牙龈卟啉单胞菌通过上调HIF-1α抑制食管鳞癌细胞铁死亡

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis,P.gingivalis)抑制食管鳞癌(esophagealsquamous cellcarcinoma,ESCC)细胞铁死亡的分子机制。方法采用铁死亡诱导剂RSL3处理P.gingivalis感染和未感染的ES CC细胞,检测细胞活力以及细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathioneperoxidase4,GPX4)等铁死亡标志物的表达水平变化。采用免疫组化、qRT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法检测94例ESCC患者食管癌组织和P.gingivalis感染ESCC细胞中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-in duciblefactor-1α,HIF-1α)及其靶基因的表达水平。分别在细胞水平和裸鼠皮下荷瘤模型中检测HIF-1α抑制剂LW6和RSL3联用后P.gingivalis感染对ESCC细胞铁死亡的影响。结果与RSL3单独处理组相比,P.gingivalis感染后ESCC细胞存活率显著升高(均P<0.01),胞内ROS和MDA水平显著降低(均P<0.05),GPX4表达升高。ESCC患者肿瘤组织中P.gingivalis与HIF-1α的表达呈显著正相关。P.gingivalis感染后ESCC细胞中HIF-1α及其靶基因表达量显著升高。LW6在体外细胞水平和裸鼠皮下ESCC荷瘤模型中,均能抑制P.gingivalis感染诱发的HIF-1α表达上调,从而促进ESCC铁死亡。结论HIF-1α介导P.gingivalis感染诱导的ESCC铁死亡抗性发生,提示联合HIF-1α抑制剂和铁死亡诱导剂可能作为ESCC治疗的新策略。

Transgelin-2对牙龈卟啉单胞菌感染的食管鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨沉默Transgelin-2对牙龈卟啉单胞菌(PG)感染的食管鳞状细胞癌细胞(ESCC)恶性生物学行为的影响及可能的机制。方法:将NE6-C或KYSE140细胞分为4组处理,分别转染siControl、感染PG(感染复数10)、转染siTAGLN-2、转染siTAGLN-2+感染PG。CCK-8法检测细胞增殖,BrdU标记法检测细胞周期,Transwell小室实验检测细胞的迁移及侵袭能力,免疫荧光法检测细胞中Transgelin-2、F-actin、E-cadherin和Vimentin蛋白的分布,Western blot法检测Transgelin-2、E-cadherin和Vimentin蛋白的表达。结果:PG感染单独作用可以增加NE6-C和KYSE140细胞的增殖速率,增加S期细胞比例、侵袭细胞数和迁移细胞数(P<0.05);上调Transgelin-2表达(P<0.05),减少F-actin;下调E-cadherin表达,上调Vimentin表达(P<0.05)。转染siTAGLN-2可以显著拮抗PG感染的上述效应(P<0.05)。结论:Transgelin-2可能通过介导改变ESCC细胞骨架,从而抑制了PG感染诱导的ESCC恶性进展。

食管鳞癌外周血细胞PD-L1、PD-1及TCF-1 mRNA表达与预后的关系

目的探讨外周血细胞中程序性死亡配体-1(PD-L1)、程序性死亡受体(PD-1)及TCF-1 mRNA变化及其在食管鳞癌(ESCC)诊断和预后中的价值。方法回顾性分析2019年1月至2019年12月间河南科技大学第一附属医院临床医学院肿瘤医院病理确诊的91例ESCC患者和63例非癌对照外周血细胞中PD-L1、PD-1和TCF-1的mRNA表达变化,并通过ROC曲线分析诊断ESCC效能。Log-rank检验确定不同组别生存曲线差异,确定PD-L1、PD-1和TCF-1 mRNA表达与总生存期相关性。结果ESCC患者外周血细胞中PD-L1、PD-1和TCF-1 mRNA显著高于非癌对照者(P<0.05),其诊断ESCC的敏感性和特异性分别为0.58/0.68、0.92/0.64和0.95/0.58,AUC分别为0.66、0.84和0.78,且这3个mRNA分子表达呈正相关。PD-L1、PD-1、TCF-1 mRNA高表达的ESCC患者总生存期明显高于低表达者(P<0.05)。结论PD-L1、PD-1和TCF-1是ESCC潜在的诊断和预后生物标志物分子。

食管鳞癌中牙龈卟啉单胞菌通过14-3-3σ调控程序性死亡-配体1蛋白降解

牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)是口腔疾病的重要致病菌之一,与人食管鳞癌(ESCC)进展密切相关。然而P.gingivalis促进ESCC发生发展的分子机制尚不十分清楚。该研究探讨了ESCC中P.gingivalis通过诱导程序性死亡-配体1(PD-L1)蛋白表达上调的分子机制。Western印迹和RT-PCR结果显示,KYSE140和KYSE150细胞中14-3-3σ与PD-L1的蛋白质表达呈负相关,但二者的mRNA表达无相关性。免疫共沉淀结果表明,14-3-3σ蛋白通过与PD-L1蛋白结合,促进PD-L1的泛素化降解,P.gingivalis感染干预了14-3-3σ与PD-L1蛋白质复合体形成;KYSE140和KYSE150细胞中14-3-3σ沉默,降低了PD-L1泛素化介导的蛋白质酶体降解,14-3-3σ过表达明显抑制P.gingivalis诱导的PD-L1蛋白表达上调。免疫组化结果进一步证实,在ESCC组织中P.gingivalis丰度与14-3-3σ蛋白表达呈负相关,与PD-L1蛋白表达呈正相关,14-3-3σ与PD-L1的蛋白质表达呈负相关。综上所述,ESCC中P.gingivalis通过下调14-3-3σ蛋白表达,降低14-3-3σ介导的PD-L1蛋白的泛素-蛋白质酶体降解途径,进而抑制抗肿瘤免疫,促进ESCC恶性演进。

前列腺特异抗原、增殖细胞核抗原与前列腺癌临床特征相关性分析

目的探讨血清前列腺特异抗原(PSA)、增殖细胞核抗原(PCNA)与前列腺癌患者临床特征相关性。方法随机选取我院2017年1月-2018年12月收治的前列腺癌患者100例,将其纳入观察组。另选同期确诊的100例良性前列腺增生患者,将其纳入对照组。采用微粒子免疫分析法检测患者血清PSA水平,采用免疫组化染色法检测患者血清PCNA表达。结果观察组及对照组患者的血清PSA、PCNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。SA分级与年龄及淋巴结转移无关(P>0.05),与组织分化程度、临床分期有关(P<0.05)。PCNA表达与前列腺癌患者年龄无关(P>0.05),与组织分化程度、淋巴结转移、临床分期有关(P<0.05)。血清PSA与PCNA呈正相关(P<0.05)。结论高分期、高分化的前列腺癌患者血清PSA水平高,PCNA低表达。

血小板与凝血指标检测对肝硬化患者病情程度的评估价值

目的探究血小板与凝血指标检测对肝硬化患者病情程度的评估价值。方法选取2016年4月~2019年4月我院接收的肝硬化患者120例,按照Child-pugh肝功能评分分级标准分成三组:轻度组、中度组、重度组各40例。采集三组患者血液样本并进行血小板与凝血指标检测,对比三组检测结果分析出血小板与凝血指标检测与肝硬化患者病情程度的关系。结果血小板指标中,轻度组、中度组、重度组患者的血小板(PLT)、血小板比容(PCT)指标依次降低,血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)指标依次升高,差异均有统计学意义(P<0.05);凝血指标中,轻度组、中度组、重度组患者凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)指标依次升高,纤维蛋白原含量(FIB)指标依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血小板与凝血指标在不同严重程度的肝硬化患者中表现差异明显,可以作为诊断肝硬化患者病情严重程度的诊断依据。

食管鳞癌中差异表达的N-连接糖蛋白鉴定

目的应用二维电泳和质谱技术鉴定食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中差异表达的N-连接糖蛋白。方法采用串联植物凝集素亲合层析法分离纯化ESCC与癌旁食管黏膜组织中高甘露糖型和唾液酸型N-连接糖蛋白,二维电泳、串联质谱鉴定差异表达的蛋白质分子;Western blot验证候选蛋白质分子在ESCC中的差异表达。结果鉴定了22种高甘露糖型和23种唾液酸型差异表达的N-连接糖蛋白,Western blot证实在ESCC中补体C3(completment C3)高表达、触珠蛋白(haptoglobin,HP)和聚集素低表达。结论ESCC中存在N-连接糖蛋白变异,异常糖基化的HP、聚集素和补体C3及相应的糖链变异是ESCC潜在的生物标志物。

中学艺术教育“课程群”模式的探究与实践——以北京大学附属中学舞蹈节剧组课程为例

近些年,随着国家课程改革的逐步推进,人们越来越关注艺术教育在素质教育中起到的积极作用,并意识到艺术对健全学生人格的重要意义。针对新课标要求下中学艺术课程多元化改革中产生的一系列问题,北京大学附属中学尝试通过构建新型课程模式予以解决,并将其定义为中学艺术教育“课程群”模式。文章就该模式的研究背景、顶层设计、优势与创新等多方面进行了详细的阐述。

浅谈高校民乐室内乐教学现状

随着艺术院校对于民乐室内乐课程的逐渐认可和重视,高校民乐室内乐逐步形成了教学专业化、组合多样化、作品多元化的特点,取得了一定的教育教学成果。但高校室内乐教学中依然存在认知程度不够深入、学生综合素养亟待提高等问题。对此文章提出建立和完善高校民乐室内乐教学体系、注重学生合作意识培养的改进建议,以期推动高校民乐室内乐教学的继续向前发展。

斑点追踪分层应变联合心肌做功技术评价射血分数保留的心力衰竭患者左心室功能

目的应用斑点追踪分层应变联合心肌做功技术评价射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者左室收缩功能及整体心肌做功变化,探讨各参数对HFpEF的诊断性能。方法选取2019年12月至2020年12月于哈尔滨医科大学附属第四医院确诊的38例HFpEF患者(HFpEF组)以及性别、年龄与之匹配的38例体检健康者(对照组)。采集常规超声参数,应用分层应变和心肌做功技术分别获取左室心内膜下层、心肌中层和心外膜下层整体纵向应变(GLSendo、GLSmid、GLSepi)及整体心肌做功指数(GWI)、整体做功效率(GWE)、整体有效功(GCW)、整体无效功(GWW)指标,计算整体纵向应变跨壁阶差(ΔGLS),分析两组间参数的差异。绘制ROC曲线,比较分层应变及心肌做功参数对HFpEF患者左室收缩功能的预测价值。结果①HFpEF组左房内径、室间隔厚度、左室后壁厚度、相对室壁厚度、左室质量指数、平均舒张早期二尖瓣口峰值流速(E)/舒张早期二尖瓣环运动速度(e′)大于对照组,舒张晚期二尖瓣口峰值流速(A)、E/A、e′小于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);两组E、左室舒张末期内径、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积、短轴缩短率及左室射血分数差异无统计学意义(均P>0.05)。②HFpEF组和对照组GLSendo、GLSmid、GLSepi由内向外依次递减的跨壁梯度仍然存在。③HFpEF组GLSendo、GLSmid、GLSepi、ΔGLS、GWE、GWI、GCW低于对照组,GWW增高,差异有统计学意义(均P<0.01)。④ROC曲线显示,ΔGLS、GWE预测HFpEF患者左室收缩功能受损曲线下面积(AUC)相对较大,分别为0.884、0.882,最佳截断值为-5.8%、95%,敏感性为84.2%、71.1%,特异性为84.2%、89.5%。⑤两种技术联合诊断的ROC曲线显示,ΔGLS联合GWE的AUC最大为0.944,敏感性81.6%,特异性97.4%。结论斑点追踪分层应变和心肌做功技术均能早期敏感检测HFpEF患者左心室心肌功能损害;ΔGLS、GWE是预测HFpEF患者左室收缩功能受损更可靠的指标,两种技术联合可提升对HFpEF的诊断性能。

生化检验在肾上腺皮质疾病诊断中的应用效果分析

目的分析生化检验在肾上腺皮质疾病诊断中的应用效果。方法本研究选择对象为肾上腺皮质疾病患者90例,根据入院单双号的顺序将所有患者均分两组,开展常规检验的45例患者设为参照组,开展生化检验的45例患者设为研究组,总结两种检验方法的总有效率。结果对比两种患者的检验总有效率,研究组(97.8%)显著高于参照组(80.0%),两组间相比较(X^2=6.3041,P<0.05)。结论在肾上腺皮质疾病诊断中应用生化检验可将诊断准确率显著提高,从而为后续疾病的治疗奠定基础,值得研究。