电离辐射对小鼠脾细胞中调节性T细胞及其相关分子表达的影响

目的 观察不同剂量X射线照射后不同时间小鼠脾细胞中调节性T细胞和叉头状转录因子（Foxp3）的表达变化,探讨X射线对调节性T细胞以及相关因子Foxp3的影响.方法 112只雄性ICR小鼠,随机平均分为低剂量（0.075 Gy）组和高剂量（2 Gy）组,用X射线深部治疗机分别进行0.075和2 Gy全身照射,于照射后0、4、8、16、24、48和72 h处死,取脾脏,分别应用流式细胞术和RT-PCR法检测调节性T细胞和Foxp3的表达水平.结果 0.075和2 Gy X射线全身照射后,小鼠脾细胞CD4＋CD25＋Treg细胞百分比均在照射后8 h达高峰,随后一直保持较高水平,高于照射前水平（2 Gy,在8、16、48、72 h时,t=4.65、4.28、3.71、2.88,P＜0.05;0.075 Gy,在8、16、24、72 h时,t=8.73、10.55、4.21、4.65,P＜0.05）.Foxp3在mRNA水平,0.075 Gy照射后变化不明显,而2 Gy照射后于24 h形成峰值.Foxp3在蛋白质水平,0.075 Gy照射后并未有显著变化;而2 Gy照射后于16 h形成峰值,随后略有下降,但仍保持较高水平.结论 调节性T细胞及相关分子Foxp3的不同变化可能成为高、低剂量X射线诱导不同免疫效应的原因之一.

辐射诱导人外周血淋巴细胞DNA损伤反应相关基因表达变化的实验研究

目的采用实时定量PCR技术，检测人外周血淋巴细胞DNA损伤反应相关基因表达对x射线全身照射的反应，为探索新型辐射生物标志物奠定基础。方法以吸收剂量为0、1、2、3、4、5Gyx射线照射正常人外周血，在照射后4和24h，应用实时定量PCR法，对淋巴细胞细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制物蛋白1a（Cdknla）、生长阻滞和DNA损伤基因45ct（Gadd45ct）基因的表达变化进行检测。应用胞质分裂阻滞微核法（CB微核法），检测淋巴细胞微核率变化。结果Cdknla基因在人外周血淋巴细胞受到1-5Gy照射后4和24h，其相对表达量均较对照组显著性升高，至4Gy达到峰值，5Gy后不再继续增加。Cdknla基因表达与照射剂量呈线性相关（r=0.946、0.975，P〈0.05）。Gadd45ct基因在1-5 Gy照后4和24h，其相对表达量均呈剂量依赖性升高，且照射后4h的表达高于24h（r=0.936、0.797，P〈0.05）。CB微核法中，在1-5 Gy x射线照射后4和24h，各剂量组淋巴细胞微核率均显著增多，呈现良好的线性关系（r=0.990、0.984，P〈0.05）。结论辐射使Cdknla基因和Gadd45ct基因表达上调，表现出较好的剂量线性关系，有可能成为研制新型辐射生物剂量计的候选基因。

辐射对Jurkat细胞P21蛋白及ICR小鼠胸腺细胞p21基因表达的影响

目的探讨电离辐射对Jurkat细胞P21蛋白和ICR小鼠胸腺细胞p21基因表达的影响。方法采用流式细胞术（FCM），检测0、0．5、1．0、2．0、4．0及6.0GyX射线照射后Jurkat细胞中P21蛋白表达的变化。采用实时定量PCR技术，分别检测0、0．5、1．0、2．0、4．0及6．0GyX射线照射后4和24h小鼠胸腺及脾细胞中p21基因表达的变化。结果不同剂量x射线照射后12和24h，Jurkat细胞中P21蛋白表达在0.5-4.0Gy范围内均随剂量的增大而升高（t=-24.23～-3.96，P〈0.05），6Gy时均出现表达下降（t=-11.19、-14.50，P〈0.05）；与假照射组相比，在0～6.0Gy照射后4和24h，小鼠胸腺及脾细胞中p21基因的相对表达量均随剂量增大逐渐增加（t=-29.96～8.80，P〈0.05）；并于6.0Gy时达最高（t=-11.84-3.42，P〈0.05），仅胸腺细胞1Gy照射后4h除外（t=-3.42，P〉0.05）。结论x射线能诱导P21蛋白及基因表达增加，并在一定剂量范围内存在良好的剂量-效应关系。

微小RNA在电离辐射和肿瘤中的作用

MicroRNA（miRNA）是一类含21～25个核苷酸长度的单链小分子RNA，其在细胞生长和发育过程的调节中起到了多重作用．miRNA的突变或异位表达与多种肿瘤相关。电离辐射可以诱导miRNA的改变，从而产生致癌或抑癌效果，而且辐射诱导的miRNA表达变化还显示出细胞特异性和性别特异性。