食品检验实验室管理及检验质量控制

食品检验理论概述食品检验主要包含食品领域中的运用化学、生物化学和多种理论技术融合,在生产和加工过程中,为了提升食品质量以及食品信誉方面的标准实行的一种保障手段。

LncRNA XIST通过miR-494-3p/MTUS1轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)调控miR-494-3p/微管相关肿瘤抑制基因1(MTUS1)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响。方法2020年2月-2022年2月期间共收集濮阳市人民医院51对乳腺癌组织及癌旁组织。人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR3均购自中国科学院上海细胞库。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot分别检测乳腺癌癌组织、癌旁组织及人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR3中XIST、miR-494-3p、MTUS1蛋白表达;将MCF-7细胞分为Ctrl组、pcDNA组、pcDNA-XIST组、pcDNA-XIST+mimic NC组、pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic组,qRT-PCR检测细胞中XIST、miR-494-3p表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;Western blot检测细胞中MTUS1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报基因实验分别验证XIST和miR-494-3p、miR-494-3p和MTUS1的关系。结果与癌旁组织比较,乳腺癌组织中XIST、MTUS1蛋白表达降低,miR-494-3p表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),与MCF-10A细胞比较,MCF-7细胞中XIST、MTUS1蛋白表达量降低,miR-494-3p表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-XIST组XIST、MTUS1蛋白表达量升高[(1.03±0.12)vs.(1.92±0.14)、(0.24±0.01)vs.(0.88±0.07)],miR-494-3p表达量降低[(1.02±0.08)vs.(0.35±0.03)],差异均有统计学意义(t=11.82、22.17、19.21,P均<0.001);与pcDNA-XIST+mimic NC组比较,pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic组XIST表达量[(1.94±0.13)vs.(1.93±0.15)]变化差异无统计学意义(t=0.12,P=0.904),miR-494-3p表达升高[(0.36±0.04)vs.(0.78±0.07))],MTUS1蛋白表达量降低[(0.89±0.08)vs.(0.45±0.04)],差异均有统计学意义(t=12.76、12.05,P均<0.001);与pcDNA组比较,pcDNA-XIST组OD_(450)值、划痕愈合率、侵袭细胞数、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。XIST靶向调控miR-494-3p/MTUS1轴;与pcDNA-XIST+mimic NC组比较,pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic组OD_(450)值、划痕愈合率、侵袭细胞数、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论过表达XIST可能通过海绵化miR-494-3p来上调MTUS1表达,进而抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭与迁移,促进细胞凋亡。