非小细胞肺癌中抑癌基因p16/MTS_1的基因突变和表达缺失

１９９４年Ｋａｍｂ等［１］在人染色体９ｐ２１发现一个新的抑癌基因ｐ１６，由于该基因在多种类型肿瘤细胞株中频繁缺失，成为近年来肿瘤分子生物学的研究热点。在人原发性非小细胞肺癌中，ｐ１６基因失活被认为与肿瘤的发生密切相关［２］。作者采用免疫组化技术和ＰＣ...

抗肿瘤iRNA诱导人胃癌细胞程序性死亡的实验研究

一般认为抗肿瘤免疫核糖核酸(iRNA)只有通过淋巴细胞才能发挥生物效应作用，有报道．iRNA在没有外加淋巴细胞的情况下．对小鼠肿瘤细胞有直接杀伤作用，我们以人胃癌NKM-45细胞免疫山羊，制备iRNA，发现其对NKM-45细胞同样具有细胞毒性作用，进一步研究发现，这种杀伤作用可能与iRNA诱导人胃癌细胞程序性死亡有关，现将结果报告如下。

人巨细胞病毒感染大鼠肠胃粘膜组织

目的探讨人巨细胞病毒（HumanCytomegalovirus,HCMV）感染在胃肠疾病中的作用．方法SD大鼠40只，随机分为正常对照组10只，灭活病毒对照组10只，病毒组20只，接种途经为尾静脉注射，接种病毒量为104TCID50／只．标准饲料喂养，50d后处死动物，期间死亡动物随时解剖，取胃、肠、肝组织做病理学检测和HCMV特异抗原定位检测（免疫组化法），肝组织作病毒重分离，并将重分离标本进行电镜检查和HCMV抗原定性检查（ELASA法）．结果正常对照组、灭活病毒组动物生存好，胃、肠和肝组织未见异常；接种病毒组动物于接种病毒后12d—19d内病死7只，存活动物50d后解剖，病理学检查胃、肠粘膜可见变性或坏死灶，严重者坏死深达平滑肌层，时见淋巴细胞浸润．肝组织有充血，时见出血灶，有肝细胞坏死，坏死灶周围肝细胞里双核现象．抗原定位检测发现在胃、肠粘膜细胞、肝细胞、胆管上皮细胞有HCMV抗原阳性表达；将死于接种的大鼠肝组织进行病毒重分离，培养12d后细胞出现病变，电镜检查在细胞核内发现密集病毒颗粒群，抗原定性分析在培养物中查到较高滴度的HCMV抗原．结论HCMV可以感染大鼠胃肠粘膜和肝细胞，引起以变性。坏死和淋巴细胞浸润为特征的病理损伤．

非小细胞肺癌中p16/MTS1基因失活及其意义

目的 :研究抑癌基因p16 /MTS1基因失活与肺癌发生发展的关系。方法 :采用双重PCR和免疫组化技术分析 48例原发性非小细胞肺癌中p16基因存在状态。结果 :2 5例p16蛋白表达阴性 (5 2 1% ) ,其中 14例p16基因第二外显子缺失。有淋巴结转移者和无淋巴结转移者的P16蛋白表达阴性率有显著性差异。p16基因缺失率亦如此。肺鳞癌中p16蛋白表达阴性率显著高于腺癌。结论 :p16基因存在状态与非小细胞肺癌的病理组织学分型有关 。

健康免疫状态家兔接种HCMV AD_(169)株死亡原因的初步探讨

本研究将人巨细胞病毒ＡＤ１６９株以１０３ＴＣＩＤ５０接种于新西兰兔后，５～２０ｄ内动物死亡３３．３３％。将死亡动物可疑器官作病理学检查发现，早期死亡动物双肺广泛充满浆液性渗出物，稍后死亡动物肺脏肺泡壁增厚，尘细胞增多，伴有不同程度渗出性病变，肝脏、肾脏出现灶状变性坏死灶，人巨细胞病毒抗原定位检测在上述受到损伤的组织细胞中查到ＨＣＭＶ特异抗原，表明人巨细胞病毒感染家兔造成的肺脏、肝脏、肾脏的严重损害。

分泌抗p185合成多肽McAb杂交瘤细胞系的建立

用多肽固相合成仪合成人癌基因产物ｐ１８５ＨＥＲ－２（即ｐ１８５）胞内区的肽段，以之与沙门氏裸菌偶联制成免疫原，经脾内、腹腔、静脉途径免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，获得具有高抗体活性的脾细胞，后者与ＳＰ２／０融合，筛选出５株杂交瘤细胞系并对其分泌的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）特性进行了初步分析，ＥＬＩＳＡ检测腹水效价为１０－４～１０－６，用多肽和沙门氏裸菌分别进行中和试验，多肽抑制率在５０％以上，而沙门氏裸菌则不能中和抗体反应。测定其中两株ＭｃＡｂ亲和常数（Ｋａ）分别为２．５×１０７Ｍ－１，５．０×１０８Ｍ－１。

c-erbB-2和c-myc癌基因在食管癌组织中的扩增研究

ｃ┐ｅｒｂＢ┐２和ｃ┐ｍｙｃ癌基因在食管癌组织中的扩增研究魏海明吴惠联郭进林孟红秦立增李焱孙广莲作者单位：山东省医学科学院基础医学研究所（济南２５００６２）关键词食管肿瘤癌基因基因扩增原位杂交有关食管癌基因的研究显示，遗传和环境等多种因素可导致正常细...

自制抗P^(185)单克隆抗体协同CD_3AK细胞杀伤卵巢癌细胞株的实验研究

肿瘤生物治疗中，如用（淋巴因子激活的杀伤ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒＬＡＫ）细胞治疗需要大剂量的（白细胞介素－２ｉｎ－ｔｅｒｌｅｕｋｉｎｅ－２，ＩＬ－２），不仅价格昂贵，而且有严重的副作用。脏瘤浸润淋巴细胞（ｔｕ－ｍｏｒｉｎｆｉｌ...

c—erbB—2和c—myc癌基因在人胃癌组织中扩增的研究

目的 研究c—erbB—2和c—myc癌基因在人胃癌组织中的扩增意义。方法 应用原位杂交技术检测35例胃癌标本中c—erbB—2和c—myc的扩增情况,同时应用斑点杂交技术和免疫组化技术(ABC法)检测人胃癌NKM—45细胞中c—erbB—2、P53、P21和P62^(c-myc)的扩增和过度表达情况。结果 c—erbB—2和c—myc在人胃癌中的扩增率分别为31.4％和37.1％,两基因的扩增具有显著相关性(P<0.005),并发现在NKM—45细胞中同时有P53、P21、P62^(c-myc)过度表达和c—erbB—2扩增。结论 c—erbB—2和c—myc基因扩增及P53、P21、P62^(c-myc)过度表达是胃癌发生过程中的一个重要的生物学因素。

Gene32蛋白对PCR产量的影

在临床检测和科研中，有时因引物对原因，ＰＣＲ产量低，不利于结果观察。在ＰＣＲ检测血清ＨＢＶ基因的同时，加入Ｇｅｎｅ３２蛋白，提高了ＰＣＲ产量和灵敏度。１材料与方法１．１基因３２蛋白（Ｇｅｎｅ３２ｐｒｏｔｅｉｎ）（Ｐｈａｒｍａｃｉａ），２．５ｍｇ／ｍｌ...

分泌抗巨细胞病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立

用CMV-AD_(169)病毒株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP_(2/0)细胞融合,获得5株分泌抗CMV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,其细胞培养上清液效价(ELISA)为1∶32～1∶128,腹水效价为10~4～10~5,经证实McAb为IgG2a或IgM,均具有HCMV种特异性,可作为特异、敏感的免疫试剂,用于巨细胞病毒感染的早期快速诊断。

PCR检测HBVDNA对HBsAg无症状携带者传染性的监测

用多聚酶链反应和斑点杂交技术检测了５０例ＨＢｓＡｇ无症状携带者血清中ＨＢＶＤＮＡ，检出率分别为５０％（２５／５０）和５８％（２９／５０）。抗－ＨＢｃ、抗－ＨＢｅ和ＨＢｅＡｇ阳性者ＨＢＶＤＮＡ的检出率高于阴性者。单，ＮＨＢｓＡｇ阳性无症状携带者ＨＢＶＤＮＡ在血中呈不同程度地波动，其排毒情况无明显规律可循。

Nama1va细胞与人白细胞干扰素抗单纯疱疹病毒的研究

用本室自制的Namalva细胞与人白细胞干扰素(IFN),对培养在微孔塑料培养板的人胚肺成纤维细胞(HEL)进行病毒生长抑制试验。结果:Namalva-IFN在750U/ml、人白细胞IFN在500U/ml浓度时,可抑制100TCID_(50)单纯疤疹病毒Ⅰ型(HSV_1)的生长繁殖。在联合用药的细胞培养抑毒试验中,Namalva-IFN与无环鸟苷表现为协同作用,与病毒唑表现为相加作用。

一种简易实用的CO_2培养装置

近年来由于杂交瘤技术和细胞培养方法的发展,CO2培养箱的使用日益广泛。目前进口或国产的CO2培养箱价格昂贵,货源较缺,并需配CO2钢瓶,因此某些地区的一般实验室购置和使用常有困难。有人采用烛罐法或通过范氏气体定量器通CO2至厌氧罐法作为替代,但有CO2量不易控制或操作较繁复之弊。本文介绍我们试制的一种用化学法产生CO2的简易CO2培养装置。

LAK细胞冻融液对肿瘤细胞直接杀伤作用观察

本文报道以ＭＴＴ法检测ＬＡＫ细胞冻融液对肿瘤细胞直接杀伤作用，确立检测过程中的某些最适条件。发现以Ｋ５６２细胞和ＮＫＭ－４５细胞为靶细胞时，试验最适细胞浓度分别为２×１０６／ｍｌ和１．５×１０６／ｍｌ。为阻断检测过程中肿瘤细胞增殖对结果的影响，需加入终浓度为ｌｕｇ／ｍｌ的放线菌素Ｄ。实验结果提示，ＬＡＫ细胞可能通过释放某些杀伤分子介导对肿瘤细胞的直接杀伤作用。

BA－ELISA快速检测鼻咽分泌物中合胞病毒抗原的研究

本文采用自制的ＲＳＶ免疫血清以及国产试剂，通过特异性、敏感度和重复性试验，建立了检测ＲＳＶ抗原的生物素－亲和素－酶联兔疫吸附试验（ＢＡ－ＥＬＩＳＡ）。该法比常规的ＥＬＩＳＡ法敏感４倍。用此法检测５８份肺炎和毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物（ＮＰＳ）中的ＲＳＶ抗原，结果与组织培养（ＴＣ）分离ＲＳＶ结果比较：其特异性和敏感性分别为９１．２％和９５．８％，两法诊断符合率为９３．１％。结果表明本法不但敏感、特异，而且简便、快速、经济，在收到标本２４小时即可得到结果，是一种适应于基层推广的ＲＳＶ感染诊断方法。

单克隆与多克隆抗体快速诊断轮状病毒性胃肠炎的比较研究

轮状病毒胃肠炎是广为流行的急性传染病,严重影响婴幼儿的生命与健康。实验诊断方法多,比较繁复,使用的动物免疫血清诊断试剂,又有制备较困难、效价低,且受非特异性因素影响等缺点,为探索更为快速简易和特异敏感的方法,我们制备了抗轮状病毒单克隆抗体(McAb),用之与多克隆抗体(PcAb)对比,进行了快诊轮状病毒胃肠炎的比较研究。