β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及表达

从一株产碱性纤维素酶的短小芽孢杆菌菌株H9中,克隆到了编码葡聚糖内切酶的基因,对其基因序列及酶的结构域进行了分析预测,同时将该酶的基因构建于大肠杆菌表达载体pET20b中,获得重组表达载体pET20b-EglA,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)中进行表达,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测.实验结果表明:该基因大小为1980bp,共编码659个氨基酸,在大肠杆菌中得到了良好的分泌表达;该酶的相对分子质量约为73000,由两个不连续的结构域组成,其一为N-端催化结构域,由糖基水解酶家族9组成,其二为C-端底物结合结构域,由碳水化合物绑定结构域家族3组成,其在不同温度和pH值下的活力和稳定性与原始菌株的比较接近.

枯草芽孢杆菌E_(20)发酵产生挥发性风味成分的GC/MS分析

以枯草芽孢杆菌E20作为菌种,大豆作为培养基,在高温条件下固体发酵,用乙醚提取其挥发性成分,经GC/MS技术测定,鉴定出的主要物质有苯基乙醛、4-甲基-2,6-二叔丁基-苯酚、吲哚、α-呋喃甲醇、2,3,5-三甲基吡嗪、2-乙酰基噻唑、苯甲醇、苯乙醇等酱香型白酒的风味骨架成分,说明枯草芽孢杆菌在白酒酱香风味物质的形成中发挥着重要的作用。

一株碱性纤维素酶产生菌的分离、鉴定及酶谱分析

目的:从土样中分离株碱性纤维素酶高产菌株。方法:利用CMC平板初筛,然后利用摇瓶复筛,筛选酶活力高的菌株,对分离出的一株高产菌株进行了鉴定并对其所产酶进行了酶谱分析。结果:获得一株碱性纤维素酶高产菌株H12,酶活力达到1.96U/ml。结论:该菌株呈长杆状、革兰氏染色为阳性、产芽孢;16S rDNA基因序列为1 419bp,与短小芽孢杆菌16S rDNA基因序列具有最高的同源性,基于16S rDNA基因序列的同源性分析以及系统发育分析等方面的多相分类研究,鉴定菌株H12为为短小芽孢杆菌;碱性纤维素酶的酶谱分析只有一条水解条带,酶分子量在75kD左右。

嗜碱芽孢杆菌产碱性纤维素酶研究概况

碱性纤维素酶是重要的洗涤剂添加剂,不仅可以去除衣物上的污渍,还可以软化衣物和增加衣物的鲜艳度。嗜碱芽孢杆菌是生产碱性纤维素酶的主要菌种。本文概述了其编码的碱性纤维素酶的性质,编码酶的基因、基因的克隆、表达以及作为洗涤剂添加剂的去污机理,指出了今后的研究方向。

培养条件对植物细胞培养生产花青素影响的研究进展

花青素是一种重要的生物资源,综述了植物产生花青素的概况及植物细胞培养过程中,碳源、氮源、激素、光、温度及前体添加剂等因素对植物细胞生产花青素的影响,并对植物细胞培养生产花青素及其前景进行了展望。

短小芽孢杆菌β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及在大肠杆菌中的分泌表达

从一株产碱性纤维素酶的短小芽孢杆菌H12中克隆了编码β-1,4-葡聚糖内切酶的基因,对其基因序列及其酶的结构域进行了分析预测,同时将该酶的基因构建于大肠杆菌表达载体pET20b中,获得重组表达载体pET20b-EglA,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行表达。结果表明,该基因大小为1980 bp,共编码659个氨基酸;对β-1,4-葡聚糖内切酶结构域分析表明,该酶由两个不连续的结构域组成,其一为N-端催化结构域,由糖基水解酶家族9组成,其二为C-端底物结合结构域,由碳水化合物绑定结构域家族3组成;平板实验结果表明,β-1,4-葡聚糖内切酶基因在重组大肠杆菌中得到了良好的分泌表达;SDS-PAGE电泳图谱表明该酶的分子大小约为73 kDa。

基于工作过程的“生物制药工艺”课程改革研究

介绍了"生物制药工艺"课程概况,分析了该课程教学中存在的问题,阐述了基于工作过程系统化的"生物制药工艺"课程改革研究,并具体针对课程设计的理念与思路,教学内容的设计、组织与实施,教学方法与手段的运用等方面进行了改革探索,从而显著提高了课程的教学质量和效果。

高职《微生物学与免疫学》教学改革初探

本文阐述了对《微生物学》与《免疫学》两门课程进行的改革和创新,内容包括改革教学模式和考核办法,更新教育观念,改进教学方法,确立以模块教学为中心,确立以提高学生学习能力水平为目标的课程指导思想,明确高职人才培养目标不是培养理论知识"大而全"的研究型人才而是以"必需、够用"原则来培养高等技术应用型人才。并说明了将《微生物学》与《免疫学》两门课程改革为《微生物学与免疫学》一门课程的思路。

β-1,4-葡聚糖内切酶的定向进化

根据阳性转化子在IPTG诱导下可以在LB-CMC平板上产生水解圈的原理,在初筛和摇瓶复筛的基础上,采用易错PCR法对β-1,4-葡聚糖内切酶基因进行定向进化,从阳性转化子中筛选酶活提高的突变菌株。突变酶活性是野生酶的1.32倍,催化效率约为野生酶的1.26倍。基因测序结果表明,突变酶基因DNA序列中有3个碱基发生了突变,导致氨基酸序列中有2个氨基酸发生了改变:野生酶突变位点的密码子AAA(106 bp)突变为GAA,其编码的赖氨酸变为谷氨酸;野生酶突变位点的密码子TTT(1760 bp)突变为TCT,其编码的苯丙氨酸变为赖氨酸;野生酶突变位点的密码子GGT(1962 bp)突变为GGC,但是其编码的氨基酸没有发生改变,为同义突变。

一株葡聚糖酶产生菌的分离选育及鉴定

利用葡聚糖平板初筛,三角摇瓶复筛,从土壤样品中中分离得到一株葡聚糖酶高产菌株P5,发酵酶活力可以达到2.5U/mL。菌株呈长杆状、革兰氏染色阳性、产芽孢;生理生化实验结果表明该菌株与枯草芽孢杆菌最为相近;16S rDNA基因序列包含1510个碱基对,同源性分析显示该菌株与枯草芽孢杆菌菌株最为相近,最高相似性为99%,基于16S rDNA基因序列的系统发育分析显示,该菌株与枯草芽孢杆菌菌株CD-6及YPM8的亲缘关系最近,根据以上多相分类结果鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌。

葡聚糖酶产生菌的诱变选育

利用紫外线诱变育种方法分离对前期分离到一株葡聚糖酶野生菌株P5进行诱变。通过平板初筛、摇瓶复筛,从诱变菌株中筛选出一株高产菌株,其发酵酶活力可以达到5.85U/mL;在此基础上,对诱变菌株的发酵产酶工艺进行了初步的优化,其最适碳源为淀粉,最适氮源为花生饼粉,正交试验结果表明,淀粉含量为5%、花生饼粉含量为4%、NaH2PO4含量为0.2%时,该菌株的产酶量最高,酶活力达到21.23U/mL。

生物技能竞赛对生物技术专业教学促进作用

笔者介绍了生物技能竞赛的相关情况,研究了生物技能竞赛对生药技术专业教学的促进作用:促进实验室建设和实训教学工作,促进学生探究学习的兴趣和自主学习的能力,对课程目标进行导向和课程内容进行优化,促进师资队伍建设,加强与兄弟院校的交流,切磋技艺,共同提高。

一株碱性纤维素酶高产菌株的分离、鉴定、系统发育分析及酶学性质的研究(英文)

对从土样中分离得到的一株碱性纤维素酶高产菌株H9进行了鉴定,该菌株呈长杆状,革兰氏染色为阳性,产芽孢。通过对其形态、生理生化特性、16S rDNA基因序列（该序列已收录于Genebank,登录号为EF501974）同源性分析的多相分类研究,确定该菌株为短小芽孢杆菌。对酶的性质研究表明,其最适pH值为8,最适温度为55℃,在pH值5-9范围内具有良好的稳定性。

基于工作过程的“生物制药工艺”课程学习情境设计

介绍了工作过程导向课程的理念及"生物制药工艺"课程概况,分析了传统课程教学中存在的问题。在此基础上,制定了基于工作过程系统化的"生物制药工艺"课程培养目标,提出了该课程学习情境设计的思路和方法,并对课程的教学情境进行了设计。

根癌农杆菌介导的玫瑰茄细胞遗传转化

以玫瑰茄无菌苗的子叶和下胚轴为受体材料,农杆菌LBA4404和EHA105为供体菌株,对玫瑰茄细胞外植体遗传转化的基本条件进行研究,建立了一个高效的玫瑰茄细胞遗传转化体系.利用这一转化体系获得了2个稳定表达新霉素磷酸转移酶活性的玫瑰茄转化细胞系.β-葡萄糖苷酸酶活性的组织化学检测和PCR扩增鉴定的结果表明,外植体总转化率达29.4%.试验结果还显示农杆菌LBA4404菌株较适合玫瑰茄外植体的转化,转化时不需添加乙酰丁香酮.

TLR21在斑马鱼免疫功能中的作用研究

[目的]研究斑马鱼TLR21受体家族的作用。[方法]用各种纯组分刺激斑马鱼,研究斑马鱼TLR21受体家族(zTLR21.1、zTLR21.3、zTLR21.4)的表达量变化,推测它们的功能。[结果]zTLR21.1对于LTA刺激无反应,对于LPS、ployI:C和Glucan刺激都有上调反应。zTLR21.3和zTLR21.4对于LPS、LTA和ployI:C刺激均无反应,对于Glucan刺激有明显上调变化。[结论]zTLR21.1可能是一种能够识别大部分抗原的模式识别受体。zTLR21.3和zTLR21.4的功能很类似,可能都是酵母的特异识别受体。

探讨慕课教学方法在生物制药技术课程中的应用

笔者主要介绍慕课的定义、慕课的模式和发展以及慕课在生物制药技术课程中的应用等几个方面,发现慕课作为一种新的教学模式可以拓展教学思路,调动学生的学习兴趣,提高课程的学习效率和效果,对生物制药技术课程的教学改革具有一定的借鉴和参考。

一株纤维素降解菌的分离、鉴定及产酶条件初步研究

目的:筛选具有纤维素降解能力的菌株。方法:在广州近郊自然环境取样,利用CMC固体平板筛选具有纤维素降解能力的菌株。结果:分离获得1株纤维素降解能力较强的菌株OY-01。该菌株最适生长温度和pH分别为35℃和6.0-7.0。形态学观察、生理生化和28SrDNA序列分析表明该菌株属于烟曲霉(Aspergillus fumigatus)。结论:菌株OY-01被鉴定为烟曲霉,其最适产酶条件为:氮源为硫酸铵,浓度0.15%,温度为35℃,初始pH6.0-7.0,培养48-60h,Aspergillus fumigatusOY-01具有一定的工业应用潜力。

不同来源陈皮药材的近红外光谱法分析

目的利用近红外光谱技术快速分析不同来源的陈皮药材。方法采集包括茶枝柑、贡柑、蕉柑、椪柑、年橘等22种陈皮样品的近红外光谱图,利用一介导数+矢量归一法对特征谱段10360~9681cm-1处理近红外光谱图谱,利用Ward’s聚类法研究不同来源陈皮的聚类关系。结果当类间距离>1.6时,所有的22种陈皮样本被分为两大类:表皮颜色鲜艳、光滑的陈皮聚在一起;表皮颜色暗淡、粗糙的陈皮聚在一起。结论近红外光谱技术是一种快速、简便、无损的分析方法,可作为一种辅助手段研究陈皮来源和性状。