固定化洋葱假胞菌G63脂肪酶转酯化大豆油合成生物柴油

对固定化洋葱假胞菌G63脂肪酶催化大豆油和甲醇合成生物柴油的工艺进行了研究。通过甲基三甲氧基硅和四甲氧基硅缩水和水解反应形成的硅胶包埋固定化洋葱假胞菌G63脂肪酶。研究了酶用量、醇油摩尔比、反应温度、含水量对合成生物柴油的影响。优化的转酯化反应条件为:醇油摩尔比4:1,含水量5%,固定化脂肪酶15%,反应温度50℃,48h后转化率可以达到96.4%。固定化脂肪酶经多次使用后活力未见明显下降。

山楂提取液的杀菌效果及稳定性试验

目的了解山楂提取液的杀菌效果及其稳定性。方法采用悬液定量杀菌试验法对其进行了试验观察。结果用体积分数50%山楂提取液对红色毛癣菌和狗小孢子菌作用20min,平均杀灭率为97%以上;用体积分数25%山楂提取液对金黄色葡萄球菌作用5min,平均杀灭率达到99.9%以上。菌悬液内加入体积分数25%小牛血清,显示出对山楂提取液杀灭金黄色葡萄球菌效果有轻微影响。山楂提取液经54℃条件储存14d,对金黄色葡萄球菌的杀灭率基本无变化。结论山楂提取液具有良好的杀菌效果,有机物对其杀菌效果有轻微影响,储存性能稳定。

洋葱假单胞菌G63脂肪酶基因及其伴侣基因的克隆和同源高效表达

从油污土壤中筛选到一株脂肪酶活性较高的洋葱假单胞菌（Pseudomonas cepacia）G63。运用PCR的方法从该菌株中克隆了脂肪酶基因（lip A）及其伴侣基因（lipB）。该脂肪酶基因开放式阅读框（ORF）为1092bp，编码364个氨基酸残基。经KpnI／HindiⅢ酶切，将其克隆到广泛宿主质粒pBBR1Tp载体上，构建成质粒pBBR1-lipAB。通过三亲杂交，在辅助质粒pRK2013的帮助下，转入原宿主菌P．cepaciaG63中，构建成洳A基因同源高效表达的基因工程菌。该菌株在连续转接5次，培养45h后质粒保持率为82．6％，适用于规模化发酵生产。摇床发酵表明，工程菌在60h时酶活达到150．63U／mL，较原始菌株提高3．6倍。

钉螺血蓝蛋白的提取与性质研究

利用超高速冷冻离心和Sepharose 4B凝胶过滤两步法从日本血吸虫中间寄主-湖北钉螺血淋巴中提取获得一种含铜呼吸蛋白-钉螺血蓝蛋白.该血蓝蛋白具有典型的血蓝蛋白基本特征,含铜量为0.23%,在340nm处观测到该蛋白的紫外特征吸收峰.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测该呼吸蛋白由两种蛋白质亚基组成,分子量分别为400KDa和250KDa.透射电子显微镜测定结果证实其四级结构为中凹的圆柱体,且以单体、二聚体和多聚体形式共存于血淋巴中.

固定化脂肪酶转酯化菜籽油合成生物柴油

采用无溶剂体系,对固定化洋葱假胞菌脂肪酶催化转酯化菜籽油和甲醇合成生物柴油的工艺进行了考察。优化的转酯化反应条件为:醇油比4∶1,含水量4%,固定化脂肪酶10%,反应温度50℃,12h后转化率达到了93.6%。固定化脂肪酶具有良好的操作稳定性,经多次使用后活力未见显著的下降。

几种杀螺细菌的筛选与功效研究

湖北钉螺是日本血吸虫的唯一中间宿主,生物杀螺具有环保、成本较低以及对钉螺定向特异的优点。从鄱阳湖草洲土壤及病螺体内分离出4株对钉螺具有高毒性作用的细菌。革兰氏染色和显微镜观察表明,一株为芽孢杆菌,其余3株均为革兰氏阴性杆菌。16s rDNA扩增及序列比对鉴定其种属类型,结果显示分别为Enterobactersp.、B.cereus、S.putrefaciens和Aeromonassp.。杀螺研究结果表明,4株细菌的发酵液、发酵上清液和菌体对钉螺均表现出不同程度的毒杀作用,其中S.putrefaciens和Aeromonassp.的杀螺效果最好,72h发酵液和发酵上清液对钉螺的毒杀作用分别达100%和95%以上。各细菌发酵上清SDS-PAGE结果发现了丰富蛋白带,推测这些蛋白中存在对钉螺具有毒杀功效的组分。

谈谈县级机构改革中必须重点解决的几个问题

党的十四大把机构改革、精兵简政列为党的十大任务之一,据此,各地进行了具体部署,尤其是把县级改革放到了重要位置。近年来,县级机构改革的试点工作已全面展开。从试点的情况来看,县级机构改革应当重点抓住哪些问题?在改革过程中,这些问题如何解决?现就此谈些看法:一、制定机构改革方案要科学、全面,符合本地实际。制定机构改革方案就是按照上级机构改革的要求和本地实际,制定出机构拆并、干部管理、人员分流、资产调拨。

大海托起了大连 大连扮靓了大海

大连象好多城市一样,濒临大海,也和好多城市不一样,把海的神韵表现得淋漓尽致:海的气势,海的秀丽溶进了大连的城市整体设计,溶进了大连的每一幢建筑。古往今来,大连人为她打扮,为她梳妆,使她越发青春秀质,亮丽动人。是海的诱惑,也是大连建设成就的诱惑,人们想来大连,想多来大连,

尿激酶(uPA)化学合成抑制剂

胞外蛋白的水解是恶性肿瘤细胞侵袭和转移的必要条件,各种蛋白酶的水解反应降解细胞外基质,破坏细胞/细胞间的联系以适应细胞的迁移。尿激酶型纤溶酶原激活物(尿激酶,urokinase-type plasminogen activator,uPA)激活不具有丝氨酸蛋白酶活性的纤溶酶原为活性纤溶酶,在保持血流畅通与防止血栓的形成中具有重要的作用。此外,活性尿激酶降解细胞外基质,激活多种基质金属蛋白酶,以适应肿瘤细胞的侵袭、扩散和转移。抑制尿激酶的活性被公认为是抑制癌症转移的有效方法,其中合成小分子uPA抑制剂成为抗癌治疗中的新理念。本文综述了合成uPA抑制剂的研究现状。

4种药物灭钉螺效果比较

湖北钉螺是日本血吸虫的唯一中间宿主,药物杀螺仍是控制钉螺的主要方法,氯硝柳胺、五氯酚钠虽最常用,效果较好但存在毒性较高,水溶性差等问题。基于此,选取了4种药物氯硝柳胺、五氯酚钠、溴乙酰基儿茶酚、氯乙酰基儿茶酚,并对其灭钉螺效果进行比较。结果表明:高浓度的溴乙酰基儿茶酚灭螺效果也很好,但低浓度效果不佳。氯乙酰基儿茶酚效果比溴乙酰基儿茶酚好一些,这两种药物灭钉螺效果虽然都比五氯酚钠、氯硝柳胺差,但是两者均有一定的灭钉螺效果,有进一步研究的价值。

毕赤酵母中外源表达脂肪酰-CoA还原酶生产脂肪醇

【目的】通过在毕赤酵母Komagataella pastoris GS115中外源表达来源于霍霍巴[Simmondsia chinensis(Jojoba)]的脂肪酰-Co A还原酶Jojoba FAR,利用微生物发酵生产脂肪醇。【方法】以质粒p RL105为模板PCR扩增获得霍霍巴脂肪酰-Co A还原酶的编码基因,以p GAPZαA为载体构建重组表达质粒p GAP-far,并通过电转化法转入K.pastoris GS115,筛选转化子并发酵,气相色谱-质谱联用检测发酵产物。【结果】构建了毕赤酵母重组菌株p GAPZ-far-GS115,通过摇瓶发酵检测到脂肪醇的合成。随后在7 L规模的发酵罐上发酵验证,得到脂肪醇产量为134.74 mg/L,产率为1.22 mg/(L·h)。【结论】实现了脂肪醇在毕赤酵母中的生物合成,为工业上利用毕赤酵母生产脂肪醇奠定了一定基础。

银杏愈伤组织培养形态建成的研究

用银杏优良无性系的嫩茎作为外植体进行离体培养，诱导产生愈伤组织，经分化诱导，获得丛生芽和不定根，培育出完整的银杏植株，并选出了外植体腋芽萌动率高和愈伤组织形成较好的基本培养基。