新诗海

【点评】郭梦蕊同学的《春风》一诗短而精,且句句出彩。如“与春风撞个满怀…”多么形象生动的诗句!虽然没有直接描述春天的色彩,但随手抓一把,“便是一整个春天”,真是妙极!程果同学的《春》则是一幅恬淡水墨画。春的裙摆、春雨打在树梢、柳絮落在古老的小路、羞涩的蔷薇花爬上矮墙观察力很棒彩蝶“停在发黄的墙壁,影子绣上芳香”,一个绣字,多么富有动感的情趣啊!创作诗歌就是要有这种巧思和独特的想象画面,才能抓住春的神韵。

1.2倍基因组长度C2亚型HBV重组体的表达和多肽分析

目的获得乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)C2蛋白的HBV多肽。方法同源重组法构建含1.2倍HBVC2全基因组表达重组体;脂质体法转染HepG2和Huh-7细胞;荧光定量PCR法检测HBV DNA水平;双抗体夹心酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)的水平;免疫荧光法检测核心抗原(HBcAg)水平和分布。电转染法转染人永生化B淋巴细胞系(B-lymphoblastoid cell line,BLCL),液相色谱串联质谱(liquid chromatography-mass spectrography/mass spectrometry,LC-MS/MS)法分离鉴定HBV多肽,生物信息学预测亲合力,并检索已报道序列。结果成功构建了含3881 bp目的片段的HBVC2全基因组的重组体,即pAAV/HBV1.2C2。HepG2和Huh-7细胞转染重组体后24、48和72 h,培养上清液中HBV DNA、HBsAg和HBeAg均呈现较高水平;HBcAg多分布在细胞核,均在48 h表达水平达高峰。从5株BLCLs细胞裂解液中检出来源于HBsAg、HBeAg和HBcAg的HBV多肽(序列长度≥8aa)共95条。比较分析共同序列和包含或重叠(≥8aa)序列,67条多肽形成了11个HBV多肽热点核心区域,有92条已见报道。51(53.68%)条多肽有相应的人类白细胞表面抗原(human leukocyte antigen,HLA)等位基因分型,而与5株细胞所携带HLA等位基因一致的共有21条。结论成功构建和表达了pAAV/HBV1.2C2,获得了真实世界的HBVC2多肽谱。