奶牛乳房炎的病理机制及中药防治研究进展

奶牛乳房炎是由于乳房局部血液循环障碍导致免疫功能降低,无法完全抵御致病微生物的入侵及增殖而引发。在对本病治疗上中药以毒性低、无残留、不易产生耐药性等优点被广泛推崇。论文通过对奶牛乳房炎发病机制及多个治疗本病的中药组方进行分析,探讨中药治疗奶牛乳房炎的特点,为研制疗效好、使用方便的乳房炎中药治疗方剂及其临床应用提供帮助。

奶牛子宫免疫系统研究

由于产后奶牛子宫免疫系统容易受损并且普遍发生子宫内细菌感染,所以奶牛经常会发生子宫类疾病。世界各国奶牛子宫类疾病的发病率存在着很大的差异。子宫感染的发生取决于奶牛的免疫状态及入侵细菌种类及数量。了解奶牛子宫免疫系统组成及其调节有助于快速有效的诊断和治疗相关的子宫疾病。

奶牛产后急性子宫内膜炎病原的分离与鉴定

通过研究奶牛产后急性子宫内膜炎致病微生物组成,揭示该病主要病原并为临床治疗提供依据。以产后6～10 d急性化脓性卡他性子宫内膜炎患牛80头为研究对象,对子宫内容物进行细菌和真菌的分离鉴定。共分离到195株细菌及真菌,其中35.4%具有溶血性,50.8%对试验动物有致病性;大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分离率较高,为83.75%和62.5%,其次是奇异变形杆菌(36.25%)、白色念珠菌(20%)和肺炎克雷伯氏菌(17.5%)。该病的90%为混合感染,细菌混合感染(70%)主要由大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和奇异变形杆菌组成;真菌与细菌混合感染占20%,均有白色念珠菌存在;细菌单一感染占10%。结果表明,奶牛产后急性子宫内膜炎主要致病菌是大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、奇异变形杆菌,20%受试牛存在着以白色念珠菌为主的真菌感染。

应用套式PCR-DGGE分析诊断奶牛产后急性子宫内膜炎致病菌

摘要：通过对子宫内膜炎患牛子宫内致病菌进行分离鉴定，探讨奶牛急性子宫内膜炎的主要致病菌，建立一种快速诊断子宫内膜炎致病菌的方法，为临床治疗提供指导及依据。选用产后7～10d急性脓性子宫内膜炎患牛30头，通过套式PCR—DGGE分析细菌16SrDNA序列，检测子宫内致病菌感染情况，确定治病菌种类，并以传统的致病菌分离培养作为对照。结果表明：通过套式PCR—DGGE分析细菌16SrDNA序列，大肠杆菌感染率最高，其次是金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、粪肠球菌和肺炎克雷伯菌，此外还有停乳链球菌、无乳链球菌、多杀巴氏杆菌、蜡样芽孢杆菌。该病78％为混合感染，主要由大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌组成。奶牛产后急性子宫内膜炎主要致病菌为大肠杆菌．混合感染占有较大比例。

兽医临床诊断学PBL教学法的应用初探

将PBL(problem-based learning)教学法引入到兽医临床诊断实验教学中,使学生了解课前、课中、课后的学习任务,通过教师与学生在PBL教学法中的不同角色定位,对PBL教学法在兽医临床诊断实验教学中进行了有益的探索与尝试。

大肠杆菌引发奶牛子宫内膜炎的致病机制研究

为了探讨大肠杆菌引发的奶牛子宫内膜炎的致病机制,试验采用子宫灌注大肠杆菌菌液的方法引发典型的临床型子宫内膜炎,建立奶牛疾病模型;采用ELISA方法检测子宫内膜组织炎性因子的变化情况;应用qPCR和Western-blot技术从基因和蛋白水平分析TLR4及下游核转录因子的表达情况。结果表明:大肠杆菌刺激奶牛子宫可引发炎症,表现典型的临床症状;炎性因子水平明显升高,子宫内膜组织TLR4表达增多;TLR4下游NF-κB信号通路关键蛋白磷酸化表达增多。说明大肠杆菌可以引发临床型子宫内膜炎;机体通过TLR4对大肠杆菌进行识别,进一步激活NF-κB信号通路,从而导致TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性细胞因子表达增多。

产后子宫内膜炎患牛致病性真菌的研究

为探讨致病性真菌感染在奶牛子宫内膜炎中的作用,试验选用产后7～10 d子宫内膜炎患牛,通过真菌分离培养和套式PCR反应检测子宫真菌感染情况,并确定致病性真菌种类。结果表明:子宫内膜炎患牛真菌检出率一年四季均不同,春季为10.6%、夏季为15.2%、秋季为21.1%、冬季为18.1%,分离到的致病性真菌经鉴定为念珠球菌。说明部分子宫内膜炎患牛由致病性真菌引发,以秋冬两季真菌性子宫内膜炎发病率最高,致病性真菌主要为念珠球菌。

犬营养代谢病

宠物指人们精心饲养,以供玩赏愉悦的宠爱动物。目前犬类在我国宠物市场发展较为迅速,而且历史非常悠久,其他宠物的饲养规模、普及程度与犬类还相距较远。对国内犬临床疾病情况研究发现,近年来犬营养代谢性疾病发生率逐年升高,广大宠物医师对于此类疾病的关注程度日益加大。本文主要从犬营养代谢病的发病原因、临床较为先进的诊断方法、后期治疗饲养,三个方面进行对犬营养代谢病进行探讨,希望对于宠物市场在我国的发展、临床治疗此类疾病和宠物营养的科学搭配提供指导和帮助。

子宫内膜炎患牛子宫黏液内念珠菌的分离及体外溶血活性鉴定

本研究通过API20CAUX系统对从子宫内膜炎患牛子宫内黏液中分离到的183株念珠菌进行鉴定。结果显示克鲁斯念珠菌最多,为33.9%,其次是皱褶念珠菌为17.5%,乳酒念珠菌为13.1%,白色念珠菌为11.5%及热带念珠菌为8.7%。分离中不常见的有假丝酵母为5.5%,近平滑念珠菌为4.4%,吉利蒙念珠菌为3.3%,著名念珠菌为1.1%和光滑念珠菌为1.1%。此外,还对所分离到的念珠菌进行体外溶血活性检测,结果显示克鲁斯念珠菌、乳酒念珠菌、白色念珠菌、热带念珠菌、涎沫假丝念珠菌和光滑念珠菌在接种后48h后显示α和β溶血;皱褶念珠菌、吉利蒙念珠菌、著名念珠菌只显示α溶血;在孵育72h后,近平滑念珠菌不显示任何溶血活性。涎沫假丝酵母、白色念珠菌和乳酒念珠菌的β溶血活性比其他菌株高。本研究为临床牛真菌性子宫内膜炎的防治及发病机理的研究奠定了基础。

奶牛黏附分子MadCam-1基因的克隆及原核表达

原核表达MadCam-1基因、纯化MadCam-1黏附蛋白,并制备其多克隆抗体,为进一步功能研究奠定基础。根据MadCam-1的已知基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术扩增MadCam-1基因片段插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-MadCam-1,转化入E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导,对其产物进行SDS-PAGE分析和Western blotting鉴定,以纯化后的融合蛋白为抗原,免疫家兔,获得抗血清。结果表明,重组表达质粒pGEX-4T-1-MadCam-1经PCR及双酶切鉴定证明构建正确,测序结果与GenBank中登录的基因序列同源性为100%。表达产物经Western blotting鉴定,结果证实成功表达了分子质量约为50ku的蛋白质。纯化的蛋白质免疫家兔后,经ELISA检测多克隆抗体效价为1∶32000。因此,成功获得了奶牛MadCam-1多克隆抗体,为进一步研究奶牛黏附分子MadCam-1的功能奠定了基础。

子宫内膜细胞外基质研究进展

子宫内膜细胞外基质是维持子宫生物学功能的重要因素,其表达随生殖周期而发生周期性改变,当子宫患有疾病时子宫内膜细胞外基质表达异常;而其代谢受基质金属蛋白酶及其组织抑制物的调节,同时与卵巢激素密切相关。子宫内膜细胞外基质的表达情况能够反映子宫状态,并与子宫机能密切相关,使之成为目前研究热点之一。作者就子宫内膜细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的表达特点、代谢规律及其调节机制加以概述,并探讨其在奶牛子宫疾病中的作用。

呋喃烯啶制剂治疗母牛产后子宫内膜炎的试验

为了确定呋喃烯啶治疗奶牛子宫内膜炎的临床效果,试验以子宫灌注给药研究呋喃烯啶制剂的治疗效果,并对用药后的受孕率、受孕间隔进行检测。结果表明:呋喃烯啶制剂对大肠杆菌、奇异变形杆菌、绿脓杆菌、肠膜芽孢杆菌等主要致病菌高度敏感;试验组连续用药6 d即可痊愈,治愈率为96.5%,受孕率与对照组相比约提高10%,用药时间缩短2～3 d,平均空怀期缩短11～14 d。说明呋喃烯啶制剂对治疗母牛产后子宫内膜炎具有较好的效果。

TLR4在大肠杆菌引发的奶牛子宫内膜炎中的作用

大肠杆菌感染后发生子宫内膜炎的子宫内膜组织TLR4基因及蛋白表达明显增多,而且,促炎因子的合成和分泌也同时增多。进一步研究表明,大肠杆菌刺激后,NF-κB和I-κB蛋白磷酸化增加,促进I-κB与NF-κB蛋白的解离,从而减少其抑制作用;激活NF-κB的通路,NF-κB p65入核启动相关因子转录,大量炎性因子分泌。

产后子宫内膜炎病牛子宫内支原体的分离与鉴定

选用产后7～10d的急性脓性子宫内膜炎病牛和健康中国荷斯坦奶牛各20头,通过支原体分离培养、DNA荧光染色法及套式PCR方法,检测了子宫病料中支原体的感染情况,并确定了支原体种类,以探讨支原体感染在奶牛子宫内膜炎中的作用。结果显示,子宫内膜炎病牛子宫的支原体检出率为60%,其中45%发生子宫黏膜细胞感染;而健康组奶牛的检出率仅有10%,且无胞内感染发生;分离到的支原体经鉴定均为解脲支原体。表明子宫内膜炎病牛大部分伴随有子宫黏膜细胞内解脲支原体的感染,支原体的胞内感染影响子宫细胞机能,对子宫内膜炎的发生、发展具有促进作用。

呼吸系统疾患新生犊牛支原体感染监测

目的检测呼吸系统疾患新生牛犊支原体感染情况,研究犊牛呼吸系统支原体感染与母牛生殖道支原体感染的关系。方法利用培养基法、显微镜检查法、套式PCR等,对出生后有明显呼吸系统疾病症状的20头犊牛气管及肺内支原体感染情况进行检测,并以5头健康犊牛做作对照。结果 20头患病犊牛呼吸道内支原体检出率为70%,50%存在呼吸道黏膜细胞胞内感染;分离的支原体经鉴定为牛支原体、精氨酸支原体和人型支原体。结论呼吸系统疾患新生牛犊感染的支原体种类,与文献报道的从母体泌尿生殖道分离到的部分支原体相似,新生犊牛呼吸系统支原体感染与母牛泌尿生殖道支原体感染有密切关系。

一例马急性胃肠炎的诊断及治疗

马胃肠炎是胃肠黏膜深层组织剧烈炎性疾病的总称,是在各种致病因素的作用下,使胃肠黏膜发生不同程度的炎症变化,可以从表层发展到深层组织,从卡他性肠炎到出血性肠炎乃至坏死性肠炎。治疗主要以抑菌消炎、清肠止泻、调节酸碱和水盐平衡为原则。

仔猪去势不当造成的腹壁疝的治疗

腹壁疝是猪最常见的外科疾病之一,系由腹肌或腱膜破裂而引起的后天性疝,疝内容物绝大多数为肠管,初期可还纳,为可复性疝,后期由于肠管与肠管、相近腹膜、皮肤相粘连,或形成粪性封闭而演化为不可复性疝。此病多采用手术治疗。