碱提工艺对茶树菇多糖形貌特征和构象及其生物活性的影响

利用传统水提及碱提的方法得到茶树菇粗多糖S-ACP和J-ACP,经CTAB法和Sephadex G-150凝胶层析法对其分离纯化,分别得到S-ACP2-1和S-ACP2-2以及J-ACP2-1和J-ACP2-2两组主要组分,用扫描电子显微镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)对多糖的形貌进行表征并测定其体外抗氧化活性和抗肿瘤活性;对多糖S-ACP2-2、J-ACP2-2进行刚果红实验测定及圆二色谱仪(CD)分析。SEM观测结果:S-ACP2-1为较粗的表面光滑的丝状,J-ACP2-1呈较细的有少量碎屑的丝状;S-ACP2-2为较大的片状,J-ACP2-2在大的片状周围有很多细小的碎屑。AFM观测结果:碱液可以使多糖分子部分断裂成小片段。刚果红实验:S-ACP2-2、J-ACP2-2在水溶液中为自由卷曲构型。CD分析:S-ACP2-2的空间构型中有序结构较少,J-ACP2-2在水溶液中为无序构型。对比4种多糖的活性,碱液作用的多糖J-ACP2-2活性高于S-ACP2-2。

滑子菇多糖的体外生物活性初步研究

为了研究滑子菇水提粗多糖(PNP)的体外生物活性,对滑子菇多糖的总还原力、清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)和由Fe2+诱发的脂质过氧化反应的抑制作用进行研究,采用MTT比色法和胎盘蓝细胞计数检测对滑子菇水提粗多糖的体外抑制K562细胞生长作用进行了研究,采用流失细胞术对滑子菇多糖作用人白血病K562细胞后的细胞周期进行了研究。结果表明:滑子菇水提粗多糖PNP具有一定的还原能力;在高质量浓度(800μg/mL)时具有接近于Vc清除DPPH·的能力,达41.28%;PNP对Fe2+诱发的脂质过氧化反应具有一定的抑制作用,并且随着浓度的增加抑制作用逐渐增强,但总的增长趋势不大;MTT实验表明PNP对K562细胞的体外增长有抑制作用,在质量浓度为800μg/mL和作用时间为48 h时,可达到最高的抑制率35.03%。流式细胞术对细胞周期的检测表明滑子菇多糖能够阻滞人白血病K562细胞于G1期。

滑菇多糖wPNP-a1的制备及结构分析

利用传统热水浸提法提取滑菇粗多糖(wPNP),进而用季铵盐沉淀法和Sephadex G-150凝胶色谱柱层析对wPNP进行纯化,得滑菇多糖wPNP-a1。以高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、气相色谱(GC)、核磁共振(NMR)、环境扫描电子显微镜(ESEM)和原子力显微镜(AMF)等方法分析wPNP-a1的结构,结果表明,滑菇多糖wPNP-a1的分子量为419310 Da,具有一般类多糖的特征吸收峰,糖苷键为β-型,不含乙酰基,由木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,其摩尔比为3.91∶2.77∶1.91∶1;wPNP-a1的分子间排斥力较大,分子间吸引力较小,在云母表面呈直链状分布,链宽23 nm左右,链高0.7～0.8 nm。

枸杞多糖分离纯化及其结构光谱分析与显微学观察

目的提取枸杞多糖并分析其结构性质和显微学形态,为枸杞的进一步开发利用提供参考。方法采用水提醇沉法得到枸杞多糖,Sephadex G-150凝胶色谱柱纯化得LBP3-I,应用傅里叶变换光谱、气相色谱对LBP3-I进行组成结构分析,通过环境扫描电镜和原子力显微镜观察该组分的显微学形态。结果 LBP3-I是一种含有结合蛋白的多糖复合物。其单糖组成为鼠李糖基、阿拉伯糖基、木糖基、甘露糖基、葡萄糖基、半乳糖基,且摩尔比率为2.07∶2.38∶3.11∶1.00∶1.12∶2.86。红外光谱结果显示LBP3-I具有明显的糖类物质特征吸收峰且含有吡喃环;环境扫描电镜下LBP3-I呈现高分支结构,主要呈链状,且糖链间多相互缠绕聚集成环状。结论 LBP3-I是一种含有结合蛋白的多糖复合物,具有分支结构,主要成链状。