亚砷酸钠诱导HaCaT细胞恶性转化实验

目的探讨低浓度亚砷酸钠(NaAsO2)对人永生化但无致癌性的皮肤角质细胞株(HaCaT)的影响。方法 (1)细胞培养:HaCaT细胞株常规培养,隔日换液,4 d传代;(2)细胞毒性实验:MTT法检测细胞毒性,确定最佳染毒剂量;(3)细胞转化实验:HaCaT细胞在含0.05 ppm NaAsO2培养液中连续传代培养40代(约160 d),细胞培养期间,倒置显微镜下观察每代细胞形态的变化并采集图片,MTT法检测细胞增殖能力,半固体琼脂实验检测细胞克隆形成率。结果 NaAsO2处理细胞形态学、增殖能力及非停泊依赖性能力均发生变化,主要表现为多核巨细胞,倍增时间缩短,在半固体琼脂培养基上形成集落及克隆形成率明显增加。结论 NaAsO2处理的细胞发生恶性转化,砷诱导体外细胞恶性转化模型建立成功。