关于医学高职生“组织胚胎学”的教学模式探讨

以高等医学专科院校的学生为研究对象,以提高教学质量和培养学生学习能力为目的,结合传统教学模式和改革后教学模式在实际应用中的利弊,探讨医学基础课程"组织胚胎学"的教学方法。

基于基因表达综合数据库筛选急性冠脉综合征的差异基因和生物信息学分析

目的对急性冠脉综合征(ACS)患者和正常患者的mRNA基因芯片数据进行生物信息学分析,筛选ACS差异表达基因,确定ACS的核心基因。方法利用基因表达综合数据库(GEO)下载的数据筛选ACS患者与正常患者之间差异表达基因,对差异表达基因进行基因功能(GO)富集分析,使用String在线数据库构建基因的蛋白互作网络(PPI),并确定ACS的核心基因。结果筛选出ACS患者与正常患者之间存在350个差异基因,上调基因244个,下调基因106个;GO富集分析结果显示,差异基因主要富集于核糖体相关的信号通路;构建差异表达基因的PPI网络共筛选出20个核心基因,治疗后ACS患者与正常患者基本转录因子3(BTF3)基因表达比较差异有统计学意义(P<0.05),两者间其他基因表达比较差异无统计学意义。结论筛选出的20个核心基因可作为ACS的核心基因,为ACS的治疗和研究提供理论指导。

miR-133a-3p靶向BMP9调控人颌骨骨髓间充质干细胞增殖、分化和凋亡的研究

目的:探讨miR-133a-3p靶向骨形态发生蛋白9(BMP9)对人颌骨骨髓间充质干细胞(hOBMSCs)增殖、分化和凋亡的影响。方法:体外成骨诱导培养hOBMSCs,RT-qPCR和Western blot检测hOBMSCs成骨分化过程中miR-133a-3p和BMP9的表达。MTT法、流式细胞术检测miR-133a-3p和BMP9表达对hOBMSCs活力和凋亡的影响;Western blot runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙蛋白(OCN)、骨桥蛋白(OPN)和p-Smad1/5/8蛋白的表达。结果:hOBMSCs成骨分化过程中miR-133a-3p表达降低,BMP9表达升高(P<0.05)。抑制miR-133a-3p表达可增加hOBMSCs活力,抑制细胞凋亡,并上调Runx2、OCN、OPN和p-Smad1/5/8蛋白表达(P<0.05)。干扰BMP9表达显著逆转miR-133a-3p抑制对hOBMSCs增殖、凋亡、分化和p-Smad1/5/8蛋白表达的影响(P<0.05)。结论:miR-133a-3p可能通过Smad通路调控BMP9表达抑制hOBMSCs增殖和分化,促进细胞凋亡。

IL-33稳定沉默后通过削弱AKT磷酸化抑制间充质干细胞增殖

目的:通过慢病毒载体沉默IL-33在间充质干细胞(MSCs)中的表达,探讨IL-33基因沉默后对MSCs增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:通过构建IL-33基因的shRNA慢病毒载体转染MSCs;应用RT-PCR及免疫印迹方法检测IL-33在MSCs中的表达情况及IL-33基因的沉默效果;通过Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况,进而检测IL-33基因沉默后对MSCs增殖、凋亡的影响,并通过免疫印迹检测AKT磷酸化水平。结果:细胞转染及免疫印迹实验表明IL-33 shRNA慢病毒载体构建成功,并干扰了IL-33在MSCs中的表达;稳定沉默IL-33基因后,MTT细胞生长实验表明MSCs增殖能力减弱(P<0.05);流式细胞技术和免疫印迹技术检测显示IL-33基因沉默后可提高MSCs对外界凋亡诱导物的敏感性,且引起细胞survivin基因表达的下调。结论:IL-33基因可能与MSCs增殖和抗凋亡有关,进而参与MSCs的发育和存活,IL-33稳定沉默后通过削弱AKT磷酸化可抑制MSCs增殖。

LINC00342/miR-505-3p/PGK1基因在乳腺癌患者肿瘤转移中的表达以及对细胞生物学特性的影响

长链非编码RNA LINC00342已被证实在多种癌症中参与重要生物学功能。然而,LINC00342在乳腺癌中的作用和机制尚不清楚。在该研究中,选取28例乳腺癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织,乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞,用qRT-PCR检测LINC00342、miR-505-3p和磷酸甘油酸激酶1(PGK1)mRNA的表达情况。Western blot检测PGK1蛋白的表达情况。将乳腺癌细胞MCF-7分为NC组(空白)、si-LINC00342组(转染si-LINC00342)、si-NC组(转染si-NC)、miR-505-3p组(转染miR-505-3p模拟物)、miR-NC组(转染miR-NC)、si-PGK1组(转染si-PGK1)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC00342+pcDNA-PGK1组(同时转染si-LINC00342与pcDNA-PGK1)和siLINC00342+pcDNA组(同时转染si-LINC00342与pcDNA)。利用Western blot检测PGK1、迁移侵袭标志物基质金属蛋白酶MMP2和MMP9的表达情况,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭数量。双荧光素酶活性实验检测miR-505-3p与LINC00342、PGK1之间的靶向结合。结果显示,LINC00342、PGK1 mRNA和PGK1蛋白在乳腺癌组织和细胞中显著上调,miR-505-3p显著下调。干扰LINC00342、过表达miR-505-3p或干扰PGK1均能抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,以及MMP2和MMP9蛋白表达。此外,LINC00342可直接靶向miR-505-3p调控PGK1表达,高表达PGK1可逆转LINC00342低表达对MCF-7增殖、迁移和侵袭的抑制效果。该研究提示,干扰LINC00342表达可能通过靶向miR-505-3p调控PGK1的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。