鲭鱼罐头蒸煮液酶解制备抗氧化肽的工艺研究

以鲭鱼罐头蒸煮液为原料,采用生物酶解方法制备抗氧化活性肽。以羟自由基清除率为指标,采用响应曲面试验设计对酶解效果较好的碱性蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解工艺条件优化。并在此基础上,设计出复合蛋白酶酶解方案,得出复合分段酶解的最佳工艺条件为:先添加胰蛋白酶进行反应,温度为55℃,酶添加量为7 450.54 U/g,反应p H值为8,反应时间为4 h;再添加碱性蛋白酶进行反应,酶添加量为6 752.46 U/g,温度为59℃,反应p H值为8,反应时间为3 h;其对应的羟自由基清除率达到了61%。

鲭鱼罐头蒸煮液蛋白酶解产物的生物活性分析

以鲭鱼罐头蒸煮液为原料,采用生物酶解方法制备活性肽,以实现鱼罐头加工废弃液的高值化利用.研究结果表明,采用复合酶(碱性蛋白酶和胰蛋白酶)分段酶解,得到相对分子质量MW<1 ku的组分占50%,高于碱性蛋白酶(30%)和胰蛋白酶(28%)单酶水解效果.进一步采用超滤方法分离酶解产物,得到不同相对分子质量范围的3个组分,其中MW<1 ku的P1组分的抗氧化活性和ACE抑制效果最好.

基因组重排技术选育纤维素酶高产菌株

利用基因组重排技术对产纤维素酶菌株里氏木霉T306进行育种研究,考察原生质体制备、再生及融合条件的影响因素。研究表明,里氏木霉原生质体制备和再生的最佳条件是:3.5%溶壁酶,菌丝菌龄22 h,酶解时间4 h,酶解温度30℃,采用pH 5.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液,以高渗筛选培养基为再生培养基,再生培养基中渗透压稳定剂为0.8 mol/L NaCl。在此条件下,里氏木霉原生质体量达1.44×10~7个/m L,再生率为2.64%。融合试验结果表明,将紫外照射90 s和微波辐射200 s两种方式灭活的原生质体融合,在30%PEG、30 mmol/L Ca^(2+)、30℃条件下处理12 min,原生质体融合率达0.5%。经两轮基因组重排试验,获得一株遗传稳定,产酶能力较强的融合子G2-0832,其内切葡聚糖酶活力达86.40 U/m L,较出发菌株提高了57.08%。