玉米纹枯病菌中新减毒病毒RsHV4的特征研究

寻找立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)中新的弱毒病毒,为玉米纹枯病提供新的生物防治资源。采用dsRNA技术从玉米纹枯病菌菌株ZYFG11中发现一种新的病毒RsHV4(Rhizoctonia solani hypovirus4),通过基因组克隆、系统发育分析、菌株生长特性测定及致病性测定等试验,对新病毒RsHV4的分类地位、减毒活性等生物学特征进行测定。结果表明,RsHV4的基因组全长为18702 nt,编码一个含5540个氨基酸的多聚蛋白(Polyprotein);系统发育分析显示,RsHV4与减毒病毒科(Hypoviridae)θ-减毒病毒属(Thetahypovirus)病毒聚为一支,其编码的蛋白质与该属的Sclerotium rolfsii hypovirus 1编码的蛋白质同源性最高,为59.46%;立枯丝核菌正常菌株JSJH6与含毒菌株ZYFG11的菌丝生长速度分别为0.50cm/d和0.41 cm/d,菌核大量形成的时间分别为培养5 d和7 d,培养10 d时50颗最大菌核的总质量分别为0.27 g和0.11 g,显示含毒菌株ZYFG11的菌丝生长速度减慢、菌核形成时间延迟、菌核体积和质量变小;接种到玉米植株2周后,接种含毒菌株ZYFG11的玉米植株第2叶鞘病斑面积占30%、第3叶鞘病斑面积占10%,接种无毒菌株JSJH6的植株第2叶鞘和第3叶鞘病斑面积达100%,说明含毒菌株ZYFG11的致病力显著降低。综上,在玉米纹枯病菌中发现了一种新的减毒病毒RsHV4,能够影响寄主真菌的生物学特征和致病力,为玉米纹枯病的防治提供了潜在的病毒资源。

一种简单快速的食用菌病毒dsRNA提取方法

食用菌病毒病一直是食用菌生产的重要问题,明显影响产量和质量。已发现的食用菌病毒很多为dsRNA病毒,因此dsRNA病毒的研究对于食用菌生产非常重要。发展一种简单快速的食用菌病毒dsRNA的提取方法,该法优化了传统提取方法的步骤和对样品数量的要求,可以从0.5～1.0 g的食用菌组织中快速提取dsRNA,提取效率较传统方法高,提取产物可以直接应用于进行dsRNA的检测、分类以及相关基因的克隆。

双链RNA快速小量提取法在水稻dsRNA病毒病诊断中的应用

水稻病毒病是水稻生产中重要的病害，目前国内流行的水稻病毒病病原多为 dsRNA病毒，每一种dsRNA病毒都有特异性基因图谱，为此，探讨了双链RNA快速小量提取法在水稻dsRNA病毒病诊断中的应用。结果表明：1）双链RNA快速小量提取法可以从0．5～0．8 g的水稻组织中快速提取 dsRNA，在3 h内完成对样品的鉴定，提取产物可以直接应用于dsRNA的检测、分类以及相关基因的克隆；2）提取效率较传统方法高，以 SRBSDV为例，传统 dsRNA提取方法中 dsRNA的产率为0．15～0．3μg/g，该方法中dsRNA的产率茎组织达到3μg/g以上，叶组织0．1～0．5μg/g；3）该方法也可以应用于介体体内的dsRNA病毒基因组核酸的提取。

应用型本科院校仪器分析实验教学的探索与实践

仪器分析实验课是化学相关专业必修的专业基础实验课之一。综合我系应用型本科专业的仪器分析实验教学实际,结合在教学中的体会,从学生"主体"意识的培养、合理的实验内容的设置、多元化的实验教学以及加强现代教育技术的应用四个方面来论述了在提高仪器分析实验教学效果中的探索与实践。

简单快速的多糖植物双生病毒核酸提取方法

以朱槿曲叶病毒病株为材料,结合总DNA提取的CTAB法和质粒提取的离心柱方法,发展一种简单快速的多糖植物双生病毒基因组核酸的提取方法,用聚合酶链式反应(PCR)和实时定量PCR予以验证。结果显示:与目前的2种常用方法相比,改进的方法在灵敏度、时间、价格和产率上都具有一定的优势,更适合于双生病毒基因组核酸的提取和检测应用。

基础化学实验教学改革的探索与实践

本文结合独立学院基础化学实验教学中存在的问题,从实验教学过程和实验成绩评定两个方面对基础化学实验教学进行了改革与实践,旨在强化学生主体地位,提高学生实践动手能力,提升基础化学实验课程教学效果。

应用型本科院校仪器分析设计性实验的探索与实践——以食品中亚硝酸盐含量的测定为例

文章分析了"食品中亚硝酸盐含量的测定"的实验过程,阐述了开设仪器分析计性实验对于拓大学生知识面、提高学生的查阅文献和获取信息的能力、加深学生对仪器分析各原理的理解、培养学生分析和解决问题的能力、强化学生的实验技能等各方面的积极意义。

高校有机化学实验绿色化改进方法的研究与实践

许多传统的有机化学实验内容存在毒性大、腐蚀性强、污染严重等问题,因此,开展相关实验项目的绿色化改进是十分必要的。通过从实验试剂、实验规模、实验过程等方面着手,对一些危害性较大的实验内容进行绿色化改进,既减轻了实验过程对环境的伤害,同时有利于培养学生的绿色化学意识,提高学生的实践创新能力。

农学类专业“三段式”实践教学模式的探索与实践研究

长江大学农学院对实践教学进行了大胆改革,采用"三段式"实践教学模式,较好地解决了教学与生产、教学与社会脱节的问题,提高了教学效果,拓宽了学生视野,增强了学生实践能力,得到学生、学校、社会的一致认可。

独立学院《仪器分析》教学思考与改革初探

《仪器分析》课程作为涉化专业的一门重要基础课,在环境、生物和商品检验等领域应用十分广泛。本文结合教学实际,阐述了深化教学改革,提高教学质量的系列措施。

湖北省江陵县马铃薯黄萎矮化病病原鉴定

湖北省江陵县马铃薯种植过程中发生严重的黄萎矮化病，造成了马铃薯产量的巨大损失，通过症状描述、电镜观察、RT—PCR检测对其病原进行初步检测和分析，以期为研究该病害的防控方法提供依据。结果显示：病组织保湿培养48h无异味，无菌丝和茵脓产生。检测样品的根组织内均大量存在2种病毒颗粒，一种为线状病毒，有3种大小不同的粒体，即（12～14）nm×（450～600）nm、（12～14）nm×（700～900）nm、（12～14）nm×（1500～2000）nm；另一种为杆状病毒，有2种大小不同的粒体，即（24～30）nm×（300～500）nm、（24～27）nm×（1000～1300）nm。RT—PCR和序列分析表明，线状病毒为马铃薯Y病毒（potato virus Y，PVY），杆状病毒归属还有待于进一步研究。结合试验结果和相关报道，初步认为湖北省江陵县马铃薯黄萎矮化病是由马铃薯Y病毒（和未知杆状病毒）侵染引起的。

植物生产类专业微生物实验教学的改革与实践

以长江大学植物生产类专业连续3届学生为实施对象,结合科研与教学实际,进行了微生物实验教学的改革与实践,即将设计性实验的思路、方案引入实验过程中,将分散的几个实验整合和优化成一个综合性设计性的实验整体,构建了适合于大类培养条件下的科学的设计性实验教学体系。实验教学改革激发了学生兴趣,有效地训练了学生的科研思维,培养了学生的实践能力与创新能力。

试论科学发展对教学模式改革的影响

科学的发展对教育教学的影响很大,它能迅速地改变原有教育的结构和内容,使教育教学适应时代发展的要求。研究科学发展对教学模式改革的影响,掌握它们之间的内在联系,有助于使新课程教学改革更全面地深刻地反映科学迅速发展的要求,对当代教学理论研究有着重要的理论意义和实践意义。

独立院校“仪器分析”课程教学组织与设计探讨

仪器分析课是面向化工类相关专业开设的重要专业课程。为提高教学效果,培养学生对综合知识的运用能力,结合课程学时相对较少的实际情况,对教学内容进行了优化处理;对教学中的组织与设计进行了改革和探索,提高了教学水平和质量。

北京地区枸杞白粉病病原菌的鉴定

为鉴定北京地区枸杞(Lycium chinense Mill)白粉病的病原,采用形态学对其病原菌有性世代闭囊壳形态进行显微观察,同时利用分子生物学方法克隆其rDNA ITS序列,在此基础上构建进化树,并分析其亲缘关系。结果表明,该白粉菌闭囊壳直径110.5~168.4μm,附属丝较多并生于闭囊壳的“赤道”部位,长度为60.4~220.4μm,其顶端1~3次二叉或三叉状分支;BLASTn显示其ITS序列(MG757562.1)与GenBank中的穆氏节丝壳(Arthrocladiella mougeotii(Lév.)Vassilk)的ITS序列同源性大于99.8%,而与其他白粉菌ITS序列的同源性小于91.0%;进化分析显示其与穆氏节丝壳中国菌株(JX546296.1、KP420475.1)、日本菌株(AB022380.1)、韩国菌株(AF455748.1)、土耳其菌株(KX017568.1)、澳大利亚菌株(AF073358.1)聚为一支,亲缘关系最近。因此,引起北京地区枸杞白粉病的病原菌鉴定为节丝壳属(Arthrocladiella)的穆氏节丝壳(A.mougeotii)。

植保专业植病学科教学、实践体系改革的探索研究

总结了长江大学农学院植保专业植病学科教学改革的实践,包括了课程体系、教学内容、授课方式、生产毕业实习等方面。经过系统改革,建立了初步完善的植物病理学科教学实践体系,突出了植物病理学科的理论性和实践性,较好地解决了教学与生产实际脱节的问题。

地方综合性高校全日制农业硕士实践能力培养体系的探索

专业硕士教育旨在培养高层次复合应用型创新人才,在服务区域经济和社会发展中发挥着重要作用,其人才培养的核心在于实践环节。该文以地方综合性高校长江大学资源利用与植物保护领域植物保护方向全日制农业硕士培养为例,阐述地方综合性高校全日制农业硕士实践能力培养体系存在的问题、采取的改革措施、解决思路与发展成效,以期为提高同类高校全日制农业硕士研究生的人才培养提供参考。

双链RNA病毒定量分析的影响因素研究

以水稻双链RNA(dsRNA病毒)为例,研究了2种总RNA提取方法(Trizol法和柱层析法)以及寄主DNA污染对dsRNA病毒定量分析的影响。结果显示,2种总RNA提取方法中,Trizol法的dsRNA损失比率较大,不能应用于dsRNA病毒的定量分析;无论DNase I处理与否,提取的总RNA样品中普遍存在DNA污染。对于真核生物而言,通过设计跨内参基因内含子的引物可以有效地克服寄主DNA污染对定量分析的影响。

湖北甘薯病毒病的检测与鉴定

2013—2015年采集了湖北黄冈、鄂州、武汉、荆州以及宜昌等5个地区的甘薯病毒病样品,通过双生病毒通用引物PCR扩增、ds RNA技术和序列分析等方法,鉴定了这5个地区甘薯病毒病的病原。结果显示,甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)、甘薯褪绿矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和甘薯卷叶病毒(Sweet potato leaf curl Georgia virus,SPLCGV)等4种病毒被检出。其中,SPFMV SPLCGV这两种病毒在湖北皆为首次报道。

南方水稻黑条矮缩病毒的快速检测

南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)病原鉴定和介体带毒率检测是病害防治的前提条件。本研究分别建立了病株dsRNA基因组鉴定法和介体带毒率测定的斑点杂交法。结果显示:dsRNA基因组鉴定法可以从0.5 g水稻病株组织中快速检测到SRBSDV,不需要经过RT-PCR过程,具有快速简便等特点;斑点杂交法检测介体昆虫白背飞虱带毒率的灵敏度较高,单头带毒介体的总RNA稀释1 000倍后依然可以检测到病毒,并且可以大批量处理样品,用于病害流行研究和测报。