肿瘤微环境在神经纤毛蛋白1诱导的辐射抗性中的作用机制

目的 观察神经纤毛蛋白1（NRP1）对肺癌细胞炎性微环境及迁移微环境的影响，并探讨肿瘤微环境中的炎性因子和趋化因子在NRP1诱导的肺癌细胞辐射抗性中的作用机制。方法 建立NRP1LowA549和A549-RR细胞模型，并鉴定两种细胞模型中NRP1的表达水平。利用三维培养技术分别建立A549＋Jurkat、NRP1LowA549＋Jurkat、A549-RR＋Jurkat三维共培养模型；A549＋HLF-1、NRP1LowA549＋HLF-1、A549-RR＋HLF-1三维共培养模型，同时设立对照组和照射组。共培养2 d后，对照射组进行10 Gy X射线照射。24 h后收集各种模型的培养基上清液，利用cytometric bead array（CBA）方法通过流式细胞仪检测相关因子的表达情况。结果 在NRP1LowA549细胞中NRP1的表达明显受到抑制，而在A549-RR细胞中NRP1的表达明显升高。在炎性微环境方面，发现IL-12p70与TNF在A549-RR＋Jurkat组中，表达明显低于A549＋Jurkat组（t=3.88、5.34，P〈0.05），但经照射后明显升高（t=8.49、5.92，P〈0.05）；而IL-6及IL-8表达则相反，在A549-RR＋Jurkat组中，表达明显高于A549＋Jurkat组（t=38.30、30.02，P〈0.05），但经照射后明显降低（t=14.39、9.78，P〈0.05）。IL-1β、IL-10表达量在各组中经照射后与对照组相比均有不同程度的降低（t=2.80~11.22，P〈0.05）。在迁移微环境方面，发现与A549＋HLF-1组相比，RANTES、MCP-1在NRP1LowA549＋HLF-1组中，均呈现表达升高（t=6.07、4.04，P〈0.05），在A549-RR＋HLF-1组中表达明显降低（t=15.50、14.62，P〈0.05）的趋势。照射后，RANTES、MCP-1在各组中与对照组相比均不同程度降低（t=2.23、8.45、16.68，P〈0.05）。与其不同的是，IP-10、CXCL8（IL-8）在其他各组中表达量均低于A549＋HLF-1组，且在NRP1LowA549＋HLF-1组中降幅最大（t=31.86、29.79、6.62、3.85，P〈0.05）。结论 NRP1对肺癌炎性微环境及迁移微环境中相关炎性因子和趋化因子的表达具有明显影响，且这些因子对肺癌细胞辐射抗性的调控具有重要作用。