重组结核分枝杆菌RpfE蛋白对BCG休眠菌的促生长作用

目的观察重组结核分枝杆菌RpfE蛋白对BCG的促生长作用。方法将测序正确的Rv2450c基因克隆到表达载体pET32a(+)中,获得RpfE蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行亲和层析纯化。将纯化的蛋白分别与结核病人血清,Rpf单抗和Rpf结构域单抗进行Western blot分析。分别将10pmol/L和100pmol/L的RpfE加入到休眠BCG的培养基中,观察RpfE蛋白对BCG的促生长作用。结果得到融合组氨酸残基的重组RpfE蛋白,Western blot结果显示该蛋白分别与活动期结核病人血清,Rpf单抗和Rpf结构域单抗在40kDa处发生反应。100pmol/L的RpfE蛋白对BCG休眠菌具有明显的复苏和促生长作用。结论构建了MtbRv2450c基因的重组表达载体,纯化获得了RpfE重组蛋白,该蛋白对BCG休眠菌具有复苏和促生长作用。

以国家能源集团为例浅析企业如何破冰核电产业

面对“双碳”目标和能源高质量发展新要求,大型能源企业作为保障我国能源安全,推进高质量发展的践行者,加快自身能源结构低碳化和产业转型升级势在必行。研究以国家能源集团为例,通过分析我国能源结构及中远期发展规划,明确能源企业发展核电的必要性和紧迫性,对大型能源企业投资建设核电厂的技术经济性、技术路径、选址规划、核能综合利用提出参考建议。

白光联合荧光支气管镜在肺癌早期诊断中作用的临床评价

目的评价白光联合荧光支气管镜在肺癌早期诊断中的价值。方法将支气管镜检查的患者分普通白光电子支气管镜组(白光组)和荧光电子支气管镜组(联合组),采用刷检和/或钳夹方法取得标本组织送检,对比两组对肺癌组织检查结果的差异。结果入选患者87例,白光组和联合组分别45例、42例,最终两组分别确诊肺癌23例和26例。其中白光组与联合组的一次性检出率分别为73.9%、88.5%,两者有统计学差异(P<0.05)。镜下判断恶性的准确性,白光组的敏感率、特异率、阳性预告值和阴性预告值分别82.1%、71.4%、85.1%和66.7%,而联合组分别是92.5%、46.7%、75.8%和77.8%。结论采用白光联合荧光检查的荧光支气管镜,对肺癌病灶的检出具有高敏感性、低特异性的特点,对气道粘膜癌变的早期检出具有一定的优势。

考虑风险与调峰性能的水光互补中长期调度

传统水光互补中长期调度模型未考虑日内运行风险以及系统的调峰特性,高估了系统的互补性能,由此制定的调度规则难以提升互补系统效能。为此,本文构建长短期决策响应函数,用以定量表征中长期水电出力与日内综合风险率、弃电率、调峰性能指标之间的关系;然后,将决策响应函数嵌套到中长期调度模型中,推求考虑日内风险以及调峰性能的水光互补中长期优化调度规则。以忠玉水光互补电站为实例,研究表明:嵌套决策响应函数的优化调度模型可显著提升系统发电量(增加2.61%)以及发电保证率(由46.7%提高到85.7%),降低系统剩余负荷标准差(降低10.0%)和综合风险率(由9.51%降低到5.43%),综合效能更优。

机械通气下小儿重症肺炎的护理

小儿重症肺炎发病急,进展快,病情重,是儿科常见的重症疾病,致死率高。儿科重症肺炎常合并呼吸衰竭等严重并发症,导致病情加重,治疗难度增大,死亡率上升。2017年3月-2018年5月,我科收治多例重症肺炎患儿,常规治疗后症状无明显改善,伴呼吸衰竭,予以机械通气辅助呼吸后,呼吸困难症状大大缓解,2-4d后撤机,患儿呼吸困难症状消失,生命体征平稳,现将护理体会报告如下。

如何认识抗生素这把“双刃剑”——谈抗生素临床应用体会

抗生素是临床最常用的药物之一,它跟其他药物一样,也具有利弊双重性。本文结合临床之所见,从反面浅谈抗生素使用的一些体会。通过介绍抗生素目前面临的问题,提出临床上医生如何规范应用抗生素,以使抗生素发挥最好疗效而弊端降至最低。

沙门菌外膜蛋白D的原核表达及多克隆抗体制备

目的:在大肠杆菌中表达沙门菌外膜蛋白(OMP)D,纯化后制备兔抗OMPD抗体。方法:用PCR方法从鼠伤寒沙门菌中扩增出ompD基因,并插入融合表达载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET28a(+)-ompD;以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性重组菌株,经IPTG诱导目的蛋白表达,在变性条件下对目的蛋白进行亲和层析纯化;以表达的OMPD蛋白免疫家兔,制备抗OMPD的多克隆抗体并进行鉴定。结果:扩增了ompD基因,测序证实正确后亚克隆于表达载体pET-28a(+)中,经PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,经诱导在大肠杆菌中表达出相对分子质量为40×103的目的蛋白并进行纯化;纯化的OMPD免疫家兔后,能有效地刺激特异性抗体的产生,抗血清的效价达到1∶10000以上,且具有良好的特异性。结论:构建ompD基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;制备出兔抗OMPD抗体,效价及特异性均良好,为进一步制备肠黏膜高亲和力疫苗奠定了基础。

大型水光互补电站的光伏捆绑容量规划

多能互补运行是促进新能源消纳的有效途径,合理确定多能互补系统中新能源捆绑容量,对于增加不同能源的协同性,进而发挥多能互补效能具有重要作用。针对传统容量配置模型对互补运行过程考虑不够精细的问题,在模拟大型水光互补电站精细化运行过程的基础上,结合成本效益分析提出最优光伏捆绑容量规划方法。首先,在不同光伏装机规模下,构建互补中长期优化调度模型,确定长期时段的水量和电量分配;其次,在中长期调度边界条件下,构建互补短期优化调度模型,模拟日发电计划编制和实时运行,计算对应的光伏弃电率;最后,基于成本效益分析方法构建装机容量规划模型,以光伏电站全生命周期净效益最大为目标确定最优光伏捆绑容量。以忠玉水光互补工程为研究对象,结果表明:(1)当光伏装机容量在500 MW以下时,光伏弃电率维持在2%以内,随着光伏装机容量的增加,光伏弃电率迅速上升;(2)在0.1元/kWh的上网电价条件下,光伏电站的净现值总为负值,经济性较差;(3)在0.353元/kWh的上网电价条件下,装机容量为1 030 MW的水电站所能捆绑的最优光伏装机为1 900 MW,考虑径流随机性的光伏电站全生命周期效益的净现值区间为46.2~54.6亿元。研究方法可为流域水风光一体化系统的精准容量配置提供参考。

双胎早产合并大疱表皮松解症患儿的皮肤护理

大疱性表皮松解症(epidermolysis bullosa,EB)分为遗传性(先天性)和获得性(EBA)2种。本病呈常染色体显性或隐性遗传,其临床特征是皮肤受压或摩擦后即可引起大疱。但出生后即发病较为少见[1]。早产儿皮下纤维组织较薄,表皮、真皮不紧密,皮肤浮动性大[2],极易出现皮肤破损等情况。因此临床上加强护理,预防皮肤感染可缩短早产儿合并EB患儿的住院时间,避免死亡。

阳郁理论刍议

阳郁首见于《黄帝内经》,本文将以时间为线索研究阳郁的奥义,起源与演变,从寒凝、气滞、血瘀、湿阻、痰结、虚损角度分析阳郁的病因,以及阳郁于皮肤肌腠、筋脉关节、脏腑官窍的具体病证和阳郁的相关论治,使读者更加系统化地认识阳郁,以期提供更多临证思路,进而提高疗效。

我院2009—2011年重症监护病房病原菌分布及耐药性分析

目的调查我院重症监护室(ICU)病原菌的感染分布情况与耐药变迁,以指导医院感染病原菌的耐药性监测和临床合理使用抗生素。方法对2009年1月—2011年12月ICU住院患者各类感染性标本分离的4116株病原菌(2009年,1137株;2010年,1413株;2011年,1566株)资料进行回顾性分析。结果鲍曼不动杆菌2009年检出率位居第二,后两年则稳居榜首;铜绿假单胞菌从前两年并列第二,降至2010年的第三位14.8%稍有回落;大肠杆菌检出率2009—2011年依次为6.3%、7.7%和7.8%,呈逐年上升趋势;屎肠球菌2009年的检出率为3.3%,2010年为4.5%,2011年为4.5%。头孢派酮/舒巴坦对G-杆菌有较好的敏感性;头孢吡肟对铜绿假单胞菌的耐药率在20%左右;多粘菌素B有很好的敏感性,2011年未发现耐药菌株;碳青酶烯类抗生素对肺炎克雷伯菌的敏感率100%;哌拉西林/他唑巴坦的耐药率2009年为28.5%,2010年为23.7%,2011年为14.9%;米诺环素对屎肠球菌的耐药率逐年下降,2009年为13.2%,2010年为12.7%,2011年为4.3%。耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌的检出:2009年为89.0%、2010年为90.5%、2011年为92.3%,呈现逐年升高趋势,但未发现对万古霉素、替考拉宁、利那唑胺耐药菌株。结论 ICU病房病原菌检出率高,且常为条件致病菌和多重耐药菌,耐抗菌药物种类广,耐药性强。临床应高度重视耐药菌的监测,合理使用抗生素。

结核分枝杆菌肝素结合血凝素与人IL12融合基因重组耻垢分枝杆菌的构建及鉴定

目的构建表达肝素结合血凝素与人IL12融合基因的重组耻垢分枝杆菌并对其进行鉴定。方法通过RT-PCR从人淋巴细胞获得hIL12基因模板,采用PCR技术克隆hIL12的P40和P35两个亚基及结核分枝杆菌的HBHA基因,通过酶切鉴定及DNA测序证实连接的基因片段均正确后,构建分枝杆菌穿梭表达质粒pSMT3-HBHA-hIL12,并用电穿孔法将重组质粒转到耻垢分枝杆菌中。分别用HBHA单克隆抗体和hIL12多克隆抗体检测HBHA和hIL12蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达,并测定重组耻垢分枝杆菌生长状态的改变。结果重组耻垢分枝杆菌构建成功,通过HBHA单抗和hIL12多抗进行免疫荧光法检测证实HBHA和hIL12均有表达,并且重组的耻垢分枝杆菌的生长速度比正常组有较大的提高。结论成功构建了表达结核分枝杆菌HBHA基因和人IL12的重组耻垢分枝杆菌,为构建一种结核病的候选疫苗提供了实验基础。

胞壁形式表达融合蛋白Der p2-PEB1重组BCG的构建和鉴定

利用重组BCG技术,构建能以胞壁形式表达屋尘螨Der p2和PEB1抗原的重组BCG口服哮喘疫苗pCW-Der p2-PEB1-rBCG,以pCW-Der p2质粒和pUC-PEB1质粒DNA为模板扩增基因,构建出重组质粒pCW-Der p2-PEB1。将重组质粒电穿导入BCG感受态细胞,潮霉素抗性筛选rBCG阳性克隆。阳性rBCG经PCR特异性扩增目的基因片段Der p2及PEB1,证实其中含有目的基因。用抗Der p2单克隆抗体和制备的小鼠PEB1抗血清对rBCG进行间接免疫荧光鉴定。结果成功扩增了Derp2及PEB1基因,构建出重组质粒pCW-Der p2-PEB1,并将质粒电穿入BCG中,免疫荧光法鉴定其成功。说明成功地构建了胞壁表达Derp2-PEB1融合蛋白重组BCGpCW-Der p2-PEB1-rBCG。为基因工程疫苗的研制奠定了基础。

1例2个月川崎病患儿的护理

川崎病又称皮肤黏膜淋巴结综合征,是1967年由日本川崎富作医生首次报道而得名。临床主要表现为持续高热、皮疹、双眼结膜充血、手足皮肤硬性肿胀、淋巴结肿大以及心血管系统病变。川崎病起病急,病情发展快,好发于5岁以下儿童。2015年9月我院收治1例2个月川崎病患儿,经过全科医护人员的积极治疗和护理,康复出院,现总结如下。

结核分枝杆菌RpfA蛋白的表达、纯化与鉴定

目的构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)RpfA的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达、纯化和鉴定。方法用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出编码RpfA蛋白的Rv0867c基因,通过克隆载体pMD18-T构建质粒载体pMD18-T-Rv0867c。经酶切和DNA序列测定证实正确后,将Rv0867c基因克隆到pET32a(+)载体并在大肠杆菌BL21中诱导表,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot鉴定后,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化。结果双酶切鉴定所切下的片段大小与理论值相符,测序结果与文献报道一致。Western-blot结果显示,在相对分子量约102 kDa处有分别与Anti-His单抗、Rpf结构域单抗和TB病人血清特异性结合带。结论成功表达、鉴定和纯化了RpfA蛋白。

情绪分析在食品开发中的应用研究

本文介绍了食品与情绪的关联,包括情绪的分类以及食品与情绪如何相互影响,并综述了近年来食品行业常用的情绪分析方法,最后对情绪分析应用于食品开发时的注意事项进行总结,为其在食品开发中的应用提供借鉴。

新时代高校劳动教育课程实施的问题与消解

高校劳动教育是以课程实施为主要载体,帮助当代大学生树立正确的劳动价值观,提高劳动技能,形成热爱劳动的情感态度,实现德智体美劳全面发展的实践育人活动。新时代高校劳动教育课程实施有利于增强当代大学生的社会责任意识,提高社会实践能力,激发实践创新精神。为消解当前高校劳动教育所存在的课程实施目标片面化、课程实施内容空洞化、课程评价模式单一化等现实问题,有效贯彻《中共中央国务院关于全面加强新时代大中小学劳动教育的意见》精神,高校劳动教育应着力课程实施目标、课程内容框架与课程评价机制的重建,积极探构新时代高校劳动教育课程实施新路径。

晚期非小细胞肺癌个体化治疗中胸苷酸合酶的检测及意义﹡

目的:探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者个体化治疗中胸苷酸合酶(TS)的检测及临床意义。方法:对经病理确诊的晚期NSCLC患者行培美曲塞联合顺铂化疗,将所有患者按照1∶2随机分为对照组和基因型组,再根据TS的表达将基因型组分为TS(+)、TS(-)两组,观察不同组间近期疗效及远期疗效。结果:本研究62例患者的总体有效率为43.5%,对照组患者有效率为35%,基因型组有效率为47.5%,两组患者有效率比较无显著性差异(P>0.05);基因型组中TS(-)组有效率为54.5%,明显高于TS(+)组(20%,P<0.05);各组间中位无疾病进展生存期、中位生存期及1年生存率无显著性差异(P>0.05)。结论:TS低表达患者中使用个体化治疗可获得更高的有效率,而TS高表达患者可能意味着对培美曲塞耐药。

屋尘螨抗原Der p2重组耻垢分枝杆菌的构建及其鉴定

目的构建并鉴定能够分泌表达外源蛋白——屋尘螨抗原(Der p2)的基因重组耻垢分枝杆菌(rM.s)。方法采用电穿技术,将鉴定好的PCW-Der p2质粒转化到耻垢分枝杆菌(M.s),通过PCR鉴定目标基因在rM.s中的表达。结果经PCR鉴定,成功将PCW-Der p2质粒转化到M.s。结论成功构建了以分泌方式表达外源蛋白的Der p2-rM.s。

论“视译”与“视译教学”

“视译”是翻译工作中一个重要而又新出现的翻译方式,它属于口译,但是也不同于一般以“听译”为主的口译。本文对“视译”的一些理论问题和实际应用问题,以及外语教学中“视译”教学问题进行探讨,指出视译不仅仅是口译中同声传译的一种方法,可广泛应用于交互传译和口译教学以及整个外语教学中,因此应该引起我们的高度重视,并给予其理论的探讨和研究。