颜德馨运用黄连经验

黄连味苦寒,归心、脾、胃、胆、大肠经,功能清热燥湿,泻火解毒。国医大师颜德馨教授取黄连苦能燥湿,寒可清热,在诸多疾病中加以配伍使用,既清瘀热,又化痰湿,尚可健脾胃,临床可用以泻心火而直折上炎之肝火,清心平肝降血压;对于消渴,颜老提出"脾胰同源"之说,倡导消渴病从脾论治,药用黄连可泻热运脾止消渴;而心率失常,颜老认为总责之阳微阴弦,用药宜温中有通、温中有清,以桂枝伍黄连,可有清心化痰复脉律之效;治疗失眠,黄连堪当大任,与它药配伍,显得灵活与实用。

一种简易的超薄切片染色器

本文介绍了一种简易的超薄切片染色器的制作和使用方法。各实验室都有制作比染色器所需的材料,其制作和使用方法简单。可进行铀、铅单、双重染色。染色效果良好。在透射电镜生物样品超薄切片染色(尤其铅染)过程中,往往由于CO_2的影响,常在超薄切片上产生碳酸铅沉淀,使切片受到污染,影响观察,严重时无法观察使之前功尽弃。我们参考LKB2160型染色机的工作原理和染色过程,结合工作中的实践,自制了一种简易的染色器,可进行铀、铅单、双重染色。使用此染色器,可使超薄切片的染色达到防污染、规格化、省时间的效果。现将其制作及使用方法介绍如下:

风药在妇科疾病中的运用

根据风药特性,阐明其升发脾胃清气而治泄泻、子宫脱垂等脾不固摄的疾病,疏邪达表而治经期身痛、头痛,透达气机而舒解肝郁,又具祛湿止带、活血化瘀、引经报使等多种功效。指出灵活配伍风药治疗各种妇科疾病确能提高临床疗效。

人精子2种扫描电镜样品制备方法的比较

目的:比较人精子2种扫描电镜样品制备方法的效果。方法:10例精液标本,同一例标本分别采用扫描电镜一般样品制备程序(方法A,A组)和本实验室方法(方法B,B组)处理。方法:B组减少了固定后洗涤精子、脱水和醋酸异戊脂置换的时间,增加了多级乙醇浓度梯度。观察2组开裂精子率的差别。结果:应用2种标本制备程序处理的各例标本,均可观察到开裂或断裂的精子。裂开部位可发生在精子头部、颈部或尾部,以发生在头部为多见,其次为颈部。A组的开裂精子率为28.9±16.2%,B组的为14.1±7.7%,B组的显著少于A组(P<0.01)。结论:方法B的程序更适合于人精子标本的制备,可减少精子表面的开裂或结构断裂,有利于人精子超微形态学观察。

铅污染的超薄切片简易处理法

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桂枝汤、麻黄汤方证异同新解

从主症病机、药后调护、禁忌证等方面对桂枝汤与麻黄汤进行辨析,并从致病邪气、营分卫分、类方、相关脏腑等方面阐述了对两方证的新认识,对临床应用有指导意义。

小鼠血吸虫病肝纤维化的超微结构动态观察

目的 研究血吸虫病小鼠肝纤维化过程中几种相关细胞和肝组织超微结构动态变化 ,以探讨血吸虫病肝纤维化的可能机制。 方法 日本血吸虫尾蚴经皮肤感染小鼠建立血吸虫病肝纤维化模型。常规方法制作肝组织透射电镜标本并观察。常规 HE染色观察其病理变化。 结果 HE染色显示小鼠血吸虫病肝纤维化模型建立成功。电镜观察显示小鼠感染后 6 wk,急性肉芽肿周围的肝细胞发生坏死 ,肝窦内皮细胞窗孔减少 ,贮脂细胞 (FSC)脂滴减少 ,枯否细胞胞浆出现大吞噬体和粗面内质网。 8wk时部分肝细胞发生脂肪变性 ,少数肝细胞间隙增宽 ,间面出现微绒毛。肝窦周隙内充满大量胶原纤维 ,并形成肝窦毛细血管化。FSC胞浆出现含胶原原纤维的分泌泡 ,周围见大量胶原纤维。枯否细胞粗面内质网增加。 10 wk时 FSC转变为肌成纤维细胞。 12 wk时肌成纤维细胞减少 ,成纤维细胞和纤维细胞增加。 结论 FSC被激活转化为肌成纤维细胞是血吸虫病肝纤维化发生的关键环节 ,激活的枯否细胞、损伤的肝细胞和肝窦内皮细胞与 FSC的活化密切相关 ,肝窦毛细血管化可能加速肝纤维化的发展。

WalK(S221P)突变促进金黄色葡萄球菌荚膜产生的作用研究

目的探究WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用及可能机制。方法采用转录组测序(RNA-seq)分析WalK(S221P)突变对金葡菌基因表达的影响,采用RT-qPCR检测荚膜合成基因的表达变化。利用荚膜染色和透射电镜观察确认WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用,再用RT-qPCR筛选参与介导WalK(S221P)促进荚膜合成的调控分子,通过结合位点分析和凝胶迁移阻滞实验(EMSA)证实WalKR对目标分子的调控作用。结果RNA-seq分析显示WalK(S221P)突变对196个金葡菌基因的表达水平影响显著,其中16个荚膜合成操纵子基因在XN108中的表达均显著上调。RT-qPCR检测显示荚膜合成相关capA,capH和capK在含有WalK(S221P)突变的XN108及K-Newman菌株中分别较回复株XN108-R和野生型Newman菌株显著上调。荚膜染色和透射电镜观察显示XN108的荚膜合成相比于回复株XN108-R明显增多,增厚。RT-qPCR筛选提示WalK(S221P)促进金葡菌荚膜合成可能是通过上调MgrA表达水平实现的,结合位点检索分析及EMSA实验证实WalK激活的WalR具有直接结合mgrA基因调控区的功能。结论金葡菌WalK(S221P)突变具有促进金葡菌荚膜产生的作用,该作用的发挥可能通过上调MgrA的表达而实现。

金水六君煎对老年小鼠气管粘膜影响的研究

研究金水六君煎对老年小鼠气管气膜的影响。方法：用金水六君煎为老年鼠灌胃，取小鼠气管，在扫描电镜下观察气管内粘膜及纤毛的情况。结果：与对照组比较，金水六君煎组老年小鼠气管内粘膜上皮及纤毛脱落，纤毛倒状、粘连轻于对照组。结论：金水六君煎可防止老年小鼠气管内粘膜上皮及纤毛的脱落。

糖尿病早期角膜组织的超微变化

目的 :了解早期糖尿病角膜组织的超微变化 ,探讨糖尿病角膜病变的发病机制。方法 :选取SD雄性大鼠 4 0只 ,随机分为糖尿病组和正常对照组 ,前者以链脲佐菌素诱导成糖尿病模型。分别于 6、8、10、12周取角膜 ,扫描电镜及透射电镜下观察其超微改变。结果 :各个观察时点糖尿病大鼠角膜上皮和内皮细胞水肿 ,胞浆内线粒体增多和肿胀 ,随着病程进度而明显 ;角膜内皮的破坏从周边开始 ,逐渐向中央发展 ;成模后第 10周开始出现基质层胶原纤维排列紊乱 ,部分呈格子状排列 ,有断裂现象。结论 :糖尿病性角膜病变超微结构的改变导致了角膜功能异常 ,这可能与高血糖时物质代谢异常有关。

多囊卵巢综合征患者卵泡基底膜超微结构的研究

运用透射电镜观察多囊卵巢综合征(PCOS)组及正常妇女组卵泡的形态,用体视学方法测量两组各级卵泡基底膜的厚度。结果显示:两组原始卵泡的基底膜厚度相似,但随着卵泡的发育卵泡基底膜逐渐增厚,PCOS组增厚更明显,对照组初级卵泡基底膜的平均厚度是0 293±0 204μm,PCOS组是0 463±0 287μm,两组比较有统计学差异(P<0 05)。对照组次级卵泡基底膜的平均厚度为0 542±0 298μm,PCOS组为1 234±0 345μm,两组比较有统计学差异(P<0 05)。两组原始卵泡的前颗粒细胞的超微结构相似,随着卵泡的发育,PCOS组的颗粒细胞内参与蛋白质合成的细胞器明显较对照组丰富;正常组窦前卵泡的颗粒细胞出现分化现象,PCOS组却未见分化现象。结果提示:PCOS患者卵泡基底膜屏障的增厚可能使卵泡刺激素FSH进入卵泡困难,颗粒细胞不能正常分化,"FSH 颗粒细胞轴"功能低下,导致不孕症。

链脲霉素实验性大鼠妊娠糖尿病对子鼠心肌细胞超微结构的影响

目的:通过研究链脲霉素(streptozotoc in,STZ)实验性大鼠妊娠糖尿病对子鼠在不同孕期心肌细胞超微结构的影响,探讨妊娠糖尿病致胎儿心脏发育异常的发生机制。方法:将54只SD孕鼠分为STZ注射组(30只)和柠檬酸缓冲液注射组(24只)作对照观察,按取材时孕龄不同将两组又分为第13、16和19天3个亚组。对STZ注射组孕鼠,给予新配质量分数为2%STZ溶液,按STZ 40 mg/kg,一次性腹腔注射,3 d后空腹尾静脉采血监测血糖,并测尿糖、体质量。对照组用同样方法注射等量的柠檬酸钠缓冲液。孕鼠于孕龄第13、16、19天随机分批剖宫,取子鼠心脏组织做超微结构观察。结果:STZ注射组子鼠心肌细胞超微结构可见不同程度病理变化:细胞间连接较少、间隙宽窄不一,肌束排列不规整,胞膜结构不完整;胞质电子密度较高,线粒体肿胀呈空泡状气球样变,嵴减少,粗面内质网减少、扩张,可见脂质样小滴;胞核大小不一,不规则圆形,核膜结构不清,核染色质分布不均,可见异染色质;胞外基质可见有胶原纤维排列成束状,毛细血管腔外可见红细胞,有细胞器崩解痕迹。结论:STZ实验性大鼠妊娠糖尿病可致子鼠心肌发生超微结构的异常改变,可能为糖尿病母亲致儿心脏畸形的病理基础。

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠血管病变的保护作用

目的:探讨银杏叶提取物EGB50对高糖高脂诱导的2型糖尿病大鼠主动脉病变的干预作用。方法:应用荧光分光光度法、放射免疫法、透射电镜等技术等研究糖尿病(DM)大鼠血糖、血清胰岛素、血脂、晚期糖基化终产物(AGEs)的含量和血管超微结构变化。结果:DM组血清甘油三酯、胆固醇、AGEs、空腹血糖、糖化血红蛋白含量明显升高,空腹胰岛素水平显著下降。灌胃给药5周后,EGB50 150mg/kg组血清甘油三酯、胆固醇、糖化血红蛋白、AGEs含量明显比DM组降低,但空腹血糖、胰岛素变化不明显。电镜发现DM组血管组织出现明显改变,其内皮细胞胞浆中空泡增多,线粒体肿胀,可看到单核细胞黏附于内皮上;平滑肌细胞的线粒体、粗面内质网增多;EGB50 150mg/kg组则病变明显有所改善。结论:银杏叶提取物EGB50能降低糖尿病大鼠血脂、糖基化产物的含量,减轻血管内皮细胞的损伤,从而延缓及改善血管病变。

米非司酮对人中期妊娠胎盘超微结构的影响

目的：研究米非司酮对人中期妊娠胎盘超微结构的影响。方法：运用电子显微镜对８ 例１７ ～１９ 孕周水囊引产的孕妇引产前６ ｈ 空腹服用米非司酮１５０ ｍｇ ，胎盘娩出后进行超微结构的研究，并与同期１７ ～１９ 孕周水囊引产胎盘标本８ 例对照。结果： 与对照组相比，米非司酮组功能活跃的合体滋养细胞表现不同程度的退行性变，细胞滋养细胞变化不明显，绒毛间质毛细血管部分内皮细胞变性。结论：米非司酮对中期妊娠胎盘组织具有损伤作用，提示米非司酮用于足月妊娠引产的安全性有待进一步探讨。

一例Citrin缺陷病患儿棘形红细胞的扫描电镜观察

目的:探讨Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)红细胞形态变化。方法:抽取一例NICCD患儿治疗前和治疗后的静脉血作为研究对象,应用扫描电镜和透射电镜观察红细胞的超微结构。结果:在扫描电镜下,该NICCD患者治疗前正常红细胞数百分比仅为1.4%,而棘形红细胞高达红细胞总数的95.6%,其它异形红细胞为3.2%。治疗后,视野内几乎均为正常红细胞,偶见棘形红细胞。在透射电镜下,治疗前红细胞膜表面有棘状突起,治疗后红细胞膜表面光滑,大部分红细胞切面呈棒状。结论:该例NICCD患儿治疗前棘形红细胞显著增加,治疗后红细胞形态恢复为双凹圆盘形,提示红细胞超微结构改变。可作为Citrin缺陷病的临床病理诊断辅助指征。

轻度子宫内膜异位症患者的腹腔液对精子运动及超微结构的影响

目的:观察轻度子宫内膜异位症(EM)不孕患者的腹腔液对精子运动及超微结构的影响。方法:经过处理的精子在体外分别和轻度EM不孕患者、正常妇女的腹腔液及精子培养液孵育5小时,观察其运动参数及超微结构的变化;酶联免疫法测量EM腹腔液肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:EM组腹腔液TNF-α含量高于正常妇女(P<0.05);EM组精子平均直线速度(VSL)、平均曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)、快速直线运动精子活率(MOT)4项运动指标均低于正常组和培养液组(P<0.05),与TNF-α含量呈负相关(P<0.05),EM组精子头部、顶体及尾部主段胞质肿胀、胞膜破损,而孵育前及孵育后另外两组精子结构无改变。结论:轻度EM不孕患者腹腔液TNF-α值升高,经体外观察腹腔液对精子运动及精子形态学均有损害作用,推测这些可能是EM患者不孕的原因之一。

诊断超声波对人中孕胎儿大脑皮质神经细胞超微结构影响的初步研究

目的:研究诊断B超定点扫描是否对人中孕胎儿大脑皮质神经细胞超微结构造成影响。方法:将8名健康因避孕失败而自愿要求引产的单胎中孕妊娠(18～25周)的妇女随机分成两组,每组各4例,行水囊引产术:对照组在引产前不作B超扫描;实验组在引产前30min用频率3 5MHz70%的输出B超(I-SPTA=124 1mW/cm2)经孕妇腹部定点扫描胎儿大脑颞叶皮质10min,引产术后胎儿娩出即取大脑颞叶皮质作透射电镜标本的常规制备与观察。结果:与对照组相比,B超定点扫描10min,胎儿大脑皮质神经细胞的主要变化:(1)细胞核染色质分布不均,成团块状浓缩或边聚;(2)核周质(胞质)内糖原与游离核糖体稀疏;(3)部分线粒体肿胀,呈空泡化;(4)次级溶酶体多见。结论:B超定点扫描10min,胎儿大脑皮质细胞开始有变性改变,由于受损神经细胞不易再生,因此,B超用于产前胎儿颅脑检查尤其早、中孕检查时不应超过10min为宜。

一例肝衰竭婴儿外周血红细胞超微结构改变的电镜观察

目的:观察肝衰竭婴儿红细胞形态的超微结构变化。方法:采集一例肝衰竭婴儿的静脉血,制作扫描电镜和透射电镜样品观察红细胞的超微结构。结果:在扫描电镜下,该婴儿正常双凹圆盘形红细胞数百分比仅为2.5%,而泪滴形、靶形、口形、网织红细胞、刺形、棘形和椭圆形等多种异常形态的红细胞却高达红细胞总数的97.5%。在透射电镜下,网织红细胞和少数成熟红细胞切面具有棒状突起,突起分枝或不分枝,甚至形成了高度曲折凹陷的迷宫图形。结论:该例肝衰竭婴儿红细胞形态从外形到内部超微结构均有显著改变,提示红细胞形态多样性可能与病情复杂和严重程度有关。

颜德馨运用黄连温胆汤验案举隅

颜德馨教授善用黄连温胆汤治疗临床杂病,文章介绍颜德馨教授运用黄连温胆汤治疗失眠、痴呆、心律失常和脑出血后遗症等4个验案,予以分析,示用药特点,总结临证准确选用黄连温胆汤的辨证要点。