BCR-ABL融合基因检测在慢性粒细胞白血病诊断中的价值

目的:探讨BCR-ABL融合基因检测对慢性粒细胞白血病(CML)鉴别、诊断的价值,以及对慢性粒细胞白血病各个病程(慢性期、加速期与急变期)进行监测的临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR方法对临床常见骨髓增殖性肿瘤(慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症和原发性血小板增多症)患者标本进行BCR-ABL融合基因的定量检测。结果:慢性粒细胞白血病初发患者中,BCR-ABL融合基因水平均阳性,而真性红细胞增多症和原发性血小板增多症均为阴性。在CML患者中,初发患者与加速期和急变期的患者相比,白细胞计数、血红蛋白含量和血小板计数的差异具统计学意义,P值分别为0.046、0.039和0.001,而BCR-ABL融合基因水平的差异无统计学意义;初发与缓解后患者的BCR-ABL融合基因水平相比,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:BCR-ABL融合基因检测可以对CML与临床常见骨髓增殖性肿瘤做鉴别诊断,并对其病程进行监测,是一个有价值的指标,可为临床用药提供依据。

融合基因在急性髓系白血病中的检测及临床意义

目的:通过检测初发和缓解急性髓系白血病(AML)患者的融合基因,分析融合基因对AML患者诊断、病程监测及预后评估的意义。方法:选取江苏大学附属人民医院2016年1月—2022年1月确诊为AML的患者标本105例,对AML患者标本进行白血病相关融合基因检测,留取骨髓血5 mL,应用多重RT-PCR法,部分阳性融合基因采用RQ-PCR法。结果:90例初发患者中,63.33%的患者出现融合基因,其中HOX11融合基因阳性率最高(26.67%);3例出现复合型融合基因,其中,2例患者同时出现AML1-ETO和HOX11融合基因,阳性率为2.22%;1例患者同时出现HOX11和MLL-AF10融合基因,阳性率为1.11%;M3患者均检出PML-RARa融合基因。9例缓解患者融合基因水平与初发时相对含量相比,差异具有统计学意义(P=0.0039)。当患者出现病情反复时,其融合基因水平也随病情变化。结论:本研究通过对初发及缓解AML患者的相关融合基因检测,发现融合基因的检测对AML患者诊断、病程监测及预后评估具有较好的临床意义。

血清抗环瓜氨酸肽抗体检测诊断类风湿关节炎的意义

目的研究血清抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)在类风湿关节炎(RA)诊断中的意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测64例RA患者和42例非RA患者血清中抗CCP抗体的含量。结果 64例RA患者中,抗CCP抗体阳性50例,诊断敏感性为78%,特异性为90%。类风湿因子(RF)阳性51例,诊断敏感性为80%,特异性为71%。抗CCP抗体和RF两者敏感性比较无显著性差异,特异性比较有显著性差异(P<0.05)。结论抗CCP抗体的诊断敏感性与RF比较无显著性差异,但其诊断特异性较RF高,有助于提高类风湿关节炎的诊断率。

单纯放疗与同期放化疗治疗食管癌的效果比较

目的比较单纯放疗和同期放化疗治疗食管癌的疗效及不良反应。方法 67例符合条件的食管癌患者随机分为单放组（30例,单纯放疗）和同期放化疗组（37例,同期放化疗）。放疗方法采用CT扫描定位,ACQ Planning System计划系统设计治疗计划,直线加速器6-MV X线外照射,常规分割,5次/周,2 Gy/次。总剂量：同期放化疗组DT 50 Gy,单放组DT 66-70 Gy。化疗：PF方案,DDP 75 mg/m^2第1天＋5-FU 600 mg/m^2第2-5天,于放疗开始第1、4、7和10周应用,共4个周期。观察两种治疗方法的不良反应、近期疗效和生存率差异。结果同期放化疗组的胃肠反应和骨髓抑制发生率明显高于单放组,差异有统计学意义（P=0.015）,放射性食管炎发生率基本相似（P=1.000）;治疗结束时的有效率同期放化疗组89.2%比单放组73.3%高,但差异无统计学意义;1、3、5年生存率单放组和同期放化疗组分别为58.8%、20.8%、13.8%和81.1%、45.9%、32.4%,差异有统计学意义（P=0.017）。单放组和同期放化疗组的局部失败分别为19例（19/30）和12例（12/37）,差异有统计学意义（χ^2=6.815,P=0.009）。结论同期放化疗治疗非手术食管癌比单纯放疗好,能提高局部控制及生存率,改善预后;不良反应较轻,可以耐受。

N0期鼻咽癌上半颈预防照射的长期随访结果

背景与目的:对N0期鼻咽癌患者的颈部预防照射,照射范围必须包括全颈还是上半颈,目前还存在争议。本研究的目的是通过回顾性分析评价N0期鼻咽癌半颈照射的合理性。方法:回顾性分析432例N0期鼻咽癌患者半颈预防照射颈部长期控制结果及相关因素。全部患者均接受根治性放疗,鼻咽中位剂量DT70Gy;颈部治疗范围只包括双侧上半颈,治疗中位剂量DT50Gy。Kaplan-Meier法计算相关生存率、颈部复发率,log-rank检验对颈部复发率差异进行分析,Cox比例风险模型进行多因素分析。结果:共有17例患者治疗后发生颈部淋巴结转移,颈部5年控制率96.06%;其中6例患者同时合并鼻咽部复发,11例单纯颈部复发。单纯野内和野外复发率分别为0.93%(4/432)和1.62%(7/432),两者差异无统计学意义(P=0.937)。63例患者有鼻咽复发,有鼻咽复发者的颈部复发率为9.52%(6/63),明显高于无鼻咽复发者的2.98%(11/371),两者差异有统计学意义(P=0.002)。多因素分析显示鼻咽复发是影响颈部控制的独立预后因素。结论:N0期鼻咽癌患者放射治疗后颈部复发率很低,颈部预防照射范围仅包括双上颈是合理的。

不同放疗剂量同期化疗治疗不能手术食管癌的临床分析

目的：观察不同放疗剂量同期化疗治疗不能手术食管癌的临床效果。方法：回顾性分析2005年5月1日至2007年6月31日,我科收治的可分析的初治食管癌患者的临床结果,全组共78例,根据不同放疗剂量分为高剂量组（DT〉50 Gy,平均64 Gy）和低剂量组（DT 50 Gy）,其中低剂量组43例,高剂量组35例。化疗主要采用PF方案,DDP 75 mg/m2 d1＋5-FU 500~600 mg/m2 d2~5,于放疗开始第1、28、49、70天应用,共2~4周期。比较两组患者的近期疗效、毒副反应以及生存率情况。结果 ：高剂量组的完全缓解率和有效率与低剂量组相比无统计学差异（P=0.861）。高剂量组和低剂量组的1、3、5年生存率分别为71.4%、34.3%、25.7%和76.7%、41.9%、30.2%,中位生存期分别是19个月和22个月,两者差异无统计学意义（P=0.661）。高剂量组3、4度骨髓抑制较低剂量组发生率高,但差异无统计学意义;3、4级放射性食管炎高剂量组较低剂量组明显,差异有统计学意义（P=0.040）。结论：放疗合并同期化疗治疗食管癌时,低剂量（50 Gy）放疗可以达到与高剂量（50 Gy以上）放疗近似的临床效果,而低剂量组毒副反应较轻。

肿瘤抗原MUC1调节骨髓来源抑制细胞的产生

目的探讨MUC1对骨髓来源抑制细胞(MDSC)产生的影响。方法将过表达MUC1细胞(B16-MUC1)和对照细胞(B16-neo),接种于C57BL/6小鼠皮下,待肿瘤形成后,取骨髓、外周血、腹腔液和脾,通过流式细胞术检测MDSC细胞数量;分离C57BL/6小鼠股骨骨髓细胞,分别与B16-MUC1和B16-neo细胞共同培养24 h和48 h,通过流式细胞术检测MDSC细胞;采用Transwell小室法分析MUC1对MDSC细胞的趋化作用;流式细胞术检测MDSC细胞中MUC1蛋白表达。结果与接种B16-neo组C57BL/6小鼠相比,B16-MUC1细胞接种组小鼠在腹腔液和外周血中CD11b+GR-1+MDSC细胞含量明显降低(P<0.05);正常C57BL/6小鼠骨髓细胞分别与B16-neo和B16-MUC1细胞分别共同培养24 h和48 h后,与B16-neo细胞共同培养组相比,B16-MUC1细胞共同培养组的CD11b+GR-1+MDSC含量明显减少,具有统计学意义(P<0.01);另外,与B16-neo培养组相比,B16-MUC1细胞共同培养组迁移至滤膜下的MDSC细胞数量增加(P<0.05);骨髓细胞与B16-MUC1细胞共同培养组的MDSC细胞中,MUC1的表达增高。结论 MUC1能够抑制骨髓来源抑制细胞(MDSC)的产生,参与MDSC的募集,并诱导MDSC自身表达MUC1蛋白。

N_0期鼻咽癌颈部照射的合适范围探讨

目的 确定N0 期鼻咽癌颈部照射的合适范围。方法 回顾性分析 196例N0 期鼻咽癌病人治疗后颈部控制结果及相关因素。全部病例接受单纯根治性放疗 ,鼻咽中位剂量DT70Gy ;颈部治疗范围只包括双侧上半颈 ,治疗剂量DT( 4 0～ 72 )Gy(平均DT4 7Gy ,中位DT5 0GY)。 结果 共有 9例病人治疗后发生颈部淋巴结转移 ,颈部 5年控制率 96 .1%。其中 4例同时合并鼻咽部复发 ,单纯颈部复发 5例 ,单纯颈部复发率 2 .5 5 % ( 5 / 196 )。颈部治疗剂量低于DT4 5Gy组的颈部复发率为9.0 % ( 6 / 6 7)明显高于剂量高于DT4 5Gy组的2 .3% ( 3/ 12 9) ;有鼻咽复发者的颈部复发率 13.3% ( 4 / 33)明显高于无复发者的 3.0 % ( 5 / 16 6 ) ;以上差异有统计学意义。结论 N0 期鼻咽癌病人放射治疗后颈部复发率很低 ,颈部治疗范围包括双上颈已足够 ,治疗剂量应高于 4 5Gy。

奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶同期调强放疗治疗局部晚期鼻咽癌

目的观察奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶方案同期使用调强放疗技术(IMRT)治疗中晚期鼻咽癌的疗效、生存率及安全性。方法 70例局部晚期鼻咽癌患者(Ⅲ~Ⅳb AJCC 7th分期)接受奥沙利铂120 mg/m^2,第1天;联合5-氟尿嘧啶0.5 g/m^2,第1~5天。化疗于放疗的第1天开始,每28 d 1次,总共2个疗程,所有患者均接受根治量调强放疗:IMRT 7~9野,PTVnx/70.4 Gy/32次/6.5周,PTV-Ln/68 Gy/32次/6.5周。结果全部患者均完成计划剂量放疗及化疗。中位随访36个月后,全组的1、3年生存率为96.1%和91.2%,中位生存时间51个月。1、3年无复发生存率分别为95.5%和88.5%。1、3年无远处转移生存率分别为94.9%和85%。结论含奥沙利铂方案同步放化疗治疗局部晚期鼻咽癌局部控制、生存率令人满意,胃肠及血液毒性低,患者有很好的耐受性。

DKK1在食管胃结合部腺癌患者血清中的水平及其临床诊断价值

目的:探讨Dickkopf-1(DKK1)在食管胃结合部腺癌患者血清中的表达情况及其诊断意义。方法:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测79例食管胃结合部腺癌和101例正常对照者血清DKK1的表达水平,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价其诊断效能。结果:食管胃结合部腺癌患者血清中的DKK1表达水平明显高于正常对照者,差异有统计学意义(P=0.001)。ROC曲线结果显示,DKK1最佳诊断临界值为2 615.9 pg/m L,曲线下面积(AUC)为0.650(95%CI:0.569~0.731),敏感度为34.2%,特异度为96.0%。DKK1诊断早期患者AUC为0.674(95%CI:0.521-0.827),敏感度为35.7%,特异度为96.0%。DKK1的阳性表达率与食管胃结合部腺癌的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和总TNM分期之间均无明显相关性(P>0.05),但和远处转移明显相关(P<0.05)。结论:DKK1在食管胃结合部腺癌患者血清中高表达,可能是食管胃结合部腺癌一种潜在的早期诊断标志物。

急性髓系白血病患者NKD1基因的表达及其临床意义

目的:检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者裸角质膜同源蛋白(NKD1)的表达水平并分析其临床意义。方法:应用实时定量PCR方法检测125例初诊AML患者和22例对照者骨髓单个核细胞中NKD1的转录水平。根据NKD1表达水平将AML患者分为高、低表达两组,比较两组间临床参数的异同并分析其临床意义。结果:AML患者中NKD1的表达水平较对照组明显降低(U=805,P=0.002)。NKD1高、低表达两组患者的性别、年龄、外周血白细胞计数、外周血血小板计数、骨髓原始细胞比例、FAB/WHO分型以及常见基因突变间的差异无统计学意义(P均>0.05);NKD1高表达组血红蛋白水平明显高于低表达组(U=1 339,P=0.029);NKD1高、低表达两组患者经诱导治疗后完全缓解率间的,差异无统计学意义(P>0.05);全部AML、非M3及染色体核型正常患者中,NKD1低表达组总体生存时间明显短于NKD1高表达组(P均<0.05)。结论:NKD1在AML患者中呈低表达,可作为判断AML患者预后的分子标志物。

慢性髓系白血病SOX17基因表达及甲基化的临床研究

目的:分析慢性髓系白血病(CML)患者SOX17基因表达、启动子甲基化及其临床的相关性。方法:使用RQ-PCR和RQ-MSP技术分别检测SOX17转录本及启动子甲基化水平。结果:34例CML患者中SOX17转录本含量明显低于30例对照(P=0.001);接收者操作特征曲线显示SOX17表达的CML曲线下面积为0.748(P=0.001);SOX17和bcr/abl转录本水平呈正相关趋势(r=0.439,P=0.068)。3例(4%)CML患者出现SOX17启动子高甲基化改变,与32例对照无统计学差异。SOX17表达与启动子甲基化程度无相关性。结论:SOX17表达下调是CML的一个常见分子事件、对CML疾病诊断具有辅助价值;SOX17表达下调不是启动子甲基化所致。

慢性髓系白血病miR-378甲基化研究

目的:探讨miR-378基因启动子在慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法:运用实时定量甲基化特异性PCR(real-time quantitative methylation-specific PCR,RQ-MSP)分别检测25例健康供髓者及53例CML患者骨髓单个核细胞中miR-378基因启动子未甲基化水平。结果:17/53例(32.1%)CML患者miR-378基因低甲基化,与对照组仅1/25例(4.0%)相比,两组差异有显著统计学意义(P<0.01)。CML慢性期、加速期、急变期患者miR-378未甲基化频率分别为14/40例(35.0%)、2/5例(40.0%)、1/8例(12.5%),但CML患者不同分期以及核型分组之间的miR-378基因未甲基化水平并无明显差异。未甲基化阳性与阴性组患者的年龄、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量以及BCR/AABL1融合基因转录水平无显著差异(P>0.05)。结论:miR-378基因低甲基化是CML中常见的分子事件,并且主要见于CML慢性期和加速期患者。

高分辨率熔解分析检测急性髓系白血病SRSF2基因突变

目的:应用高分辨率熔解分析(high-resolution melting curve analysis,HRMA)检测急性髓系白血病(AML)患者丝氨酸丰富剪接因子2(SRSF2)基因突变。方法:针对SRSF2基因热点突变位点P95,建立PCR-HRMA方法对140例AML患者骨髓标本进行突变检测及DNA测序验证。结果 :HRMA分析发现140例初诊AML患者中7例(5%)检出SRSF2突变,经测序结果验证为1例P95R杂合子突变、2例P95L杂合子突变和4例P95H杂合子突变;HRMA技术检测SRSF2基因突变的灵敏度为10%;SRSF2基因突变组与非突变组在性别、年龄及血象之间均无显著性差异(P>0.05);AML患者中突变组的总体生存时间(OS)明显短于非突变组(P=0.016)。结论:HRMA分析是一种简便、快速、特异和高通量的SRSF2基因突变筛查技术,SRSF2突变的AML患者预后不良。

显微根尖手术与传统根尖手术治疗根尖囊肿疗效对比分析

根尖囊肿是较常见的牙源性囊肿,主要病因是根尖慢性炎症刺激使根尖周肉芽肿内的上皮残余增生,使渗透压升高,导致囊肿的形成,也可能是由慢性牙槽脓肿造成的[1]。根尖囊肿的扩张速度较慢,多呈无自觉症状,患者会因牙髓坏死致使牙齿颜色产生变化,牙齿失去光泽,呈灰或深灰色[2,3]。囊肿可由开始的黄豆大小增大至鸡蛋大小,根尖位置龈黏膜半球形隆起,手压有弹性[4]。根尖囊肿往往需要采用根尖手术进行进一步治疗,本研究对微根尖手术与传统根尖手术治疗根尖囊肿的疗效进行了比较。

三氧化二砷对鼻咽癌放射增敏的临床研究

目的探讨三氧化二砷对鼻咽癌放射增敏作用临床应用的价值。方法将61例T1-4 N0-1期鼻咽癌病人随机分入单纯放疗组和三氧化二砷放射增敏组，观察两组病人鼻咽肿瘤和颈部肿瘤消退情况及毒副作用。结果放射治疗40Gy时三氧化二砷增敏组和单纯放疗组的鼻咽肿瘤消退率分别为53．13％（17／32）和17．24％（5／29），χ^2=8．495，P=0．004，差异有统计学意义；两组的颈部肿块消退速度无差别；三氧化二砷增敏组的白细胞降低和恶心呕吐较单纯放疗组发生频率高，但多为Ⅰ～Ⅱ度反应，未见Ⅳ度反应。其他的不良反应在两组间差异无统计学意义。结论与单纯放疗相比，放疗加三氧化二砷使鼻咽肿瘤消退较快，无严重毒副作用。

基于血清蛋白质组分析技术鉴定鼻咽癌ENO1自身抗体诊断分子标志物

目的筛选鉴定鼻咽癌自身抗体分子诊断标志物。方法应用鼻咽癌CNE2细胞蛋白进行血清蛋白质组分析筛选鼻咽癌潜在的自身抗体分子标志物。于2014年7月至2015年1月在汕头大学医学院附属肿瘤医院选取50例鼻咽癌患者和80例健康体检者,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)验证筛选的自身抗体在两组血清中的水平,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价诊断效能。结果血清蛋白质组分析结果显示,针对烯醇化酶1(ENO1)的自身抗体在鼻咽癌患者血清中出现阳性反应。ELISA结果显示,鼻咽癌患者血清ENO1自身抗体水平明显高于健康体验者[0.165(0.088,0.378)vs.0.100(0.054,0.117),Z=4.077,P<0.001]。ROC曲线显示,当血清ENO1自身抗体取诊断临界值为0.164时,其诊断鼻咽癌的敏感性为52.0%,特异性为90.0%。在早期鼻咽癌中,ENO1自身抗体阳性率为75.0%。结论血清ENO1自身抗体是鼻咽癌潜在的血清诊断标志物。

三氧化二砷对鼻咽癌放射增敏的近期疗效

[目的]探讨三氧化二砷对鼻咽癌放射增敏作用。[方法]87例T1～4N0～1期鼻咽癌病人随机分为单纯放疗组(对照组)和三氧化二砷+放射治疗组(试验组),观察两组病人鼻咽肿瘤和颈部肿瘤消退情况,1、2年生存率及毒副反应。[结果]放射治疗40Gy时试验组和对照组的鼻咽肿瘤消退率分别为45.45%(20/44)和18.60%(8/43),差异有统计学意义(χ2=7.183,P=0.007)。两组的颈部肿瘤消退速度无统计学差异。40Gy时肿瘤消失组和残留组1、2年无病生存率分别为100%、90.9%和82.2%、69.3%,差异有统计学意义。试验组白细胞降低和恶心呕吐较对照组发生率高,但多为Ⅰ～Ⅱ度反应。其他毒副反应两组间差异无统计学意义。[结论]放疗联合三氧化二砷增敏使鼻咽肿瘤消退更快,且无严重毒副作用。

肿瘤抗原MUC1抑制骨髓来源抑制细胞产生的机制

目的探讨肿瘤抗原MUC1抑制骨髓来源抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)产生的机制。方法分离C57BL/6小鼠股骨骨髓细胞,分别与稳定表达含22个串联重复序列的全长人MUC1 cDNA片段的B16细胞(B16-MUC1)和空质粒对照B16细胞(B16-neo)培养上清共培养,流式细胞术分析MUC1对MDSC产生及MDSC表达MUC1蛋白的影响;瑞氏姬姆萨染色观察MUC1对骨髓细胞生长形态的影响;流式细胞术检测共培养的骨髓细胞中单核细胞和巨噬细胞标志物CD14和F4/80的表达及成熟单核-巨噬细胞标志物CD11b和CD68的表达。结果正常C57BL/6小鼠骨髓细胞分别与B16-neo和B16-MUC1细胞培养上清共培养24和48 h后,BM+B16-MUC1组骨髓细胞中CD11b+Gr-1+MDSC数量较BM+B16-neo组均明显减少(P<0.05),共培养48 h后,BM+B16-MUC1组的CD11b+Gr-1+MDSC中MUC1蛋白的表达较BM+B16-neo组明显增多(P<0.01);BM+B16-MUC1组骨髓细胞中单核-巨噬细胞数量增多;与BM+B16-neo组相比,BM+B16-MUC1组CD14+、F4/80+和CD68+细胞表达数量明显增高(分别为P<0.01、P<0.01、P<0.05),CD11b+平均荧光强度明显增高(P<0.01)。结论 MUC1通过诱导骨髓细胞向单核-巨噬细胞分化,从而抑制MDSC的产生。

张口固定联合唇剂量限制对鼻咽容积调强放疗患者口腔剂量及毒性影响:基于103例鼻咽癌分析

[目的]探讨张口固定联合唇剂量限制对减少鼻咽容积调强放疗患者口腔剂量及黏膜毒性的影响。[方法]回顾性分析103例鼻咽癌患者资料(实验组52例,对照组51例),对照组采用常规热塑膜固定体位,实验组加用口咬器固定及限制唇平均剂量小于25 Gy。收集两组患者口腔、舌根、舌体、颊黏膜、咬肌及颌下腺的体积剂量学参数,以及两组患者放疗开始后出现Ⅱ级及以上口腔黏膜损伤发生的时间。[结果]实验组颊黏膜、口腔、舌根及咬肌的平均剂量均低于对照组(30.45 Gy vs 34.09 Gy,34.72 Gy vs 37.58 Gy,40.76 Gy vs 42.90 Gy,37.63 Gy vs 38.71 Gy,P均<0.05)。实验组及对照组患者发生Ⅱ级及以上急性口腔黏膜炎的比例分别为48.08%和82.35%(P<0.001),平均发生时间为放疗开始后的(24.44±8.90) d和(18.07±9.43) d(P=0.01)。[结论]张口固定联合唇剂量限制能降低鼻咽癌容积调强放疗患者Ⅱ级及以上急性口腔黏膜损伤的发生比例,并推迟其发生时间。