膜联蛋白A1拟肽AC2-26调控ERK/NF-κB信号通路改善体外循环血清诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤

目的探究AC2-26对体外循环(CPB)血清诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的影响及其作用机制。方法收集16例风湿性心脏病手术患者CPB停机后的无菌血液并分离血清,建立体外循环血清诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤模型。提取健康SD大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞,培养72 h后,随机分为5组即对照组(C组),肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)损伤组(M组),AC2-26+AECⅡ损伤组(A组),AECⅡ损伤+Boc2组(B组),AC2-26+AECⅡ损伤+Boc2组(A+B组)。CCK-8、流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡情况;免疫荧光检测各组肺泡Ⅱ型上皮细胞甲酰肽受体2(FPR2)和肺泡表明活性物质(SPC)表达情况;透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞板层小体的影响;Western blot检测各组肺泡Ⅱ型上皮细胞ERK、NF-κB表达情况。结果应用AC2-26后,CPB血清诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖率明显升高,凋亡率明显降低(P<0.05),AC2-26明显抑制ERK及NF-κB蛋白的磷酸化(P<0.05),促进SPC的表达,改善细胞内板层小体结构及形态,这一现象可被甲酰肽受体抑制剂Boc2阻断。结论AC2-26可以减轻CPB血清诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤,其作用机制可能与FPR2调节ERK、NF-κB信号通路有关。

右美托咪定对先天性心脏病患儿体外循环氧化应激反应的影响

目的患者体外循环后机体过度应激反应是发生肺部并发症的主要原因之一,有效减轻过度氧化应激反应能减少肺部并发症,帮助患者恢复。文中旨在探讨右美托咪定对先天性心脏病患儿体外循环后氧化应激反应及肺功能的影响。方法收集2016年6月至2018年6月遵义医科大学第一附属医院麻醉科在体外循环心脏直视下行先天性室间隔缺损或先天性房间隔缺损修补术的47例患儿。随机分为右美托咪定组(在小儿插管后,以0.5μg/kg·h泵注右美托咪定至手术结束,n=25)、对照组(泵注相同容量0.9%的等渗盐水,n=22)。分别在输注右美托咪定前、开胸时、CPB停机时、术后24 h,记录术中心率、平均动脉压等,根据血气分析计算呼吸指数及氧合指数,测血浆超氧化物歧化酶、丙二醛、血浆谷胱甘肽,随访术毕至拔除气管导管时间、术后在ICU的停留时间、肺部并发症情况。结果2组开胸时平均动脉压较给药前上升,停机时、术后24 h平均动脉压较开胸时下降(P<0.05)。右美托咪定组开胸时、停机时、术后24 h心率较对照组下降(P<0.05)。右美托咪定组CPB停机时、术后24 h血浆超氧化物歧化酶较给药前、开胸时升高(P<0.05)。右美托咪定组CPB停机时氧合指数[(416.00±31.89)mmHg]较对照组[(400.45±28.20)mmHg]明显上升(P<0.05),术后24 h呼吸指数[(0.30±0.10)mmHg]较对照组[(0.38±0.15)mmHg]下降(P<0.05)。右美托咪定组患儿的ICU支持时间、拔管时间较对照组明显缩短,术后肺部并发症发生率较对照组明显降低(28%vs 45.45%,P<0.05)。结论右美托咪定能改善患儿体外循环后的呼吸功能,降低术后的肺部并发症,有利于患儿术后的康复,但不能减轻体外循环患儿的氧化应激反应。

甲酰肽受体家族在炎症反应中作用机制的研究进展

甲酰肽受体(FPRs)家族是一个包含7个跨膜结构域的家族受体,属于G蛋白偶联受体超家族(GPCRs),FPRs对炎症的调节表现出其独特的多样性,FPRs家族可通过促进中性粒细胞的活化、巨噬细胞的吞噬作用、循环血管生成细胞等细胞的生成参与炎症反应的发生发展.FPRs家族可促进中性粒细胞吞噬细菌病原体.FPRs家族可通过与血管活性肠肽、血清淀粉样蛋白A、淀粉样蛋白1-42、损伤相关分子模式、膜联蛋白A1等配体结合,调控炎症细胞的迁移、聚集及活化等.

膜联蛋白A1生理功能研究进展

目的膜联蛋白A1是一种广泛存在于真核细胞中的钙依赖磷脂结合蛋白。膜联蛋白A1是体内重要的内源性关键调节蛋白,具有与磷脂膜可逆结合及与钙离子结合的能力,在调节机体炎症、纤维化、增殖等细胞生物学活动方面有着重要的作用。本文主要阐述了膜联蛋白A1的结构、受体、上调及裂解、其衍生肽及其在炎症、增殖、纤维化过程中的调节作用。

膜联蛋白A1拟肽Ac2-26对心肺转流大鼠肺损伤的影响

目的通过观察Ac2-26对心肺转流(CPB)大鼠肺功能、肺组织结构及丝裂原活化蛋白激酶p38/细胞核因子-κB(p38MAPK/NF-κB)表达影响。方法选择成年健康SD雄性大鼠18只,体重350~450 g。随机分成三组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)和膜联蛋白A1(AnxA1)拟肽Ac2-26组(AC组),每组6只。S组做穿刺及开胸处理,不建立CPB;IR组建立CPB,10 min后开胸夹闭左肺门;AC组建立CPB,在CPB前10 min给予Ac2-261 mg/kg,10 min后开胸夹闭左肺门。分别在CPB前、开放左肺门时、停CPB 90 min时,记录大鼠HR、MAP,并取动脉血行血气分析,计算氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)。停CPB 90 min时用ELISA法检测左肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)、支气管液肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-6(IL-6)和总蛋白含量,采用Western-blot法检测肺组织丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38MAPK)、核因子-κBp65(NF-κBp65)、磷酸化核因子-κBp65(p-NF-κBp65)和AnxA1含量,取左肺组织行光镜检查和病理损伤评分。结果与S组比较,开放左肺门时、停CPB 90 min时IR组和AC组HR明显减慢,MAP、OI明显降低,RI明显升高(P<0.05),停CPB 90 min时IR组和AC组TNF-α、IL-10、IL-6、总蛋白、p-p38MAPK、p-NF-κBp65、AnxA1含量明显升高(P<0.05),病理损伤评分明显升高(P<0.05)。与IR组比较,停CPB 90 min时AC组HR明显增快,OI明显升高,RI明显降低(P<0.05),TNF-α、IL-6、总蛋白、p-p38MAPK、p-NF-κBp65、AnxA1含量明显降低(P<0.05),IL-10明显升高(P<0.05),病理损伤评分明显降低(P<0.05)。结论膜联蛋白A1拟肽Ac2-26可抑制大鼠CPB后肺组织丝裂原活化蛋白激酶p38的活化,抑制核因子-κB的分泌,降低TNF-α和IL-6的含量,增加IL-10含量,减轻其肺损伤程度,减少炎性渗出,改善肺功能。

膜联蛋白A1拟肽Ac2-26对体外循环大鼠肺损伤及中性粒细胞凋亡的影响

目的观察膜联蛋白A1拟肽Ac2-26对体外循环大鼠肺损伤及中性粒细胞凋亡的影响。方法24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组(n=8):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、Ac2-26组(A组)。假手术组行股动、静脉,颈总动脉穿刺置管,不行体外循环;另外两组建立体外循环左肺缺血再灌注损伤模型,在体外循环开始后并循环10 min时开胸,阻断左肺门,45 min后恢复灌注。缺血再灌注组、Ac2-26组分别于阻断左肺门前30 min静脉给予等容量0.9%NaCl、AnxA1拟肽Ac2-26(1 mg/kg),分别在CPB开始前即刻(T 1)、开放左肺门即刻(T 2)、CPB结束后1.5 h时(T 3)采集动脉血,测动脉血气并计算氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)、肺泡动脉氧分压差(P(A-a)O 2),T 3时点取左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)及左肺组织,ELISA检测肺组织中TNF-α、IL-10和BALF中IL-6、总蛋白的含量,TUNEL检测肺组织中性粒细胞的凋亡水平,Western blot检测肺组织AnxA1的表达。结果T 3时点,与假手术组比较,缺血再灌注组OI降低、RI和P(A-a)O 2升高,肺组织病理结构损伤明显,肺损伤评分明显升高(P<0.05);与缺血再灌注组比较,Ac2-26组OI升高,RI、P(A-a)O 2明显下降,肺组织中TNF-α和BALF中IL-6、总蛋白含量明显降低,肺组织中IL-10含量、AnxA1的表达及肺组织中性粒细胞的凋亡率明显高于缺血再灌注组,肺组织病理结构明显改善,病理损伤评分显著下降(P<0.05)。结论膜联蛋白A1拟肽Ac2-26可增加大鼠肺组织内源性AnxA1的表达及IL-10含量,促进肺中性粒细胞凋亡,减轻体外循环肺损伤,对肺有一定的保护作用。

Ac2-26对体外循环血清致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的保护作用

目的研究Ac2-26对体外循环血清致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的影响。方法采用IgG免疫粘附选择法提取大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ),观察细胞生长形态,免疫荧光法和电镜对AECⅡ进行鉴定;细胞培养至72 h,分为3组:正常培养组(N组)、体外循环血清组(C组)、Ac2-26组(A组),依据实验分组处理12 h后,免疫荧光法检测AECⅡ细胞膜上的表面活性剂相关蛋白C(SP-C)的表达;透射电子显微镜观察各组AECⅡ细胞器形态;CCK8法检测各组AECⅡ的增殖活力;流式细胞检测细胞凋亡率。结果与N组相比,C组细胞活力明显降低(P=0.009),细胞凋亡率增加(P<0.001);N组与A组之间细胞相对活力接近,无明显差异(P=0.743);与C组相比,A组细胞凋亡率降低(P<0.001),细胞活力增加(P=0.017);免疫荧光显示:与N组相比,C组部分细胞出现破裂坏死,SP-C荧光表达强度明显减弱,A组细胞形态与N组接近,荧光表达强度高;电镜显示:与N组相比,C组细胞胞核疏松,特异性结构嗜锇板层小体的平行排列消失,线粒体肿胀明显,A组细胞见嗜锇板层小体结构相对完好,可见部分线粒体轻度肿胀。结论体外循环血清可诱导大鼠AECⅡ损伤,Ac2-26可增加细胞SP-C的表达,减轻细胞损伤,对大鼠AECⅡ有一定的保护作用。

膜联蛋白A1拟肽Ac2-26减轻大鼠体外循环肺损伤的抗炎机制

目的探讨膜联蛋白A1(AnxAl)拟肽Ac2-26对体外循环(CPB)大鼠肺损伤的影响,分析其抗炎机制。方法18只雄性SD大鼠,体质量350~450 g。随机数字表法分为3组(各6例):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、Ac2-26组(A组)。假手术组行股动静脉穿刺置管,仅开胸暴露左肺,不连接CPB管道;其余2组均建立CPB左肺缺血再灌注损伤模型,IR组在CPB前10 min给予同等容量的生理盐水;A组在CPB前10 min尾静脉注射Ac2-26(1 mg/kg)。3组大鼠于CPB前(T1)、开放左肺门即刻(T2)、实验结束时(T3)分别取动脉血,行血气分析,计算氧合指数(OI)和呼吸指数(RI)。于T1、T3分别取股静脉血测中性粒细胞(PMN)的数量。T3时取肺动脉血测PMN的数量、大鼠血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)含量;取左肺组织,ELISA法测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)和PMN弹性蛋白酶(NE)含量,Tunel法测肺组织中性粒细胞凋亡;Western-Blot测肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和AnxAl蛋白表达情况。结果与S组比较,IR组T3时点的股静脉血、肺动脉血PMN数量及肺动脉VCAM-1含量高,肺组织MPO、NE含量增加,肺组织病理损伤评分升高、OI降低、RI升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与IR组比较,A组大鼠肺组织病理损伤评分明显降低,股静脉血、肺动脉血PMN数量及肺动脉血VCAM-1含量明显减少,肺组织AnxA1、ICAM-1表达降低,肺组织MPO、NE含量降低,PMN凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论膜联蛋白A1拟肽Ac2-26可抑制肺内中性粒细胞聚集,减弱中性粒细胞与肺血管内皮的黏附能力,促进肺内中性粒细胞凋亡,降低NE、MPO含量,对大鼠CPB后肺损伤有保护作用。