强制运动促进成年大鼠海马齿状回神经发生并提高学习能力(英文)

为了探讨强制运动对成年大鼠海马齿状回(dentategyrus,DG)神经发生的影响,强制大鼠在马达驱动的转轮中跑步,用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记增殖细胞,巢蛋白(neuroepthelialstemcellprotein,nestin)标记神经干细胞/前体细胞,然后用免疫细胞化学技术检测大鼠DG中BrdU及nestin阳性细胞。为了解强制运动后DG增殖细胞的功能意义,采用Y-迷宫检测大鼠的学习能力。结果表明,强制运动组DG中BrdU及nestin阳性细胞数均明显多于对照组(P<0.05);强制运动对DG神经发生的效应有强度依赖性。Y-迷宫检测结果显示,强制运动能明显改善大鼠的学习能力。结果提示,在转轮中进行强制跑步能促进成年大鼠DG的神经发生,并改善学习能力。

NE系统在冷应激诱导NK细胞活性下降中的作用

目的 用 6 OHDA分别选择性地损毁外周和中枢的去甲肾上腺素 (NE)能系统 ,探讨去甲肾上腺素能系统在冷应激诱导大鼠NK细胞活性下降中的作用。方法 大鼠置于4℃的冷室 4h。腹腔和侧脑室分别注射 6 OHDA。采用YAC 1细胞51Cr释放法测定脾脏NK细胞的活性。用免疫细胞化学法观察下丘脑室旁核 (PVN)和脑干蓝斑 (LC)中的Fos表达 ,以及Fos表达阳性的神经元的性质。用放射免疫法测定血浆CORT的浓度。结果 脑室注射 6 OHDA能部分翻转冷应激诱导的血浆CORT浓度的升高 ,减少PVN和LC中Fos的表达 ,同时使脾脏NK细胞活性不再下降。同样 ,腹腔注射 6 OHDA也能翻转冷应激诱导NK细胞活性的下降 ,但对脑内Fos表达没有明显影响。另外 ,双染实验表明 ,PVN中有少量的Fos阳性的神经元同时表达精氨酸加压素 (AVP)或催产素 (OT) ,而LC中大多数Fos阳性的神经元同时表达酪氨酸羟化酶 (TH)。结论 冷应激诱导大鼠NK细胞活性下降的可能机制是 :一方面通过中枢去甲肾上腺素能系统去激活HPA轴 ;另一方面介导外周交感神经系统。最后两者共同作用于脾脏NK细胞 ,导致其活性下降。

灯笼草镇痛作用及其机理的研究

目的 :观察灯笼草的镇痛作用。方法 :采用扭体法、电刺激鼠尾 嘶叫法、钾离子透入法和辐射热 缩腿法等行为学指标以及丘脑束旁核神经元对伤害性刺激的放电反应的电生理指标。结果 :灯笼草能剂量依赖地提高大鼠电刺激鼠尾 嘶叫法的痛阈 ,剂量依赖地抑制醋酸引起的小鼠扭体反应 ,对炎症性痛敏及神经源性痛敏灯笼草也有镇痛作用 ,灯笼草还能明显抑制丘脑束旁核神经元对伤害性刺激的放电反应。纳洛酮能翻转灯笼草的镇痛作用 ,反复给予灯笼草能产生耐受 ,但与吗啡镇痛之间不存在交叉耐受。结论 :灯笼草具有镇痛作用 ,其镇痛作用可能涉及中枢阿片受体。

水浸束缚应激及电击足底应激诱导的大鼠脑内FOS蛋白表达

目的和方法：本实验观察水浸束缚复合应激源与电击足底单一应激源诱导的大鼠脑内Ｆｏｓ 表达。结果：①水浸束缚和电击足底均引起脑内边缘系统、间脑、脑干等许多核团内Ｆｏｓ 表达；②在边缘系统，水浸束缚应激１ｈ 的Ｆｏｓ 表达较为显著，以后逐渐减弱；③随着水浸束缚应激时间的延长，间脑和脑干各核团Ｆｏｓ 表达逐渐增强。实验还观察到水浸束缚应激各组的胃粘膜都有不同程度的溃疡形成；电击足底应激组无异常变化。结论：水浸束缚和电击足底都是加工性应激源，首先激活边缘系统；随着水浸束缚应激时间的延长，间脑和脑干Ｆｏｓ 表达也逐渐增强。

冷应激诱导的脾脏NK细胞活性下降和脑内c-fos表达

目的 :观察单一冷应激对大鼠脾脏NK细胞活性的影响以及脑内Fos表达。方法 :大鼠置于 4℃的冷室 4h。采用YAC 1细胞51Cr释放法测定脾脏NK细胞的活性。用免疫细胞化学观察脑内有关核团的Fos表达 ,以及PVN和LC中Fos表达阳性的神经元的性质。结果 :单一冷应激能使脾脏NK细胞活性明显下降 ,下丘脑室旁核 (PVN)和脑干蓝斑 (LC)出现明显的Fos表达。双染实验表明 ,PVN中有部分神经元同时表达精氨酸加压素 (AVP) ,LC中大多数神经元同时表达酪氨酸羟化酶 (TH)。结论

南蛇藤提取物含药血清对人肝癌SMMC 7721细胞增殖、迁移和黏附作用的影响

目的制备南蛇藤(Celastrus Orbiculatus)乙酸乙酯提取物兔含药血清,研究其对人肝癌SMMC 7721细胞株的增殖、迁移和黏附的影响。方法取新西兰白兔,以20 mg/kg.d南蛇藤提取物灌胃,按血清药理学方法制备含药血清。设低、中、高剂量组(分别含有10%,20%,30%的南蛇藤提取物含药血清),作用人肝癌SMMC 7721细胞,同时设溶媒对照组及5-氟尿嘧啶(5-Fu)阳性对照组。MTT法检测含药血清对细胞增殖的影响,Borden小室体外迁移实验及细胞黏附实验分别检测含药血清对细胞迁移和黏附能力的影响。结果 MTT结果显示各剂量组含药血清均能抑制肝癌SMMC 7721细胞的增殖,且呈剂量依赖性。迁移实验结果表明,中、高剂量组含药血清能显著抑制细胞的迁移能力(P<0.05);黏附实验结果显示在作用1 h和2 h时各剂量组均能显著促进细胞的同质黏附;在作用2 h时,中、高剂量组能抑制细胞与基底膜成分Matrigel的黏附,低、中、高各剂量组均能抑制细胞与人脐静脉内皮细胞的异质黏附,与对照组相比差异显著(P<0.05或P<0.01),并具一定的量效关系。结论南蛇藤提取物含药血清能有效抑制人肝癌SMMC7721细胞的增殖和迁移能力,并能促进细胞的同质黏附能力,抑制细胞与基底膜及与人脐静脉内皮细胞的异质黏附能力。

丙泊酚镇痛作用及其与阿片受体的关系

目的观察丙泊酚在亚睡眠剂量时对大鼠的抗伤害作用及其与阿片受体的关系。方法选用成年雄性Wistar大鼠,通过甩尾(TFL)、电刺激鼠尾嘶叫(TSV)和结直肠扩张(CRD)法测定动物的痛阈。观察丙泊酚20mg/kg和同时应用阿片受体拮抗剂纳洛酮1mg/kg对大鼠痛阈的影响,以等效剂量硫喷妥钠作为对照。结果丙泊酚20mg/kg显著提高TSV、CRD和TFL伤害性反应阈值。采用TSV抗伤害作用时间持续60min以上,而采用TFL和CRD抗伤害作用≤30min。等效剂量硫喷妥钠无论采用TFL、TSV或CRD都无明显提高大鼠痛阈的作用。纳洛酮1mg/kg可以拮抗或部分拮抗丙泊酚引起的抗伤害作用。结论与等效量硫喷妥钠相比,亚睡眠剂量的丙泊酚在大鼠能产生一定的镇痛效应;这种镇痛效应可能与丙泊酚间接作用于中枢阿片受体有关。

不同应激方式对大鼠下丘脑室旁核c-Fos表达的影响

目的:为了比较大鼠足趾皮下注射福尔马林(formalin)和腹腔注射脂多糖(LPS)诱导下丘脑室旁核(PVN)内c-Fos蛋白表达的差异。方法:本实验采用免疫组织化学ABC双重细胞染色法,观测formalin和LPS应激后下丘脑室旁核大细胞部(mPVN)和小细胞部(pPVN)内c-Fos蛋白和精氨酸加压素(AVP)的定位和分布情况。结果:(1)与空白对照组比较,LPS剂量依赖性地诱导mPVN和pPVN内c-Fos蛋白表达(P<0.05);(2)与空白对照组比较,formalin剂量依赖性地诱导pPVN内c-Fos蛋白表达(P<0.05),但mPVN内c-Fos蛋白无明显增加;(3)当两组模型大鼠pPVN内c-Fos蛋白表达无明显差异时,与formalin组比较,LPS组mPVN内c-Fos蛋白表达明显增多(P<0.05),两者mPVN内的AVP表达无明显差异。结论:结果提示formalin和LPS均可引起下丘脑PVN神经元产生特异性反应,但LPS诱发的c-Fos阳性神经元分布相对广泛,结果提示下丘脑神经元的激活与刺激方式、强度等相关,单一模式、单一指标来揭示和衡量其功能状态是不完善的。

Y迷宫训练对成年大鼠海马齿状回细胞的增殖作用

目的观察Y迷宫训练对成年大鼠海马齿状回(dentategyrus,DG)神经干细胞/前体细胞的增殖作用。方法通过Y迷宫训练,用5溴2脱氧尿嘧啶核苷(5bromo2deoxyuridine,BrdU)标记增殖细胞,用ABC免疫细胞化学方法观察成年大鼠海马齿状回细胞的增殖情况。结果Y迷宫训练组海马齿状回BrdU阳性细胞数明显多于对照组(P<0.05),且Y迷宫训练成绩的优劣与海马齿状回神经细胞增殖的多少存在相关性,学习成绩良好组齿状回BrdU阳性细胞数显著多于学习成绩低劣组(P<0.05)。结论Y迷宫训练可促进成年大鼠海马齿状回神经干细胞/前体细胞的增殖。

挂金灯镇痛作用的实验观察

目的 运用多种测痛方法观察挂金灯的镇痛作用。方法 5 0 0mg/kg或 80 0mg/kg的挂金灯在灌胃后30min、6 0min或 90min ,分别用扭体法、热板法、电刺激鼠尾 -嘶叫法 ,观察其对痛反应的影响。结果 挂金灯在灌胃后 6 0min能抑制小鼠的扭体反应 ,还能显著延长小鼠舔爪的潜伏期和抑制大鼠的嘶叫反应。 1mg/kg的纳洛酮能翻转挂金灯对大鼠的镇痛作用。

中药止痛胶囊镇痛作用的实验研究

由细辛、白芍、川芎和徐长卿等中药制成的止痛胶囊，呈剂量依赖性抑制小鼠扭体反应和大鼠嘶叫反应。还能抑制热板痛反应和佐剂性关节炎的急性疼痛和慢性疼痛。提示止痛胶囊对不同性质的疼痛都有镇痛作用。

中药复方止痛胶囊的药效学实验研究

目的 研究中药复方止痛胶囊的药效。方法 观察中药复方止痛胶囊镇痛抗炎作用 ,研究其相关抗炎镇痛机制。结果 中药复方止痛胶囊对多种炎症及疼痛模型有较好的抑制作用 ,同时能明显降低AA大鼠疼痛模型血清炎症介质及氧自由基水平 ,提高下丘脑β- 内啡肽含量。 结论 中药复方止痛胶囊具有抗炎镇痛作用 ,其作用机制可能与其降低外周血清炎症介质、氧自由基水平以及提高中枢β-内啡肽含量有关。

损毁下丘脑弓状核、中缝背核和蓝斑对大鼠应激镇痛的影响

本文用不能躲避的间歇脚底电刺激引起大鼠应激,用电刺激鼠尾-嘶叫法测定镇痛效应,研究下丘脑弓状核(脑内β-内啡肽能神经元胞体集中的部位)、中缝背核(脑内5-羟色胺能神经元胞体主要集中的部位之一)和蓝斑(脑内去甲肾上腺素能神经元胞体主要集中的部位之一)与应激镇痛的关系。 用新生大鼠腹腔注射谷氨酸-钠的方法损毁弓状核后,用海人酸和电解两种方法损毁中缝背核或蓝斑后,应激镇痛效应均明显减弱。由于谷氨酸-钠和海人酸只选择性地损毁神经元胞体,故认为脑内的β-内啡肽能神经元、5-羟色胺能神经元和去甲肾上腺素能神经元均参与应激的行为镇痛。

新生大鼠神经干细胞的体外分离和培养

目的改进大鼠神经干细胞的分离和培养方法。方法用出生1～3d的新生大鼠,取脑用刀片剁碎和吸管吹打的机械分离法代替酶消化法。用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞、神经元和星形胶质细胞。结果用机械分离法从新生大鼠脑组织分离神经干细胞的获得率较高,并培养出较多的神经球,还能分化成神经元和星形胶质细胞。结论该方法简便,能得到较多的神经球,细胞获得率也较高。

干细胞移植治疗帕金森病研究进展

帕金森病 (Parkinson’sdisease,PD)是一种人类常见的中枢神经系统退行性疾病 ,主要病理变化是黑质多巴胺神经元损伤 ,是干细胞治疗的最佳适应证之一。动物模型的研究证实 ,干细胞移植可以替代丧失的神经元 ,恢复脑功能和促进脑的自我修复。临床试验显示干细胞移植在PD病人脑部也可达到类似的结果。这些研究展示了干细胞移植临床应用治疗PD的良好前景。然而 ,这样的治疗是否可以永久和完全恢复PD的脑功能仍是一个疑问。

整合素信号通路可能参与大鼠束缚应激后的恢复过程(英文)

目的筛选与束缚应激大鼠应激反应恢复速度相关的基因,探讨应激反应个体恢复的分子机制。方法观察大鼠2小时束缚应激后血浆促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic-hormone,ACTH)及皮质酮的变化规律,根据应激结束后1小时的血浆ACTH及皮质酮下降程度将大鼠分为快速恢复组与慢速恢复组。采用微阵列技术检测快速恢复组与慢速恢复组下丘脑组织基因表达的差异,用实时逆转录-聚合酶链反应验证部分基因的表达差异。结果基因芯片分析结果显示:大部分基因在两组间并无差异表达,在11个差异表达的基因中,快速恢复组中参与整合素信号通路的踝蛋白(talin)、整合素α6和丝/苏氨酸蛋白磷酸酶PP1β催化亚基(serine/threonine pro-tein phosphatase PP1-beta catalytic subunit,PP1B)基因有1.5倍上调,而结合粘附分子1(junctional adhesion mol-ecule 1, F11r)基因有 1.5 倍下调。实时逆转录 - 聚合酶链反应结果与芯片分析结果一致。结论本研究构建了束缚应激大鼠恢复过程的下丘脑基因表达谱,结果提示整合素信号通路可能参与应激的恢复过程。

可乐定降低眼内压的中枢肾上腺素能机制

目的 探讨可乐定对眼内压 (IOP)的影响以及中枢α 肾上腺素能神经元作用的机制。方法 3种不同方法给药 :(1)眼球表面滴注可乐定 ;(2 )侧脑室内微量注射育亨宾或哌唑嗪后 ,再分别用可乐定侧脑室内注射和滴眼 ;(3)蓝斑内微量注射可乐定 ,分别观察IOP的变化。结果 可乐定 3种给药方法均有明显降低IOP的效应 ,脑室注射育亨宾能翻转可乐定脑室注射和滴眼降低IOP的效应。结论 通过外周或中枢给可乐定都能降低IOP ,说明中枢α2

侧脑室注射6-OHDA对寒冷应激诱导的大鼠血浆ACTH含量的改变

目的 观察侧脑室注射 6 OHDA对 4℃寒冷应激诱导的血浆ACTH含量的改变。方法 成年Wistar雄性大鼠 3 0只 ,随机分成 5组 (n =6) ,分别为空白对照组、寒冷应激组、6 羟基多巴胺 (6 OHDA)非应激组、6 OHDA +寒冷应激组、配药液 +寒冷应激组。所有动物处理后立即取静脉血用放射免疫法测定其血浆ACTH含量。结果 4℃寒冷应激 4h后血浆ACTH含量明显升高 ,与正常对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1) :6 OHDA侧脑室注射后再寒冷应激 ,血浆ACTH含量不再明显升高。

南蛇藤总萜诱导自噬抑制结直肠癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨南蛇藤总萜(COE)是否通过诱导自噬来抑制结直肠癌细胞增殖。方法:用不同浓度的COE处理体外培养的大肠癌HT-29细胞,噻唑蓝(MTT)法检查细胞存活率,透射电镜(TEM)观察细胞形态,免疫印迹法(Western blot)检测COE对细胞自噬相关蛋白表达的影响,并采用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合COE干预HT-29细胞,用吖啶橙染色细胞、MTT法检测3-MA对COE抑制HT-29细胞增殖的影响。结果:COE抑制HT-29细胞的增殖,作用24h的IC50为156μg/m L;随着COE浓度的升高,TEM示细胞中自噬体明显增多,和COE治疗组比较,COE联合3-MA组的细胞生存率升高,而自噬泡(AVO)的数量显著下降,微管相关蛋白-Ⅱ(LC3-Ⅱ)表达也降低。结论:COE可能通过上调Bcl-2同源结构域蛋白抗体-1(Beclin-1)和LC3-Ⅱ的表达来增加HT-29细胞的自噬活性,从而抑制HT-29细胞的增殖作用。