予补肾通络方口服1剂/d,2组疗程均为3个月。观察治疗前及治疗后1年内2组哮喘急性发作次数,治疗前、治疗结束后及治疗结束6个月后2组哮喘控制测试表(ACT)的得分情况,测定2组用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、最大呼气峰流速(PEF)的变化及血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平。结果治疗组治疗后1年内哮喘急性发作次数明显少于对照组(P<0.05),治疗结束后及治疗结束6个月后ACT得分均明显高于对照组(P均<0.05),治疗后FVC、FEV1、PEF均明显高于对照组(P均<0.05),血清ECP水平明显低于对照组(P<0.05)。结论补肾通络方可有效减少哮喘患者急性发作次数,改善肺功能及气道炎症,值得推广应用。

补通膏联合沙美特罗/丙酸氟替卡松对支气管哮喘气道炎症的影响

目的观察补通膏联合沙美特罗/丙酸氟替卡松对慢性持续期支气管哮喘患者气道炎症的影响。方法于立冬前后15 d选择70例慢性持续期支气管哮喘患者,将其随机分为对照组和治疗组。对照组予沙美特罗/丙酸氟替卡松(50μg/250μg)早晚各1吸,治疗组在对照组治疗的基础上给予补通膏早晚各10 m L口服,2组疗程均为3个月。观察2组治疗前后ACT评分情况,测定2组治疗前后FEV1、FVC及血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平。结果治疗结束后及结束3个月后2组ACT评分均显著升高(P均<0.05),且治疗组高于对照组(P均<0.05)。2组治疗后FEV1、FVC及血清INF-γ水平均显著高于治疗前(P均<0.05),且治疗组显著高于对照组(P均<0.05);血清ECP、IL-4水平显著低于治疗前(P均<0.05),且治疗组显著低于对照组(P均<0.05)。结论补通膏联合沙美特罗/丙酸氟替卡松治疗慢性持续期支气管哮喘有协同作用,可有效的缓解症状,改善肺功能及气道炎症。

五紫三黄方对激素依赖性哮喘小鼠模型支气管和肺组织形态学的影响研究

目的:复制小鼠哮喘模型,并进行激素干预治疗来制作激素依赖性哮喘小鼠模型,在撤减激素过程中,以五紫三黄方干预治疗,观察其对激素依赖性哮喘小鼠模型支气管和肺组织形态学的影响。方法:小鼠雌雄各半共120只,随机分为:空白组、模型组、泼尼松对照组、五紫三黄方低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组20只。利用卵蛋白(OVA)复制小鼠哮喘模型,并进行激素干预治疗来制作激素依赖性哮喘小鼠模型,在撤减激素过程中,以五紫三黄方干预治疗,观察小鼠模型支气管和肺组织形态学的影响。结果:五紫三黄方不仅能明显减轻小鼠激素依赖性哮喘气道炎性细胞的浸润,而且能明显改善小鼠哮喘气道的重塑。

五紫三黄方对哮喘小鼠模型肺组织上皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:观察紫三黄方对激素依赖性哮喘小鼠模型肺组织上皮细胞ICAM-1表达的影响。方法:小鼠雌雄各半120只,随机分为:空白组、模型组、泼尼松对照组、五紫三黄方低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组20只。利用卵蛋白(OVA)复制小鼠哮喘模型,并进行泼尼松干预治疗来制作激素依赖性哮喘小鼠模型,在撤减激素过程中,以五紫三黄方干预治疗,观察其对哮喘小鼠模型肺组织上皮细胞ICAM-1表达。结果:五紫三黄方和泼尼松比较,五紫三黄方能明显降低肺组织上皮细胞ICAM-1表达(P<0.01)。

中药离子导入治疗哮喘急性发作期的临床观察

目的:观察宣肺平喘化痰通络方中药离子导入在哮喘急性发作期中的临床效果。方法:选取我院2016年4月～2018年5月收治的100例哮喘急性发作期患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组50例。对照组采用常规对症支持治疗,观察组在对照组的基础上加予桑苏饮离子导入治疗。观察两组治疗效果,治疗前后中医证候积分、哮喘控制评分及肺功能改善情况。结果:治疗后,观察组总有效率(98.00%)明显高于对照组(82.00%),P<0.05;治疗前,两组中医证候积分、哮喘控制评分、肺功能均无显著性差异(P>0.05),治疗后,均明显改善,且观察组中医证候积分明显低于对照组,ACT评分、FEV1、PEF、FVC、FEV1/FVC均明显高于对照组,P<0.05。结论:采用桑苏饮离子导入治疗哮喘急性发作临床效果显著,值得临床推广应用。

从脉络学说探讨高同型半胱氨酸血症的病机特点及通心络的干预作用

据《中国心血管病报告2014》公布数据显示,我国心血管病现患人数至少2.9亿,心肌梗死至少250万人,脑卒中至少700万人。同型半胱氨酸（Hcy）水平升高与心脑血管疾病、糖尿病、慢性肾病等疾病密切相关,中医并无高Hcy血症（HHcy）病名,根据其症候中医多归于＂心痛＂、＂胸痹＂、＂真心痛＂、＂厥证＂、＂眩晕＂、＂中风＂等范畴。

通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及miR-210表达的影响

目的探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植治疗对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达的影响。方法将70只♂Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型,成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型,以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组,造模大鼠随机分成6组:模型组、通心络组、西洛他唑组、干细胞组、通心络联合干细胞组、西洛他唑联合干细胞组,分别给予治疗干预28 d后麻醉,腹主动脉取血,离心取上清,酶联免疫吸附测定VEGF-A和HIF-1α;大鼠缺血肢肌组织分别采用Western blot检测VEGF-A和VEGF-R2蛋白表达和RT-PCR检测VEGF-A基因表达。结果检测结果显示:与对照组比较,模型组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,各用药组VEGF-A、VEGF-R2和mi R-210表达均明显升高(P<0.01),其中通心络联合干细胞组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达高于通心络组、西洛他唑组及干细胞组(P<0.05,P<0.01)。结论通心络联合外周血间充质干细胞移植可能通过调节HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达,促进内皮细胞增殖、分化,促进新生血管形成。

通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病大鼠下肢缺血的影响

目的观察通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植治疗糖尿病大鼠下肢缺血的疗效。方法采用高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ)注射建立糖尿病大鼠模型,再结扎右下肢股动、静脉制造下肢缺血模型。100只造模成功大鼠随机分为模型组、通心络组、干细胞组、联合治疗组,每组20只,以同批次20只健康大鼠为正常组。通心络组和联合治疗组给予通心络超微粉0.4g/(kg·d)灌胃,连续治疗28天;干细胞组和联合治疗组于术后第3天在缺血下肢皮下肌层注射约0.4 ml细胞悬浊液(PB-MSCs1.0×106/ml),分8个位点,每个点注射0.05 ml;正常组、模型组和干细胞组大鼠以等体积的生理盐水灌胃,同点、同量肌肉注射无菌RPM1640培养液。分别于术前、术后、治疗7和28天行激光多普勒血流灌注成像检测计算双后肢血流差值,治疗28天后行下肢动脉造影检测下肢血流。结果与正常组同时间点比较,其余各组在术后、治疗7天和28天时双后肢血流差值显著增高(P<0.01);与模型组同时间点比较,各治疗组在治疗7、28天示时双后肢血流差值明显降低,并且联合治疗组在治疗28天时较通心络组和干细胞组降低明显(P<0.05或P<0.01)。与本组术前比较,各治疗组术后、治疗7天和28天时双后肢血流差值比显著升高(P<0.01),但各治疗组治疗7天和28天时双后肢血流差值均较本组术后降低,并且治疗后28天降低更明显(P<0.01)。动脉造影结果显示,模型组和各治疗组均有侧枝循环形成,毛细血管生成,且与已有的毛细血管相互连接形成毛细血管网,其中联合治疗组缺血侧下肢动脉最清晰。结论通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植能明显改善糖尿病大鼠下肢缺血状况,并且优于单纯干细胞移植。

中西医结合干细胞移植治疗糖尿病足的临床研究进展

糖尿病足属中医学"消渴病"继发的"血痹""脱疽""筋疽"等范畴,是指因糖尿病血管病变和(或)神经病变及感染等综合因素,导致慢性进行性波及肢体大、中、微血管,引起足部疼痛、皮肤深溃疡、肢体坏疽等病变,是糖尿病的严重并发症之一,临床治疗非常棘手,难以取得令人满意的疗效,最终导致截肢甚至危及生命。因此,临床上迫切需要找到创伤小、易接受、疗效好的方法。糖尿病足的治疗是个系统工程,单一的方法难以治愈,干细胞具有高度增殖和分化成为体内各种细胞的潜能,其可塑性强,为糖尿病足的治疗带来新前景,目前是国内外学者研究的热点之一。近年来中西医结合干细胞移植治疗法逐渐应用于本病中,其疗效明显优于单纯中医、单纯西医或单纯干细胞移植治疗。文章就中西医结合干细胞移植治疗糖尿病足的临床研究进展进行概括。

以脉络学说指导糖尿病足的治疗

以脉络学说为指导,基于中医脉与西医血管,脉络与中小血管,脉络末端之孙络与微血管、微循环之间的密切相关性,提出"脉络-血管系统病"的新概念。认为糖尿病足是糖尿病日久累及肢体大、中、小、微血管的一类并发症,属于"脉络-血管系统病"研究的范畴。从"脉络-血管"的同一性切入,通过探讨促进血管新生与侧枝循环建立,改善缺血区的微环境,为通络治疗糖尿病足提供理论指导。

干细胞治疗糖尿病足的实验研究进展

糖尿病足是指因糖尿病血管病变和(或)神经病变及感染等综合因素,导致慢性进行性波及肢体大、中、微血管,引起足部疼痛、皮肤深溃疡或肢体坏疽的一种病变,是糖尿病的严重并发症之一。临床治疗非常棘手,难以取得令人满意的疗效,最终导致截肢甚至危及病患生命。因此,临床上迫切需要找到创伤小、易接受、疗效好的新的治疗方法。干细胞具有高度增殖和分化成为体内各种细胞的潜能,其可塑性强,为糖尿病足的治疗带来新前景,目前是国内外学者研究的热点之一。该文就干细胞移植治疗糖尿病足的实验研究进展作一综述。