细胞色素P450靶向抗肿瘤药物研发进展

细胞色素P450酶能催化各种内源性及外源性化合物的代谢,与多种肿瘤的发生发展有着密切关系,因此细胞色素P450酶靶向药物的研制已成为肿瘤治疗的新的研究方向之一,其中肿瘤特异性表达细胞色素P450酶成为研究热点。综述细胞色素P450酶靶向抗肿瘤药物研发进展,并介绍细胞色素P4502W1及其靶向药物的研究近况。

高中语文教学中培养学生自主学习能力的策略研究

在教育不断发展下研究出:除了要有效提升教师的教学水平外,还应注重学生自主学习能力的培养,原因是课堂教学时间是有限的,而学生学习是无限的,教师是学生的启蒙教师,是将学生引入学习道路的领路人。如果学生拥有了自主学习能力,运用教师传授的学习方法,可以在掌握教材知识的同时获得更多的知识,对学生的成长具有较强的促进作用。因此,高中语文教师在教育教学中应注重学生自主学习能力的培养,为学生更好的成长与发展奠定坚实的基础。

计算模拟技术在化合物代谢特征预测中的应用

近年来已经发现,具有良好的药代动力学特征的候选药物方有临床应用价值和前景,因此在新药研发的过程中应尽早引入对药物吸收、分布、代谢和排泄的评价。细胞色素P450(CYP450)是药物体内代谢中一类至关重要的酶系,若能较准确地对化合物的CYP450代谢特征,如其是否为CYP450的底物、抑制剂和诱导剂等进行预测,就有可能提高新药研发的成功率,故以此为例,介绍目前有关计算模拟技术在预测化合物代谢特征方面的应用研究进展。

厄贝沙坦对糖尿病大鼠心肌损伤中Notch1信号通路的影响

目的:观察厄贝沙坦对糖尿病大鼠心肌损伤的作用,分析Notch1信号通路在其中的变化。方法:实验分4组:正常对照组(CON)、高糖高脂组(HC)、糖尿病组(DM)和厄贝沙坦+糖尿病组(Ir+DM)。制作2型糖尿病(T2DM)大鼠模型成功后,第8周开始检测大鼠空腹血糖水平(FBG)、全心质量及左心室重量,计算心脏指数(H/B)及左室重量指数(LVWI),检测大鼠血浆甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)水平,检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量变化,免疫组化检测Bcl-2、Bax表达变化,Western blot检测大鼠心肌组织Notch1、Hes-1及Jagged-1的蛋白表达。结果:与CON组相比,HC组H/B、LVWI、FBG无明显变化,血脂、MDA含量明显升高,SOD活性、Bcl-2/Bax及Notch1、Hes-1、Jagged-1蛋白表达降低;与HC组相比,DM组H/B、LVWI、FBG、MDA含量增加明显,血脂水平无明显变化,SOD活性、Bcl-2/Bax及Notch1信号通路蛋白表达进一步降低;与DM组相比,厄贝沙坦干预组H/B、LVWI明显降低,血脂、血糖水平无明显变化,但SOD活性、Bcl-2/Bax增加,MDA含量降低,同时Notch1信号通路相关蛋白表达增加。结论:糖尿病可导致大鼠发生心肌损伤,厄贝沙坦可能通过增强Notch1信号通路的表达发挥心肌保护作用。

活化的乙醛脱氢酶2通过调节双孔钾离子通道TASK-1减轻糖尿病大鼠心肌损伤

目的:观察激活乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对糖尿病心肌损伤中双孔钾离子通道TASK-1的影响及其对糖尿病心肌损伤的保护作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组(N组)、糖尿病4周组(DM4W组)、糖尿病8周组(DM8W组),糖尿病8周组+低浓度乙醇干预组(DM8W+Et OH组)。采用腹腔单次注射链脲佐菌素(55mg/kg)复制糖尿病大鼠模型。行心脏超声测定大鼠心功能,ELISA法检测心肌组织羟脯氨酸含量,HE染色观察心肌组织结构,PAS染色观察心肌组织阳性物质沉积情况,Western印迹检测心肌组织TASK-1蛋白表达情况,膜片钳记录心室肌细胞复极30%和90%时的动作电位时程(APD30,APD90)和双孔钾离子通道TASK-1电流,同时根据该钾通道对酸碱敏感的电生理特性判断是否为双孔钾离子通道TASK-1电流。结果:与N组相比,DM4W组和DM8W组大鼠左室舒张末期内径(end-diastole left ventricular diameter,LVIDd)及左室收缩末期内径(end-systolic left ventricular diameter,LVIDs)、羟脯氨酸含量、TASK-1蛋白表达增加,左室内径缩短率(leftventricular fractional shortening,LVFS)和射血分数(leftventricular ejection fraction,LVEF)均下降,APD30和APD90延长,TASK-1电流减少(P<0.01);HE染色结果显示DM4W组和DM8W组大鼠心肌细胞及纤维排列紊乱,心肌细胞肥大,心肌间隙增宽;PAS染色显示DM4W组和DM8W组大鼠心肌组织阳性物质沉积增加。与DM4W组相比,DM8W组大鼠上述指标的变化更加明显(P<0.05或P<0.01)。与DM8W相比,DM8W+Et OH组左室心功能指标LVIDd,LVIDs,LVFS,LVEF有所恢复,羟脯氨酸含量和TASK-1蛋白表达减少,TASK-1电流增加,APD30和APD90缩短(均P<0.01);HE染色显示心肌细胞损伤较前减轻,PAS染色显示大鼠心肌组织阳性物质沉积减少。结论:ALDH2被低浓度的乙醇激活后可减轻糖尿病所致的心肌损伤及纤维化,其机制可能与其调节双孔钾离子通道TASK-1蛋白表达和TASK-1电流有关。

线粒体ALDH2对高糖处理的乳鼠心肌成纤维细胞中自噬相关蛋白影响

目的探讨自噬是否介导乙醛脱氢酶(ALDH)2对高糖处理的乳鼠心肌成纤维细胞的作用。方法无菌条件下取出生3d内SD大鼠乳鼠心脏,剪碎并用胰蛋白酶和胶原酶2混合酶消化成单个细胞,经差速贴壁后并传代培养,当传至3代时进行处理。应用免疫荧光检测培养的乳鼠心肌成纤维细胞内波形蛋白以此鉴定原代培养心肌成纤维细胞纯度;实验涉及如下分组:5.5 mmol/L糖对照组(F)、30 mmol/L高糖组(FH)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂(Alda-1)组(FHA)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2抑制剂(Daidzin)组(FHD)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂(Alda-1)和乙醛脱氢酶2抑制剂(Daidzin)(FHAD);Western blot检测ALDH2、微管相关蛋白1轻链3B亚基(LC3B)、Beclin-1的蛋白表达;羟脯胺酸试剂盒测定细胞培养液中羟脯胺酸含量;CCK-8试剂盒测定心肌成纤维细胞增殖能力。结果与F组相比,FH组ALDH2蛋白表达降低,Beclin-1、LC3B蛋白表达降低,细胞培养上清液内羟脯胺酸含量、细胞数目增高;与FH组相比,FHA组Beclin-1、LC3B蛋白表达、ALDH2蛋白表达增加,细胞数目、细胞内羟脯胺酸含量降低,与此同时FHD组ALDH2蛋白及Beclin-1、LC3B表达降低,细胞数目、细胞内羟脯胺酸含量增高。结论线粒体ALDH2抑制高糖诱导的乳鼠心肌成纤维细胞增殖作用,其机制可能与ALDH2对自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B的上调作用有关。

线粒体乙醛脱氢酶2通过下调拮抗高糖引起的乳鼠心肌细胞损伤

目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)-活化的T细胞核因子(NFAT)3通路是否介导乙醛脱氢酶(ALDH)2对高糖处理的乳鼠心室肌细胞的作用。方法无菌条件下取出生3 d内SD大鼠乳鼠心脏,心尖部剪碎并用胰蛋白酶和胶原酶2混合酶消化成单个细胞,经差速贴壁后并在培养液中加入5-Brdu进行培养,当其生长呈融合状态时对心室肌细胞进行处理。应用免疫荧光检测培养的乳鼠心肌细胞内α-SA蛋白以此鉴定原代培养心室肌细胞纯度;实验涉及如下分组:5.5 mmol/L糖对照组(M)、30 mmol/L高糖组(MH)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂(Alda-1)组(MHA)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2抑制剂(Daidzin)组(MHD)、30 mmol/L高糖加乙醛脱氢酶2激动剂(Alda-1)和NFAT3抑制剂(11R-VIVIT)组(MHAV);荧光探针检测细胞内钙离子浓度;ELISA测定细胞内CaN含量;Western blot检测ALDH2、CaN、NFAT3蛋白表达。结果与M组相比,MH组ALDH2蛋白表达降低(P<0.05),CaN蛋白表达增高(P<0.05)、NFAT3蛋白表达以及细胞内CaN含量、Ca^(2+)浓度均增高(P<0.01);与MH组相比,MHA组Ca^(2+)浓度降低(P<0.05)、细胞内CaN含量降低(P<0.01)、CaN蛋白和NFAT3蛋白表达降低(P<0.05)、ALDH2蛋白表达增加(P<0.05),MHD组Ca^(2+)浓度升高(P<0.01)、细胞内CaN含量升高(P<0.05);与MHA组相比,MHAV组的ALDH2蛋白表达量无明显变化(P>0.05),NFAT3蛋白表达量降低(P<0.05)。结论线粒体ALDH2对高糖诱导的乳鼠心肌细胞起保护作用,其机制可能与ALDH2对Ca^(2+)-CaN-NFAT3信号通路的负调节作用有关。

低剂量乙醇对糖尿病大鼠心肌损伤后NF-κB表达的影响

目的探讨低剂量乙醇对糖尿病大鼠心肌损伤后核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法实验大鼠分为3组:正常对照组,糖尿病组和糖尿病+低剂量乙醇组。后两组大鼠腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg复制糖尿病大鼠模型,糖尿病+低剂量乙醇组于造模成功1周后给予2.5%(20 mg/kg/d)乙醇日常饮用,1周后改为5%(39.45 mg/kg/d)的乙醇持续至8周。小动物超声测定心室心功能变化,透射电镜观察心肌超微结构变化,测定血浆白介素-1(IL-1),白介素-4(IL-4)的变化,蛋白印迹检测左室心肌组织NF-κB、IKK的蛋白表达,免疫组化测定心肌组织NF-κB的蛋白的胞内定位分布,测定心肌组织4-HNE的变化。结果与对照组比较,糖尿病组左室收缩及舒张功能降低,血浆IL-1水平、心肌组织4-HNE表达增加(P<0.01),血浆IL-4水平降低(P<0.01),心肌组织NF-κB、IKK的蛋白表达增加(P<0.01),NF-κB蛋白在胞内分布增加,透视电镜显示心肌肌丝断裂、肌原纤维结构不完整、线粒体损伤。与糖尿病组相比,低剂量乙醇干预组大鼠左室收缩和舒张功能得到了改善,心肌肌原纤维和线粒体损伤减轻,降低了血浆IL-1及心肌组织4-HNE水平(P<0.01)及NF-κB、IKK的蛋白表达(P<0.01),NF-κB蛋白胞内分布减少,血浆IL-4水平升高(P<0.01)。结论糖尿病大鼠心肌损伤时,心肌组织NF-κB表达增加,低剂量乙醇干预使NF-κB的表达降低,提示NF-κB信号通路参与低剂量乙醇对糖尿病损伤心肌的保护作用。

双孔钾通道TASK-1在糖尿病大鼠心肌损伤中的变化

目的观察双孔钾通道TASK-1在糖尿病大鼠心肌损伤中的变化并分析其可能机制。方法 36只SD大鼠随机分为3组(n=12/组):正常对照组(N)、糖尿病4周组(DM 4W)和糖尿病8周组(DM 8W),造模成功后,小动物超声测定各组大鼠心功能;测定不同时期各组大鼠体质量及心脏重量,计算心系数(HW/BW),Masson染色观察心肌纤维化程度,Western blotting检测心肌组织TASK-1的蛋白表达;急性分离N和DM 8W组大鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录其动作电位时程(APD)和TASK-1电流,同时应用TASK-1特异性抑制剂ML-365观察TASK-1电流抑制情况。结果与N组相比,DM组大鼠心系数增加(P<0.05),大鼠舒张末期左室内径及收缩末期左室内径增加(P<0.01),TASK-1的蛋白表达增加(P<0.01),左室内径缩短率及射血分数均下降(P<0.01),Masson染色显示DM组心肌胶原纤维粗大,交织成网状,排列不均匀,沉积增多;与DM 4W相比,DM 8W组大鼠舒张末期左室内径、收缩末期左室内径、心系数和TASK-1蛋白表达持续增加(P<0.01,P<0.05),左室内径缩短率及射血分数进一步下降(P<0.01),Masson染色显示心肌形态更加不规则,沉积增加明显。与N组相比,DM 8W糖尿病心肌病组TASK-1的电流明显减少(P<0.01),动作电位时程延长(P<0.05),TASK-1电流被ML-365成功抑制。结论糖尿病可诱发心肌纤维化,加重心肌损伤,其机制可能与双孔钾通道TASK-1的蛋白及电流变化有关。

低浓度乙醇激活乙醛脱氢酶2抑制糖尿病大鼠心肌中自噬相关蛋白的上调

目的探讨自噬在乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)保护糖尿病心肌损伤中的变化及beclin-1在其中发挥作用。方法腹腔注射链脲佐菌素(60mg/kg)构建糖尿病大鼠模型,随机分成正常组(CON)、糖尿病组(DM)和低浓度乙醇干预组(DM+EtOH)。称量大鼠心重(heart weight, HW)及体重(body weight, BW),计算心体比(H/B);试剂盒检测大鼠心肌组织SOD活性、MDA含量;免疫组织化学法检测beclin-1、微管相关蛋白1轻链3 B亚基(B subunit of microtubule-associated protein1 light chain 3, LC3B)、B淋巴细胞瘤-2基因/腺病毒E1B19KD相互作用蛋白3(Bcl-2/adenovirus E1B19KD Interacting Protein 3,BNIP3)的表达;Masson染色检测心肌纤维化;Western blot检测ALDH2、beclin-1、LC3B、BNIP3水平。结果与CON组相比,DM组H/B、MDA含量增加明显,SOD活性下降,心肌纤维化程度加重,ALDH2表达明显减低,而beclin-1、LC3B、BNIP3表达增加;与DM组相比,DM+EtOH组H/B、MDA含量均降低,SOD活性增加,心肌纤维化情况改善明显,同时ALDH2表达明显增加,而beclin-1、LC3B、BNIP3表达显著减低。结论 ALDH2可通过减轻心肌氧化应激、抑制心肌纤维化、减少自噬发挥糖尿病心肌损伤保护作用,可能与ALDH2抑制beclin-1通路的表达有关。

CaN/NFAT3信号通路与心血管疾病研究进展

钙调神经磷酸酶（CaN）-T细胞活化核因子（NFAT）3在心血管系统表达丰富，在心血管疾病发生发展中发挥重要作用，关于CaN／NFAT3信号通路在心肌损伤过程中作用机制的研究愈发明确。本文对CaN／NFAT3信号通路与心血管疾病研究进展进行综述。

浅谈信息技术与语文阅读教学

当前全球已经进入互联网信息时代,信息网络化程度正在不断提升,传统的初中阅读教学模式已经无法满足当前的教学需:求,更难提升学生的学习兴趣,很难帮助学生实现全方位的发展。基于这样的原因,必须要将初中语文教学和信息化技术进行整合。教师必须要通过信息技术,向学生提供更多更优质的资源,提升初中生的阅读兴趣。

外周血CD4^+T细胞亚群中趋化性细胞因子受体5的表达水平与颈动脉狭窄的相关性研究

目的探讨CD4^+T细胞亚群中趋化性细胞因子受体5(CCR5)的表达水平与颈动脉狭窄程度是否存在相关性.方法选取84例颈动脉狭窄患者设为颈动脉狭窄组,依照颈动脉狭窄率分为轻度狭窄组30例、中度狭窄组28例及重度狭窄组26例,另选取45名颈动脉正常者设为对照组.采用流式细胞术检测受试者外周血CD4^+T细胞CCR5的表达水平.结果各颈动脉狭窄亚组与对照组的年龄、性别、高血压、血脂异常、糖尿病、吸烟等一般资料相比,差异无统计学意义(P>0.05);颈动脉狭窄组的CD4^+CCR5表达水平高于对照组,各颈动脉狭窄亚组的CD4^+CCR5的表达水平也高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重度狭窄组的CD4^+CCR5表达水平高于轻度狭窄组(P<0.05);各组间CD4^+亚群在T细胞中的占比差异无统计学意义(P>0.05).结论外周血CD4^+T细胞CCR5表达水平的升高与颈动脉狭窄关系密切,对判断颈动脉狭窄程度可能有一定提示作用.

新型研发机构中产学研深度融合——体制机制创新的密码

党的十九大提出要建立以企业为主体、市场为导向、产学研深度融合的技术创新体系。然而,新型研发机构如何促进产学研深度融合是当今重要而又缺乏探究的新课题。本文以新型研发机构的典范江苏省产业技术研究院为研究对象,运用探索式案例深入探讨了新型研发机构如何通过体制机制创新促进产学研深度融合的过程,剖析了体制机制创新的关键密码,并提出了相应的理论命题。本文开启了新型研发机构体制机制创新的探索,拓展了产学研融合的理论和实证研究。

Avasimibe对Lewis肺癌小鼠抗肿瘤作用研究

[目的]观察Avasimibe对Lewis肺癌小鼠模型肿瘤生长及转移的抑制作用,探索其可能的作用机制。[方法]选择24只C57BL/6小鼠,左前肢腋下接种Lewis肺癌细胞(LLC)构建Lewis肺癌小鼠模型,随机分成对照组、环磷酰胺(CTX)组、Avasimibe组、CTX+Avasimibe四组,每组6只。于接种肿瘤后第10d分别向Lewis肺癌小鼠模型腹腔注射生理盐水、CTX溶液、Avasimibe、CTX+Avasimibe溶液。至造模后35d,观察各组小鼠生存状态及移植瘤生长情况,称量小鼠体重、瘤重、胸腺重,计算抑瘤率、胸腺指数,观察肝肺转移情况,Western blot检测瘤组织ACAT-1的表达。[结果]与对照组比较,小鼠未出现体重减轻,各组瘤重均降低,CTX+Avasimibe组瘤重低于CTX组及Avasimibe组。四组抑瘤率分别为0、53.45%、51.51%和62.22%,与对照组比较,其余三组抑瘤率升高;与CTX组及Avasimibe组比较,CTX+Avasimibe组抑瘤率升高;与对照组比较,CTX组胸腺重显著性降低,Avasimibe组胸腺重显著性升高,CTX组胸腺指数显著性降低,与CTX组相比,Avasimibe组及CTX+Avasimibe组的胸腺重及胸腺指数均显著性增加。对照组小鼠出现肝肺转移,CTX组、Avasimibe组及CTX+Avasimibe组未见肝肺转移情况;与对照组和CTX组比较,Avasimibe组及CTX+Avasimibe组ACAT-1蛋白表达降低。[结论] Avasimibe在Lewis肺癌小鼠体内可有效发挥抑制肿瘤生长及转移的作用,而且还可以提高小鼠的免疫功能,这为肺癌治疗提供一个新靶点。