利福昔明对奶牛子宫内膜炎常见病原菌的体外抗菌活性评价

旨在测定利福昔明对奶牛子宫内膜炎主要病原菌抗菌活性,为评价防治子宫炎疗效提供体外依据。采用微量肉汤稀释法,测定利福昔明对河南3个牛场60头患子宫内膜炎奶牛子宫液分离的主要病原菌的最小抑菌浓度（MIC）,与临床常用的土霉素进行对比。结果,利福昔明对葡萄球菌的MIC在0.015-32μg/m L之间,对链球菌的MIC在0.015-16μg/m L之间,对大肠杆菌的MIC为2-32μg/m L之间,对化脓隐秘杆菌的MIC在0.25-4μg/m L之间,对其他细菌的MIC50和MIC90均为16μg/m L。土霉素对葡萄球菌的MIC在1-64μg/m L之间,对链球菌的MIC为0.5-64μg/m L,对大肠杆菌的MIC为2-8μg/m L;对化脓隐秘杆菌MIC为0.5-8μg/m L,对其他细菌的MIC为4-64μg/m L。结果表明,利福昔明对奶牛子宫内膜炎的主要病原菌有较强抗菌活性,对革兰阳性菌的抗菌作用优于革兰阴性菌,且对大部分病原菌的抗菌活性优于土霉素。

内毒素联合替米考星致鸡原代肝细胞损伤机制的研究

旨在探索内毒素(LPS)和替米考星联合诱导鸡肝细胞损伤的机制。选取400g左右海蓝公鸡,采用改良二步罐流法分离肝细胞。用噻唑盐比色法(MTT法)测定细胞存活率,改良赖氏法测定细胞培养液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量并筛选出LPS、替米考星单独致鸡肝细胞损伤的最佳剂量和LPS与替米考星联合致鸡肝细胞损伤的最佳剂量,探讨此复合式肝损伤过程中的相互影响。Hoechest 33342对肝细胞染色、Caspase-3活性的测定和流式细胞仪来探究细胞是否出现凋亡。结果表明:LPS浓度为30μg/mL,替米考星浓度为120μg/mL时,肝细胞存活率极显著降低(P<0.01);检测上清中ALT、AST出现极显著差异(P<0.01),肝细胞损伤显著;细胞荧光照片可看出,凋亡细胞明显增多,Caspase-3活性明显升高,流式细胞仪检测细胞凋亡率明显升高。结果提示,内毒素和替米考星可单独诱发鸡肝细胞损伤并造成细胞凋亡,二者联合可能会使损伤作用增强。

复方甘草酸单铵保护内毒素/恩诺沙星诱导的鸡肝细胞损伤机制研究

为了探索内毒素（LPS）和恩诺沙星（ENR）联合诱导鸡原代肝细胞损伤机制以及复方甘草酸单铵（CAG）的保护作用,采用改良二步灌流法分离鸡原代肝细胞,MTT法测定细胞存活率并且筛选出LPS联合ENR（LPS/ENR）致鸡肝细胞损伤的最佳剂量和CAG的保护浓度,收集细胞上清液测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）和谷氨酸氨基转移酶（AST）的含量,流式细胞计数仪测定细胞凋亡率,RT-qPCR检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）、Caspase-9、细胞色素-C（Cyt-C）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的mRNA表达水平。结果显示：LPS/ENR的最佳浓度为（30＋80）μg/mL;与对照组相比,上清中ALT（P〈0.01）和AST（P〈0.01）极显著升高;流式细胞计数显示LPS/ENR处理后早期细胞凋亡率极显著升高（P〈0.01）;在CAG处理组,早期细胞凋亡率成浓度依赖性降低;LPS/ENR组Caspase-3（P〈0.05）、Caspase-9（P〈0.01）、Cyt-1 C（P〈0.01）、Bax（P〈0.05）的mRNA表达水平显著升高,Bcl-2明显降低。结果表明：LPS/ENR诱导的肝细胞损伤可能是通过凋亡实现的,CAG能够预防这种损伤。