新生儿坏死性小肠结肠炎手术时机研究新进展

坏死性小肠结肠炎(NEC)发病率高、病情进展迅速、病死率高、后遗问题严重、内科保守治疗手段有限,对相当一部分病情严重和内科治疗无效的病例早期识别并及时进行手术干预可防止肠管发展为严重缺血坏死和随后的并发症,从而降低NEC的病死率并改善整体预后。但目前尚缺乏客观的临床手术指征体系。外科界对肠穿孔以外的NEC手术指征也远未达成共识。不同医疗机构或医生对于手术的决定及评估也主要凭临床经验,相对较为主观。故本文总结分析了近年来与NEC手术干预时机相关的文献。

多药耐药(MDR1)基因治疗对中晚期肝癌小鼠生存率的影响

目的 :探讨恶性肿瘤MDRl基因治疗以保护骨髓造血细胞 ,从而加大化疗剂量 ,提高中晚期肝癌小鼠生存率。方法 :用培养的H2 2腹水型肝癌细胞注入Balb/c小鼠制成肿瘤模型 ,同种骨髓造血细胞经浓缩病毒上清法转染MDRl基因后 ,移植入预先照射亚致死剂量60 Co -γ射线的荷瘤小鼠 ,再经大剂量化疗 ,实验分为对照组及阿霉素 5mg/kg(最大剂量 )组、10mg/kg(2×最大剂量 )组、2 0mg/kg(4×最大剂量 )组 3个剂量组 ,分别在化疗 3天后观察小鼠白细胞的变化情况 ,取骨髓造血细胞做P -糖蛋白免疫组化以观察MDRl基因的表达情况 ;测定小鼠死亡率。结果 :化疗第 1、2周实验组白细胞明显高于对照组(P <0 .0 1) ,第 1周各剂量组之间无明显差别 (P >0 .0 5 ) ,第 2周 2 0mg/kg(4×最大剂量 )组比其它两组白细胞数偏低 (P <0 .0 5 )。 10mg/kg和 2 0mg/kg组死亡率明显低于对照组 (P <0 .0 1)。实验组免疫组化阳性率为 8.6 3%± 0 .36 % ,而对照组为零。结论 :MDR1基因转染骨髓造血干细胞后 ,使其对阿霉素的耐受性增加。

荷瘤小鼠多柔比星化疗后表皮生长因子(EGF)表达的检测

目的 :探讨多柔比星 (阿霉素 )治疗实验性肿瘤对表皮生长因子 (EGF)表达的影响。方法 :制备H2 2腹水型肝癌肿瘤动物模型 ,分四组 :正常组 ,Balb/c小鼠用阿霉素 5mg/kg ;对照组单纯肿瘤模型小鼠 ;1X组荷瘤小鼠注阿霉素 5mg/kg ;3X组荷瘤小鼠注阿霉素 15mg/kg。采用阿霉素进行化疗 ,第六周酶联免疫吸附法检测血清中EGF及荧光定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测肿瘤组织EGFRmRNA的表达。并对这些指标进行相关分析。结果 :各实验组血清中EGF浓度分别为 3X组 1.19± 0 .4 2pg/ml,1X组 1.6 1± 0 .5 1pg/ml,对照组 2 .13± 0 .6 8pg/ml,正常组 0 .91± 0 .33pg/ml,统计学采用方差分析两两比较q检验。EGFRmRNA水平中位数分别为 3X组 1.6× 10 3 拷贝 /毫升 ,1X组 8.5× 10 4拷贝 /毫升 ,对照组 4× 10 5拷贝 /毫升 ,正常组 2 .5× 10 2 拷贝 /毫升 ,采用多样本间两两比较秩和检验 ,发现对照组血清EGF浓度及EGFRmRNA水平高于阿霉素化疗组 ,3X组低于 1X组 ,但均高于正常组 (P<0 .0 1)。阿霉素可以以剂量依赖性的方式降低肿瘤细胞中EGF的表达。EGFRmRNA水平与EGF蛋白量呈正相关关系。结论

热休克蛋白70在人胶质瘤耐药过程中的作用

目的应用热休克人胶质瘤细胞的方法,观察热休克蛋白70(HSP70)在人胶质瘤细胞耐药过程中的作用。方法经43℃热处理2h的人胶质瘤细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化技术检测HSP70mR-NA及蛋白的表达情况;应用hoechst33258荧光染色的方法观察化疗药物阿霉素(adriamycin,ADM)作用后,不同处理组人胶质瘤细胞的凋亡情况。结果HSP70免疫组化,HS+ADM组阳性率为(61.5±18.3)%,与HS组(61.0±14.1)%比较没有统计学意义,但显著高于对照组(8.50±4.09)%(P<0.05),RT-PCR结果与免疫组织化学一致;ADM组凋亡细胞比率为(52.7±19.1)%,显著高于对照组(6.5±3.6)%(P<0.05),HS+ADM组(25.0±10.7)%高于对照组但显著低于ADM组(P<0.05),HS组(7.2±3.6)%与对照组没有明显差异(P>0.05)。结论热休克的方法可以诱导人胶质瘤细胞HSP70的表达;HSP70可能是引起人胶质瘤细胞耐受ADM的机制之一。

人肺癌中NF-κBDNA结合活性的意义探讨

目的:观察在肺癌组织中核因子-κB(Nuclearfactor-kappaB,NF-κB)的DNA结合活性,探讨其在肺癌发展中的意义。方法:采用电泳迁移率(Electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)同位素放射自显影的方法分别检测有随访资料的87例肺癌组织中NF-κB的DNA结合活性。结果:NF-κBDNA结合活性在小细胞肺癌组织中高于其它病理类型,在低分化肺癌组织中结合活性较高,在淋巴结转移肺癌组织中结合活性高于无淋巴结转移肺癌组织(P<0.05)。结论:NF-κB的DNA结合活性与肺癌的病理类型、分化程度及是否有淋巴结转移等因素有关。

Cochrane系统评价方法对神经母细胞瘤分子与生物标记物的Meta分析

目的针对神经母细胞瘤已报道的生物标记进行系统评价及Meta分析,评价他们在筛查、诊断、预后以及检测治疗中的临床价值。方法对1990￣2007年的相关文献应用定义明确的检索策略进行文献检索。运用Cochrane系统评价方法,检索Cochrane图书馆临床对照试验资料库(2007年第2期)、PubMed(1990～2007年)、Embase(1990～2007年)和Cancerlit,应用RevMan4.2软件进行统计分析。结果共有536篇研究论文,报道208种不同的肿瘤标记,涉及筛查、诊断、检测及预后等4种临床相关的研究领域。样本量小,统计报告质量差,异质性大以及出版偏倚等是研究报告中存在的主要问题,限制了数据抽出合并等定量分析处理过程。预后研究文献量相对较大,进行Meta分析显示,MYCN、染色体1p、CD44及多药耐药等13种标记是潜在的重要预后判断工具。结论系统评价是神经母细胞瘤肿瘤标记的重要研究方法,可进一步确定一些重要的肿瘤标记,在将来的研究及治疗策略中需引起重视。另外,通过系统评价可以突出显示原始肿瘤标记研究中存在的普遍问题,例如报告的异质性及质量较差。这些问题需要更适当的临床研究提供证据。肿瘤研究组织之间的合作非常重要,可以扩大样本量,使分析及报告标准化,从而提高研究的质量。

儿童淋巴瘤病人贫血状况回顾性调查评估

目的本研究探讨儿童淋巴瘤病人贫血患病率、发病率及治疗模式,确定发生贫血的危险因素。方法回顾性分析318例淋巴瘤患儿的病史及随访资料,包括年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤及贫血的治疗方式,WHO体力状态等,并以血红蛋白水平为基础进行统计检验。结果贫血患病率为52.75%。血红蛋白水平与WHO得分明显相关(P<0.001)。在调查过程中贫血发病率为38.8%,年龄越小发病率越高;仅47.3%的病人在调查过程中接受了贫血的治疗。在开始治疗时总体血红蛋白最低点水平为89g/L,与贫血有关的危险因素有初始血红蛋白水平低、女性、抵抗性疾病以及铂类药物化疗等。结论淋巴瘤病人贫血患病率及发病率高,生活质量较差,应重视其治疗及危险因素的确定。

荷瘤小鼠多药耐药(MDR1)基因转染后P-gp体内表达的研究

目的 :探讨恶性肿瘤MDR1基因治疗过程中 ,MDR1基因在体内的表达。方法 :骨髓造血细胞转染MDR1基因后 ,程序性移植入预先照射亚致死剂量60 Co -γ射线的荷瘤小鼠 ,取骨髓造血细胞、肿瘤实体做P -糖蛋白免疫组化并做RT -PCR以观察MDRI基因的表达情况。结果 :各剂量组MDRI基因转染后随时间骨髓造血细胞P -糖蛋白表达逐渐增加 ,各剂量组之间无明显差异。P -糖蛋白表达化疗剂量较大组明显高于化疗剂量较小组。结论 :MDRI基因转染在骨髓造血细胞有较高表达 ,对肿瘤实体、肝脏、肾脏P -糖蛋白表达无影响。

人脑星形细胞瘤组织中NF-κB的DNA结合活性

背景与目的:人类肿瘤细胞的转录因子可在转录水平调控许多恶性相关基因的表达,与肿瘤细胞的低分化和高转移有关,并抑制肿瘤细胞凋亡。本研究旨在观察人脑星形细胞瘤组织中核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)的DNA结合活性,探讨其在人脑星形细胞瘤发生和发展中的意义。方法:采用电泳迁移率(electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)同位素放射自显影方法分别检测12例正常脑组织及37例人脑星形细胞瘤组织中NF-κB的DNA结合活性。结果:NF-κB的DNA结合活性在人脑星形细胞瘤组织光密度值为134.2±24.1,高于正常脑组织的97.5±1.9(P<0.05),其中多形胶质母细胞瘤(Ⅳ级)NF-κB的DNA结合活性最高,为106.8±7.4,依次为间变性星形细胞瘤(Ⅲ级)123.2±10.1,星形母细胞瘤(Ⅱ级)139.3±16.8,星形细胞瘤(Ⅰ级)160.2±18.6(P<0.05)。结论:NF-κB的DNA结合活性与人脑星形细胞瘤分级有关,并随恶性程度增加而增强。

多药耐药基因转染后加大化疗剂量以杀灭早期肝癌细胞的作用研究

目的 探讨恶性肿瘤MDRI基因治疗以后,加大化疗剂量,提高早期肝癌细胞的杀伤效果。方法 用培养的H22腹水型肝癌细胞注入balb/c 小鼠制成肿瘤模型,同种骨髓造血细胞经浓缩病毒上清法转染MDRI基因后,程序性移植入预先照射亚致死剂量60Co-γ射线的荷瘤小鼠,再经大剂量化疗。实验分为空白对照组（X=0.2mg/kg）、阴性对照（X=5 mg/kg）和阿霉素（X=5mg/kg最大剂量）组、（2X=10mg/kg）组、（4X=20mg/kg）组及逐渐加量（1-2-4-6-8-8X）组3个剂量组,分别在化疗3d后观察小鼠白细胞的变化情况,测定小鼠瘤体的大小、计算抑瘤率。结果 从第1周开始实验组白细胞明显高于空白对照组、阴性对照组（P<0.01）,阴性对照组白细胞前3周明显高于空白对照组,从第4周无明显差异（P>0.05）,实验组之间从第2周开始有明显差异（P<0.01）。瘤重从第1周开始实验组白细胞明显高于空白对照组、阴性对照组（P<0.01）,实验组之间从第1周开始有明显差异（P<0.01）,空白对照组、阴性对照组之间无明显差异（P>0.05）。剂量较大其抑瘤率较高。结论 MDRI基因治疗保护骨髓的情况下,大剂量化疗可以杀灭恶性肿瘤细胞,抑制肿瘤的迅速生长。

动物外科教学质量分析与思考

外科手术学教学方法需要不断改善与提高,目前,外科手术学教学中存在教学设施简陋、教师队伍不够稳定及缺乏经验、学生对外科手术学缺乏热情等问题,应通过分析实际教学过程中存在的问题,促进学生扎实的理论基础的培养,特别要锻炼医学生手术动手操作能力,所以,需加强对教学方法与模式的改进,以适应现代外科学发展对医学优秀人才的需求。

132例胆道闭锁Kasai术后患儿生存率及影响因素分析

目的:探讨影响胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿Kasai术后生存率的因素,为临床治疗方案选择及预后判断提供依据。方法:2007年1月至2014年1月间胆道闭锁行肝门空肠吻合术(Kasai术)且资料完整的患儿共132例,随访至2015年1月。所有数据录入SPSS19.0进行统计分析,运用寿命表法计算生存率,分别采用Kaplan-Meier法及COX比例风险回归模型对132例患者的手术时年龄、巨细胞病毒感染、术中病检肝硬化程度、术后是否应用激素与生存率间关系进行单因素和多因素综合分析。结果:132例患儿存活35例,死亡97例;存活患儿中位随访时间为53.3(12~86.17)个月。BA患儿Kasai术后1年预计生存率为(32.0±6.0)%,2年及5年预计生存率分别为(26.0±4.0)%及(24.0±4.0)%;术后未应用激素组存活率为18.7%(17/91),应用激素组存活率为43.9%(18/41);肝硬化组存活率为18.9%(14/74),非肝硬化组存活率为36.2%(21/58),经Log-rank检验,术后应用激素及非肝硬化为影响患儿长期生存的重要因素(P=0.027,P=0.037);经COX回归分析发现,术后激素应用是影响患儿生存率的重要独立因素(RR=0.602,95%CI=0.377~0.964,P=0.034)。结论:Kasai术为提高胆道闭锁患儿生存率的有效治疗方式。术后合理应用激素治疗可能是提高术后生存率的重要措施之一。

干细胞与肺

干细胞可以通过增殖、分化 ,补充机体所需的细胞。对肺部上皮干细胞的研究 ,不仅使我们对肺的发育、肺损伤修复机制有一个新的认识 ,而且对肺损伤修复治疗的设计也有重要意义 ,还能估计肺部肿瘤的发展情况 ,从而预防癌症的发生并应用于体内的基因治疗。除在肺局部寻找干细胞之外 ,其他干细胞转化为肺组织干细胞的可能性也值得探讨。

吸入一氧化氮对早产猪未成熟肺的作用

目的研究早产猪在机械通气下吸入一氧化氮(NO)对未成熟肺的呼吸功能、核转录因子(NFκB)表达的影响,以研究出生早期吸入NO是否对不成熟肺产生不良反应,并判断应用肺表面活性物质(PS)及NO的肺保护作用效果及其调节炎症反应的作用和机制。方法选择101～103d孕龄(89%足月孕期)母猪,行剖宫产获得32头早产猪(平均出生体重870g),气管插管后行间歇正压机械通气,随机分成4组(每组n=8)治疗:单纯机械通气(C组);吸入NO(NO组);加用肺表面活性物质(PS组);NO和PS联合应用(SNO组)。另选同窝自主呼吸组(N组)用于比较NFκB水平、肺湿干重比及肺组织病理学。机械通气各组分别测肺功能,血气分析,计算氧合指数(OI)和通气指数(VI)。机械通气6h后处死动物。结果治疗6h肺顺应性(Cdyn)和气道阻力(Raw)在各组间无统计学差异,OI在SNO组显著低于C组2.3±1.9vs9.5±7.5(P<0.05),VI在NO和SNO组低于C组和PS组(P<0.05或P<0.01)。NO组及N组NFκB活性最低,与C组相比差异有显著性,P<0.05。NO吸入过程中监测NO2水平均<1ppm。所有动物高铁血红蛋白(MetHb)浓度均<4%。NO和SNO组肺组织湿干重比显著低于C组6.88±0.53vs7.77±0.76(P<0.05)和6.61±0.56vs7.77±0.76(P<0.01)。病理检查见各组不同程度肺水肿、白细胞浸润,肺泡扩张度(Vv)和变异度(CV[Vv])显示肺泡中度成熟,但差异均无显著性。结论出生早期应用iNO或联合应用PS治疗可改善早产猪氧合和机械通气效率;小剂量短时间NO吸入有利于肺液清除,没有显著改变PS成分和/或直接致肺损伤;NO通过下调NFκB可能具有抑制/调节早产肺炎症反应启动机制的作用。

胆道闭锁患儿肝移植术后并发症分析

目的分析肝移植治疗胆道闭锁患儿术后并发症及预后。方法回顾性分析2006年6月-2014年4月于重庆医科大学附属儿童医院完成初次肝移植的41例胆道闭锁患儿临床资料,其中活体肝移植28例,心脏死亡器官捐献(DCD)供肝肝移植13例。活体与DCD肝移植受者术后随访时间分别为67~90个月和15~56个月,总结围手术期及随访期并发症发生情况及预后。计数资料组间比较采用Fisher's精确概率法。结果 41例肝移植受者围手术期并发症包括:血管并发症、腹腔出血、肠穿孔、排斥反应、感染并发症等。DCD肝移植组肝动脉栓塞(HAT)的发生率明显高于活体肝移植组(P=0.02)。围手术期死亡10例,其中活体肝移植组4例,包括HAT 1例;因HAT再次行DCD肝移植1例,后因原发肝无功能死亡;呕吐窒息1例;多器官功能衰竭1例。DCD肝移植死亡6例,包括HAT 1例;肺部肺炎克雷伯杆菌感染1例;肠漏后感染性休克1例;循环衰竭1例;严重毛细血管渗漏综合征1例;原发肝无功能1例。随访期活体肝移植死亡4例,包括肝静脉狭窄2例;胆道感染1例;胆道狭窄1例。DCD肝移植随访期间未发生死亡及其他并发症。结论胆道闭锁肝移植术后并发症多样,是影响肝移植手术成功率及长期生存率的重要因素,早期预防、早期发现、及时治疗,对改善肝移植患儿预后至关重要。

儿童活体肝移植术后细菌感染及药物敏感性分析

目的探讨儿童活体肝移植术后常见细菌感染种类及药物敏感性。方法对我院2006年6月至2009年3月共22例活体肝移植患儿术后细菌感染情况进行回顾性分析,总结常见细菌感染种类,并对其药物敏感试验结果、抗生素的选择进行分析。结果术后20/22(91%)患儿存在不同程度的显性及隐性感染;呼吸道(95%)及腹腔(55%)为最常见感染部位;铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌为呼吸道感染常见致病菌;表皮葡萄球菌、屎肠球菌为腹腔感染常见致病菌;药敏结果显示:环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星及多粘菌素对铜绿假单胞菌敏感;泰能、多粘菌素及美洛配能对鲍曼不动杆菌敏感;万古霉素、利奈唑烷及替考拉宁对表皮葡萄球菌、屎肠球菌敏感。结论儿童活体肝移植术后细菌感染较为多见。其中铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、屎肠球菌为常见致病菌。临床可选用时相应致细菌感染进行治疗左氧氟沙星、亚胺硫霉素、万古霉素。

基质金属蛋白酶在肺癌转移中作用的研究

目的:观察基质金属蛋白酶MMP2和MMP9在肺癌组织中的表达,探讨其与肺癌浸润及转移的关系。方法:采用免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应(RTPCR)的方法分别检测30例非癌肺组织及有随访资料的87例肺癌组织中MMP2和MMP9及其mRNA的表达。结果:MMP2和MMP9在肺癌与非癌肺组织均存在阳性表达,但在肺癌组织表达率高于非癌肺组织(P<0.05),小细胞肺癌、鳞癌、腺癌和非癌肺组织MMP2阳性率分别为85.7%、44.7%、47.6%和23.3%;MMP9阳性率分别为78.6%、47.4%、38.1%和20.0%,其中小细胞肺癌组织中表达率最高(P<0.05)。MMP2和MMP9mRNA在低分化程度肺癌组织中表达较高,Ⅰ级最高,Ⅱ级次之,Ⅲ级最低;在不同肿瘤类型之间MMP2和MMP9mRNA表达有显著差异,小细胞肺癌的MMP2及MMP9mRNA表达量明显高于腺癌和鳞癌;肺癌伴淋巴结转移患者癌组织MMP2及MMP9mRNA表达量明显高于未转移者。结论:MMP2和MMP9的表达与肺癌的病理类型、分化程度及是否有淋巴结转移等因素有关,MMP2和MMP9可能在肺癌侵袭转移中起重要作用。

人肺癌中甲状腺转录因子-1DNA结合活性的意义

背景与目的甲状腺转录因子-1(TTF-1)是一种细胞核蛋自,在调控肺泡上皮基因表达与活性物质分泌中具有潜在的重要作用。本研究观察在肺癌组织中TTF-1的DNA结合活性,探讨其与肺癌病理类型、分化程度的关系。方法采用电泳迁移率(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)同位素放射自显影,光密度分析的方法分别检测有随访资料的96例肺癌组织中TTF-1的DNA结合活性。结果TTF-1DNA结合活性在腺癌组织其光密度值为172±23.2,高于其它病理类型,其中小细胞癌光密度值为141±16.3,鳞癌光密度值为122±13.6(P<0.05);在高分化程度肺癌组织中TTF-1DNA结合活性较高(P<0.05)。TTF-1DNA结合活性水平与肺癌患者生存情况呈负相关。结论TTF-1DNA结合活性在肺癌组织较高;在不同病理类型、分化程度的肺癌组织中,TTF-1的DNA结合活性明显不同,可能在其中起重要作用,可作为肺癌患者转移及生存情况的潜在预测因子。

胆道闭锁与婴儿肝炎综合征肝活检病理对比分析

目的对比分析胆道闭锁、婴儿肝炎综合征患儿肝组织活检病理表现,明确胆道闭锁与婴儿肝炎综合征的相关性及不同病理表现。方法收集2004年1月至2014年1月在本院因黄疸保守治疗效果不佳而疑为胆道畸形并行胆道探查、胆道造影患儿的肝活检标本32例,其中胆道闭锁25例,婴儿肝炎综合征7例,分别就两者肝活检HE染色切片肝细胞淤胆、变性,毛胆管淤胆,汇管区胆管增生,胆管内胆栓,汇管区炎性细胞浸润,肝脏纤维化程度进行比较。结果虽然婴儿肝炎综合征胆道造影存在胆道形态异常,但同年龄段胆道闭锁与婴儿肝炎综合征患儿肝细胞淤胆、变性,毛胆管淤胆,汇管区炎性细胞浸润等情况比较无明显差异;胆道闭锁患儿汇管区胆管增生,肝脏纤维化程度明显高于婴儿肝炎综合征组(P<0.05)。结论婴儿肝炎综合征与胆道闭锁病理表现明显不同;汇管区胆管增生、肝纤维化程度是鉴别胆道闭锁与婴儿肝炎综合征的主要病理依据;婴儿肝炎综合征能否最终发展为胆道闭锁尚需进一步随访研究。