华支睾吸虫感染对兔肝胆汁成分影响的初步观察

家兔感染华支睾吸虫囊蚴后,肝胆汁中细菌性β-葡萄糖醛酸苷酶活性升高,感染组为52.6±31.6u/100ml胆汁,对照组为12.5±20.5u/100ml胆汁,有非常显著性差异(P<0.001)。而胆红素、胆固醇、磷脂、胆酸含量则变化不大。用阿尔辛蓝-PAS染色法观察感染兔肝组织切片,可见胆道上皮高度增生并发生杯状细胞化生,其内充满糖蛋白并向管腔内分泌。作者认为细菌性β-葡萄糖醛酸苷酶活性升高以及糖蛋白分泌增多,有助于解释华支睾吸虫病常合并胆石症的现象。

逆转录聚合酶链反应检测乙型脑炎病毒核酸

本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测乙型脑炎病毒基因。所设计引物在E基因组,引物1位于碱基序列的第1953～1972位,引物2位于第1788—1806位。反应产物为185bp,内含HaeⅢ限制性内切酶位点。产物在含溴化乙锭的2％琼脂糖中电泳。本法可特异性地检测乙型脑炎病毒核酸,并可检出少至5TCID_(50)的病毒RNA。

逆转录聚合酶链反应检测Ⅲ型登革病毒的敏感性和特异性研究

本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测Ⅲ型登革病毒基因。所设计引物在E基因组,引物2位于核苷酸序列的1139～1158位,引物1位于1453～1471位,反应产物为333bp,内含1个HindⅢ限制性内切酶位点,酶切后有128 bp和199 bp两个片段。产物在含溴化乙锭的2％琼脂糖中电泳。采用RT-PCR法可测出少至5个半数组织细胞培养感染量(TCID_so)的病毒RNA。

酶联免疫吸附试验在检测登革免疫复合物应用

采用ELISA法检测登革热(DF)病人血清特异性免疫复合物,发现在发病后1～5天内测出光密度(OD)值为2.22土0.02～2±0.00,而正常人及肝炎病人血清OD值均为1.35士0.03,两者OD值比较有显著差异(P<0.01);登革免疫复合物OD值判别界限为1.78,登革热病人血清特异性免疫复合物OD值全部大于截断点1.78,而肝炎病人或正常人血清OD值无1例超过1.78。可见ELISA法检测登革热病人血清特异性免疫复合物特异性高,重复性好,对于研究登革特异免疫复合物在登革出血热(DHF)发病机制中的作用有一定意义。

逆转录聚合酶链反应检测Ⅱ型登革病毒基因

本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ⅱ型登革病毒基因。所设计引物在E基因区,引物1位于碱基序列的1566—1586,引物2位于1437—1458。引物在黄病毒属中为Ⅱ型登革病毒特有,它是Ⅱ型各株保守区。反应产物为150bp,内含一个HindⅢ酶位点,酶切后有111bP和39bp两个片段。使用本法对一系列稀释的培养液进行检测,可检出少至5TCID_(50)的病毒RNA。此外还检测了10份经病毒分离与免疫萤光分型证实为Ⅱ型登革热病人的血清和14份疑似Ⅱ型登革热病人但病毒分离阴性的急性期血清。证明本法敏感性明显高于病毒分离。

RT-PCR扩增Ⅰ型登革病毒核酸及其临床应用

应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增I型登革病毒E基因部分片段。所设计的引物1位于碱基序列的第1537～1557,引物2位于1318～1336,扩增产物240bp,对I型登革病毒特异。通过检测证明RT-PCR可测出少至5TCID_(50)的病毒RNA。经对11份病毒分离与免疫荧光分型证实为I型登革热病人的血清和9份疑似I型登革热但病毒分离阴性的急性期病人血清检测,证明RT-PCR敏感性明显高于病毒分离的敏感性。可用于登革热的早期快速诊断。

IgM抗体捕捉－生物素亲合素－ELISA检测Ⅳ型登革病毒IgM抗体及其临床意义

用蔗糖丙酮抽提的鼠脑Ⅳ型登革病毒抗原和金黄色萄萄球菌诱发免疫小鼠制备Ⅳ型登革病毒腹水折体建立ＩｇＭ折体捕捉－生物素亲和素－酶联免疫吸附试验（ＭＡＣ－ＢＡ－ＥＬＩＳＡ）检测５５份Ⅳ型登革热患者血清的ＩｇＭ抗体。急性期阳性率为４２．４％（１４／３３），恢复期阳性率为９５．５％（２１／２２）。在一些Ⅳ型登革热患者血清中，ＩｇＭ抗体的出现可早至第２或３病日。本试验具有较高的敏感性、特异性、快速和仅需单份血清等优点。