麋鹿被毛微量元素、重金属含量及对环境污染的监测作用

哺乳动物被毛微量元素和重金属元素含量能够反映其生活状态和栖息地状况,是环境监测中重要的生物化学指示物。对北京南海子和浙江临安两地麋鹿(Elaphurus davidianus)种群被毛中的10种重金属和34种微量元素进行测定,以期探讨麋鹿被毛微量元素和重金属含量在栖息环境监测中的可行性。结果表明:除Re元素外,其余43种元素在麋鹿被毛中均被检出,统计分析表明Li、Be、Sc、V、Co、Ga、Rb、Ir、Mo、Cd、Cs、Ba、La、Ce、Pr、Nd、Sm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu、Tl、Bi、Th、U、Nb、Ta、Zr和Hf 34种元素为麋鹿被毛的特征元素;与北京南海子麋鹿种群相比,浙江临安麋鹿种群被毛中的微量元素Sr、In、Sb、W、Bi、U和重金属元素Zn、Cu、Cr、Pb、Cd含量更少,其余32种元素含量均高于北京南海子麋鹿种群;独立样本t检验分析表明,麋鹿被毛微量元素和重金属元素含量存在地域差异性,仅Cr(p=0.064)、Ni(p=0.769)、Mo(p=0.129)、Tl(p=0.065)、Zr(p=0.138)和Hf(p=0.057)6种元素差异不显著,其余37种元素差异均显著;北京南海子和浙江临安麋鹿种群的栖息环境和食物均未受到Zn、Cu、Cr、Pb、Cd、V、Co、Ni、Sb和Tl 10种重金属元素污染的威胁。研究表明,麋鹿被毛可作为栖息环境重金属污染的非损伤监测指示材料。

基于简化基因组测序的麋鹿遗传资源多样性及种群结构分析

奠基者效应会打破种群遗传结构,使原有种群动态特征失去平衡,加剧遗传多样性的丧失,严重影响物种重引入的遗传多样性和遗传结构。中国麋鹿(Elaphurus davidianus)奠基种群为北京南海子麋鹿苑和江苏大丰麋鹿国家级自然保护区两大种群。为分析中国麋鹿奠基者效应,探究资源遗传多样性及种群结构,揭示中国麋鹿适应环境的遗传机制,以中国两大麋鹿奠基种群为研究对象,基于简化基因组测序,研究北京和江苏2个地区麋鹿的遗传多样性、种群遗传结构及亲缘关系。结果表明:2个种群(18只)共筛选出高质量多态性SNP位点1456457个;北京麋鹿苑、江苏大丰的麋鹿观测杂合度分别为0.59~0.68和0.63~0.71;北京麋鹿苑的麋鹿遗传多样性略低于江苏大丰,奠基者效应导致2个种群的遗传多样性水平较低,且对于不同重引入种群的影响也不相同。通过SNP标记对北京麋鹿苑与江苏大丰2个麋鹿种群进行遗传分化分析,发现2个种群间平均FST为0.085,表明2个种群间存在中等程度的遗传分化。经neighbor-joining系统发育树和遗传结构分析,进一步验证北京麋鹿苑与江苏大丰的麋鹿已有初步分化的现象,推测可能是2个地区奠基者的遗传差异经随机漂变导致。

茄子叶际固氮菌的分离鉴定·培养特性及抑菌活性

采用Ashby无氮培养基从茄子叶际分离得到1株具有高效固氮性能的自生固氮菌QZ-1,经16S rDNA序列鉴定,该菌株与克雷伯氏菌属各菌株同源性高达99%以上,初步鉴定为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.),其在酵母粉为碳源、pH为5.0时生长最好。菌株QZ-1具有广谱抗真菌活性,对油菜菌核病、葡萄炭疽病、番茄灰霉病抑制效果可达40%以上。自生固氮菌QZ-1具有固氮和生防作用,可为进一步研发优良的叶际固氮菌肥提供微生物资源。

8种除草剂(混剂)对青稞田阔叶杂草的防效及其安全性评价

为筛选对青稞田阔叶杂草防除效果好且对青稞安全的除草剂,本研究通过田间小区试验分析8种除草剂(混剂)对青稞田阔叶杂草的防除效果。结果表明:药后20d,8种除草剂(混剂)对青稞田阔叶杂草的株防效均达70%以上;药后40d,株防效均达80%以上,鲜重防效均达85%以上;青稞生长中后期8种除草剂(混剂)最终控制防效均达84%以上。除处理8(187.5mL/hm^(2)7.5%啶磺草胺WDG+150mL/hm^(2)87.5%2,4-滴异辛酯EC+45g/hm^(2)20%苯磺隆WP+助剂混剂)区的青稞在药后25d内表现出一定药害,25d后黄斑消失,其余各药剂处理区的青稞生长正常,与空白对照区的青稞长势一致。此外,本研究得出8种除草剂(混剂)部分处理之间防除效果存在一定差异,其中处理8的最终控制防效最佳,显著高于其他7个处理,其次为处理7(300mL/hm^(2)87.5%2,4-滴异辛酯EC+45g/hm^(2)20%苯磺隆WP+助剂混剂)。综上,考虑8种除草剂(混剂)对青稞的安全性及对阔叶杂草的防除效果,推荐处理7混剂推广应用于青稞田阔叶杂草防除。

辣椒叶际固氮菌分离筛选及抑菌活性

为后续研制叶面微生物菌肥提供优良固氮菌种,以辣椒为研究对象,利用选择性培养基分离、筛选辣椒叶际固氮细菌,测定其固氮能力和植物病原菌的拮抗能力并对性能优良的菌株进行16S rDNA分子生物学鉴定。研究表明,从辣椒叶际共分离得到2株具有高效固氮性能的自生固氮菌LJ-1和LJ-2,分别鉴定为不动杆菌(Acinetobacter sp.)和根瘤菌(Rhizobium sp.),固氮酶活性分别达93.26和102.23 U·L^(-1)。两株菌具有广谱抗真菌活性和耐酸碱能力,对油菜菌核病菌、番茄灰霉病菌和棉花立枯病菌抑制效果可达50%以上。因此,辣椒叶际固氮菌LJ-1和LJ-2是具有固氮和生防作用的多功能细菌,可为进一步研发优良的叶际固氮菌肥提供微生物资源。

C型产气荚膜梭菌感染鹿肠道中关键基因和途径的转录组分析

鹿的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C.perfringens)病主要表现为肠毒血症,致死率高。本研究旨在探究C型产气荚膜梭菌感染鹿肠道的关键基因和途径。通过构建C型产气荚膜梭菌感染鹿空肠结扎环模型,HE染色检测C型产气荚膜梭菌感染后空肠的病理学变化,采用Illumina NovaSeq对C型产气荚膜梭菌感染鹿肠道进行转录组测序,并利用qPCR技术进一步验证部分差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs);最后通过STRING网站预测多基因蛋白互作网络。结果显示:形态学分析显示,产气荚膜梭菌感染后鹿肠道组织出现明显的坏死和出血。转录组分析显示,一共存在705个差异表达基因,其中,在感染组肠道中有276个上调的差异基因,有429个下调的差异基因。GO富集分析显示,DEGs主要富集在生物调节、对刺激的反应和免疫系统过程;KEGG富集分析显示,DEGs富集的通路主要是T细胞受体信号传导途径、Toll样受体信号通路和造血细胞谱系等,造成肠道损伤和出血,促进鹿肠毒血症的进程。此外,qPCR结果证实了分析结果准确可信。DEGs蛋白互作分析结果表明TLR6、CLDN1、CD3E、IL1A和CCL20与其他蛋白有较多互作关系,并且GO分析和KEGG分析显著富集的通路高度重合。其中,TLR6可能通过抑制紧密连接蛋白表达和免疫炎症反应在鹿产气荚膜梭菌诱导的肠毒血症中发挥关键作用。综上所述,C型产气荚膜梭菌通过破坏细胞膜,并抑制紧密连接蛋白表达,诱导免疫炎症反应,造成肠道出血和损伤。本研究为鹿感染产气荚膜梭菌后调控的分子机制提供了新的思路,为该病的治疗提供理论基础。

出芽短梗霉菌株PA-2胁迫下藜qRT-PCR内参基因的筛选与验证

为筛选适合出芽短梗霉菌株PA-2胁迫下藜中稳定表达的内参基因,在转录组数据(NCBI登录号为:SRA:SRR12674257)分析的基础上,以PA-2不同时间胁迫的藜叶片为材料,分析藜中ACT-1、TUB-1、GAPDH、eEF1α、eIF3、UBQ、PTB、COX10、UPL6、TIP41L、RAN-B1和IDH-5等12个内参基因的表达水平,并利用ΔCt、GeNorm、NormFinder、BestKeeper及RefFinder分析候选内参基因的表达稳定性。结果表明,内参基因COX10是PA-2不同时间胁迫下藜中最稳定的内参基因,最优组合是COX10+eEF1α。通过分析藜ACC基因的相对表达水平,验证了内参基因的可靠性,为今后杂草藜胁迫响应基因的表达分析提供了参考基因和理论依据。

链格孢菌DT-XRKA菌株的除草活性及对作物的安全性

从青海省大通县达隆村农田采集自然感病的植物叶片并分离出真菌菌株,以密花香薷为靶标草,通过离体叶片和温室盆栽试验以及作物安全性评价,筛选获得1株具有较好除草活性的生防菌DT-XRKA。结果表明,离体叶片接种DT-XRKA 7 d后,密花香薷叶片上出现产3~4倍于菌饼大小的灰褐色病斑,病斑面积达到了整个叶片的50%以上,在接种处可见大量灰褐色的菌丝,中心黑色,边缘褐色,且叶片开始逐渐失绿变黄,病级达到5级。不同浓度(1.47×10^(1)~1.47×10^(4)个/mL)的DT-XRKA孢子悬浮液对密花香薷的发病率达到67.84%~96.42%,病情指数为51.11~97.97,鲜质量防效达到52.44%~82.67%。作物安全性评价结果表明,DT-XRKA菌株孢子悬浮液对油菜、白菜、番茄、黄瓜和辣椒安全。经形态学特征和rDNA-ITS序列分析将DT-XRKA鉴定为链格孢Alternaria alternata。

棉花立枯病拮抗细菌的分离鉴定及抑菌活性

为获取对棉花立枯病具有生防作用的细菌,从棉田土壤中筛选出1株高效抑制立枯丝核菌的拮抗细菌W1,通过形态学特征结合16S rDNA序列分析鉴定其分类地位,并采用平板对峙法分析其抑菌活性。结果表明,拮抗细菌W1经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其对立枯丝核菌具有稳定的抑菌作用,发酵原液的抑菌率为82.12%,稀释5倍的无菌发酵液和菌体破碎液抑菌率分别为42.54%和46.15%。抑菌活性受培养基成分影响,BPA培养基的发酵液抑菌率最高,达98.34%,NA培养基抑菌率仅为17.12%。抑菌活性物质在80℃、中性和偏碱性条件下具有稳定性,对蛋白酶K处理不敏感。显微观察发现,菌株W1的主要拮抗机理是通过产生拮抗物质造成病原菌的菌丝消融、菌丝体断裂、扭曲和畸形。结果表明拮抗细菌W1是具有潜在应用前景的防治棉花立枯病及其他植物真菌病害的菌株资源。

枸杞根腐致病菌及拮抗菌的分离鉴定

旨在探索枸杞根腐病发生地根际土壤生防细菌资源,为该病的防治提供理论依据。采用组织分离法分离枸杞根腐致病菌,对其进行形态学、分子生物学鉴定和柯赫氏法则验证;再利用平板对峙法,以分离出的病原菌为靶标,筛选具有拮抗效果的菌株,对其进行鉴定。结果表明:从青海省海西蒙古族藏族自治州主要栽培枸杞林中分离鉴定出4种致病菌,分别为黄色镰刀菌(Fusarium culmorum)、三线镰刀菌(F.tricinctum)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、木贼镰刀菌(F.equiseti);经筛选,有8株生防细菌对4种病原菌具有不同程度的拮抗效果,其中,抑菌效果最好的是QH-588菌株,其抑制率在36.09%~51.79%;经形态学和16S rDNA/Gyr B基因分析鉴定,其中1株为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus),5株为枯草芽孢杆菌(B.subtilis),2株为短小芽孢杆菌(B.pumilus)。在国内首次报道了三线镰刀菌为枸杞根腐病病原菌,筛选出的生防细菌在室内对枸杞根腐病的4种病原均具有较好的拮抗效果,可作为防治青海省枸杞根腐病的候选菌株。

瑞香狼毒和麻花秦艽乙醇提取物对3种杂草种子萌发的影响

为探究瑞香狼毒和麻花秦艽乙醇提取物对杂草种子萌发的抑制作用,本试验采用种子生物测定法,测定青海天然草地瑞香狼毒和麻花秦艽乙醇提取物及分离组分对野燕麦、旱雀麦和野芥菜的生物活性.结果表明:瑞香狼毒乙醇提取物对3种杂草种子萌发有一定的抑制作用,麻花秦艽乙醇提取物对3种杂草种子萌发表现为"低促高抑"的双重效应,而瑞香狼毒和麻花秦艽乙醇提取物的不同有机溶剂萃取相对杂草种子萌发抑制作用强弱顺序分别为旱雀麦>野芥菜>野燕麦和野芥菜>野燕麦>旱雀麦.瑞香狼毒保留时间为5.50 min组分对旱雀麦根长抑制率较高,达83.38%,对野芥菜根长抑制率为73.85%;而麻花秦艽保留时间为15.66 min组分对旱雀麦和野芥菜种子芽长和根长的抑制率较低,介于30.18%~56.68%.可见,瑞香狼毒对杂草种子萌发表现出较强的抑制作用,具有一定的开发利用价值.

世玛3%OF防除春麦田禾本科杂草药效试验

田间试验结果表明 ,用世玛 2 2 5ml/hm2 +GenapolLRO 6 0 0ml/hm2 ,4 0d对野燕麦 (Avenafatua)、多花黑麦草 (Loliummultiflorum)鲜重效果分别为 88 1%、94 0 %。对小麦安全 ,与对照比增产 15 3%。

赣南脐橙溃疡病菌菌系分化初步研究

从赣南6县市分离得到22株脐橙溃疡病菌并对其进行25项生理生化试验,结果表明,在所测试的16项生理特征中有8项(果糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、柠檬酸盐、醋酸盐、耐盐性(1%～3%)和pH(5.0～8.0),反应结果相同,而在对蔗糖、木糖、肌醇、山梨醇、甘露醇等碳源利用上存在差异显著;在9项生化试验项目中除硝酸盐还原都为阳性外,而在尿素试验、V-P试验、甲基红试验、石蕊牛奶试验结果上也存在较大差异。利用最大距离法和Jaccard距离法对所分离的菌株进行聚类分析,发现不同地区来源的赣南脐橙溃疡病菌可以聚为一类,说明赣南脐橙溃疡病菌存在广泛的分化现象。

球形芽胞杆菌Cry48Aa/Cry49Aa杀蚊毒素与致倦库蚊中肠上皮细胞复合物的结合特性

Cry48Aa/Cry49Aa毒素是近年来在球形芽胞杆菌IAB59中发现的新型双组分毒素,仅对库蚊具有较高的毒杀作用并能杀死二元毒素(Bin)抗性库蚊,是一种比较有潜力的新型杀蚊毒素蛋白,但目前对Cry48Aa/Cry49Aa毒素的作用模式还不清楚。本研究将cry48Aa和cry49Aa基因在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株中表达,纯化毒素的生测结果表明该复合毒素对Bin毒素敏感和抗性致倦库蚊均表现较高的毒杀作用,毒力无显著差异。生物素标记的毒素与致倦库蚊BBMF特异性结合试验表明Cry48Aa和Cry49Aa毒素与两蚊虫品系BBMF都具有较高的结合特异性,Cry48Aa结合能力较高,其解离常数(Kd)分别为(9.5±1.8)和(13.9±2.3)nmol/L;Cry49Aa的解离常数分别为(25.4±3.8)和(28.1±4.2)nmol/L。异源竞争结合试验结果表明Cry48Aa毒素则可以有效地和Cry49Aa毒素竞争结合BBMF蛋白上的结合位点,其IC50分别为(22.1±3.7)和(15.4±2.6)nmol/L,而Cry49Aa不能竞争封闭Cry48Aa毒素与两蚊虫品系BBMF蛋白的结合位点,其IC50均大于17μmol/L。该研究结果可为揭示Cry48Aa/Cry49Aa毒素的作用机制提供一定的研究基础。

不同樱桃嫁接组合的形态及生理指标评价

为筛选适宜青海地区樱桃嫁接砧木及接穗品种,文中以吉塞拉6号为砧木,17个樱桃品种为接穗,研究不同樱桃嫁接组合的形态及生理指标,对苗木定植后成活率进行调查,利用主成分分析法对17个樱桃嫁接组合的嫁接成活率、株高、穗砧直径比、干物质含量、总酚含量、POD活性、PAL活性等7个指标进行综合评价。结果表明:Lambert嫁接成活率最高,Skeena嫁接成活率最低;Bing生长最快,Hedelifingen生长最慢;Saylor的穗砧直径比最大,Lapins的穗砧直径比最小;Lapins的干物质含量最大,Sweetheart的干物质含量最小;Krsten的总酚含量最大,Rainier的总酚含量最小;Attika的POD活性最大,Utah Giant的POD活性最小;Sweetheart的PAL活性最大,Summit的PAL活性最小。综上,17个樱桃嫁接组合生长较好的为Lambert、Krsten和Attika,生长较差的为Skeena、Summit和Hedelifingen。根据主成分分析图可知,成活率、株高、穗砧直径比、POD活性、PAL活性与不同樱桃品种嫁接吉塞拉6号的长势呈正相关,而干物质含量和总酚含量与嫁接长势呈负相关。本研究结果可为青海地区筛选优良樱桃品种提供理论依据。

肺心病患者急性发作期血液流变学和D-二聚体测定的临床意义

目的观察肺心病急性发作期治疗前后血液流变学指标、血气分析和血浆D-二聚体的变化,探讨其对肺心病病情严重程度及疗效判断的价值。方法46例肺心病急性发作期患者给予为期2周的内科综合治疗。治疗前后分别测定血液流变学指标、血气分析及血浆D-二聚体的水平。结果肺心病患者急性发作期血液流变学指标、血气分析和血浆D-二聚体水平(1.94±0.62mg/L)明显异常。治疗2周后,血液流变学各项指标、血pH和PaCO2及D-二聚体水平(0.79±0.46mg/L)与治疗前比较明显改善(P<0.05或P<0.01),PaO2改变则不明显(P>0.05)。治疗后与正常对照组比较,除PaCO2和PaO2差异有统计学意义外(P<0.05),其余各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论血浆D-二聚体检测可作为判定肺心病患者病情严重程度及疗效观察的指标。

BiPAP无创通气治疗慢性肺心病合并Ⅱ型呼吸衰竭的临床观察

目的探讨BiPAP无创呼吸通气治疗慢性肺心病合并Ⅱ型呼吸衰竭的临床疗效。方法将68例慢性肺心病合并Ⅱ型呼吸衰竭的住院患者随机分为两组,对照组(n=34)予以常规综合治疗,治疗组(n=34)在常规综合治疗的基础上加用BiPAP无创呼吸通气治疗,3d后对两组患者的血气分析、心率、呼吸频率及临床症状等进行比较,并统计患者住院天数及病死率。结果无创通气干预3d后,治疗组血SaO2、pH值、PaO2、PaCO2分别为94.3%、7.36、82.1mmHg、49.6mmHg,其改善程度明显优于对照组(89.0%、7.31、72.8mmHg、58.9mmHg),P<0.05。治疗组住院天数(13d)及病死率(2.9%)明显短于或低于对照组(分别为21d和11.8%),P<0.01。结论无创通气治疗,能有效改善患者血气分析指标及临床症状,提高救治成功率,缩短住院时间。

复方黄倍软膏抗过敏及止痒作用的实验研究

目的观察复方黄倍软膏的抗过敏及止痒作用。方法通过二硝基氯苯丙酮溶液诱发小鼠迟发变态反应和磷酸组胺诱发豚鼠局部瘙痒的实验模型,以不同浓度的复方黄倍软膏局部外用,观察其对二硝基氯苯丙酮溶液诱发变态反应和对磷酸组胺致痒反应的影响。结果中、高浓度的复方黄倍软膏能明显降低二硝基氯苯丙酮致小鼠超敏反应值(P<0.01),提高豚鼠耐受磷酸组胺的致痒阈(P<0.001)。结论复方黄倍软膏具有较好的抗过敏和止痒作用。