TLR4基因在三黄鸡不同器官中的表达规律分析

为探究TLR4基因在三黄鸡不同器官中的表达规律,试验通过运用real-time PCR方法检测TLR4基因在100日龄三黄鸡公、母鸡不同器官中的表达情况。结果显示:三黄鸡母鸡的法氏囊、肌肉、肺、心、肝、下丘脑中TLR4的表达水平最高,脾脏、十二指肠中TLR4的表达水平较高,腺胃、胸腺、卵巢、回肠、肌胃、垂体、肾、盲肠、空肠和大脑最低。三黄鸡公鸡的心、胸腺、下丘脑、肺、法氏囊、垂体、肌肉、肝、脾中TLR4的表达水平显著高于其他器官。而公、母鸡对比,公鸡胸腺中TLR4的表达水平显著低于母鸡,但是法氏囊中TLR4的表达水平显著高于母鸡。研究结果为TLR4的深入研究提供了理论基础,同时为三黄鸡的抗病育种提供新思路。

HSP27在热应激致岭南黄鸡雏鸡免疫器官损伤中的作用

为了从热休克蛋白27（HSP27）基因角度揭示热应激致雏鸡免疫器官形态损伤的机制,试验将120只8日龄岭南黄鸡随机分为对照组和热应激组,并构建雏鸡热应激模型,采用组织切片和透射电镜方法对比分析其免疫器官在热应激条件下的显微结构和超微结构变化,并用Real-time PCR方法检测HSP27基因在免疫器官中mRNA的表达差异。结果表明：同日龄阶段比较,热应激组免疫器官发育不良,胸腺细胞数量减少,Hassall氏小体严重退化,胸腺细胞凋亡及坏死数量增多,染色质发生聚集,细胞器肿胀变性;脾脏组织疏松,脾小结生发中心不明显,动脉周围淋巴鞘变薄,淋巴细胞结构疏松,胞核内异染色质减少,线粒体数量增多、结构异常;法氏囊中淋巴滤泡数量减少,皮质和髓质分界模糊,淋巴细胞染色质聚集,胞浆中粗面内质网上核糖体脱落,线粒体肿胀空泡化。法氏囊中HSP27 mRNA相对表达量逐渐降低,在热应激第21天时相对表达量显著高于第28,35天;脾脏中HSP27 mRNA相对表达量逐渐升高,在第35天时相对表达量显著高于第21,28天;胸腺中HSP27mRNA相对表达量与日龄无明显关联,在第28天时相对表达量最低且显著低于第21天和第35天。说明热应激会造成岭南黄鸡雏鸡免疫器官损伤,而HSP27在这一过程中扮演着重要角色。

广东省鹅细小病毒的分离及序列分析

从广东省鹅主要养殖区分离出2株鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV),分别命名为GDQY2017和GDYJ2017,纯化后测序分析。VP基因的系统发育分析结果表明,2株GPV单独形成一个分支,与疫苗株距离较远。选择压力分析结果表明,分离株的1位点有强烈的净化选择。氨基酸分析结果显示,与疫苗株相比,分离的GPV菌株含有22个不同的氨基酸残基,并且具有阳性选择的位点(Arg116Gln)。

SYBR Green I实时PCR检测三黄鸡TLR4基因方法的建立

本研究旨在建立三黄鸡TLR4(Toll like receptor 4)基因的实时荧光定量PCR检测技术,为三黄鸡TLR4基因表达的定量分析提供基础.根据GenBank三黄鸡TLR4基因的保守区域设计引物,采用SYBR Green I染料建立荧光定量PCR方法,以阳性重组质粒为标准品建立标准曲线,并进行了溶解曲线分析.结果表明,本研究建立的三黄鸡TLR4基因荧光定量PCR方法具有快速、线性范围广及重复性高等特点,为三黄鸡TLR4基因的进一步研究奠定基础.