基于高效液相色谱-串联质谱和分子网络联合应用技术快速鉴定川黄柏和关黄柏中的化学成分

目的通过高效液相色谱-串联质谱和分子网络整合技术联合应用的快速分析方法分别鉴定川黄柏与关黄柏中的化学成分。方法采用Agilent C18色谱柱(100 mm×4.5 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱。通过三重四极杆-飞行时间串联质谱检测数据,根据MS/MS碎片模式的相似性创建分子网络,在正离子模式下,将拥有相似结构的分子簇运用MSDIAL软件筛选出来。最后结合保留时间信息、高分辨质谱精确相对分子质量和MS/MS碎片信息,并根据相关文献和分子网络进行比对,分别对川黄柏、关黄柏中化学成分进行快速准确鉴定。结果在川黄柏、关黄柏中共鉴定出22种化学成分,并通过质谱的积分面积确定了两者的相对峰面积比例为2.08∶1。通过分子网络分析发现川黄柏中存在很多响应较低的未被鉴定出的生物碱类成分,而木兰花碱同系物多出现于关黄柏中,并且关黄柏中的巴马汀的离子响应较川黄柏更高。结论该方法可为关黄柏、川黄柏的质量控制、基准物质以及药效物质研究提供参考,同时也可用于两者化学成分的快速定性分析。

基于中医药的湿疹用药辩证规律研究

目的:基于《中医方剂大辞典》挖掘中医药治疗湿疹的用药规律,总结诱发湿疹的主要病理病因,探索中医治疗湿疹的辩证思维,为临床提供参考。方法:在《中医方剂大辞典》中检索出治疗湿疹的方剂113首,涉及230种单味药,从用药频次、药物的性味归经等多个层面系统研究中医治疗湿疹的辩证思维,并采用Aprior算法探索其中组方规律,以Cytoscope 3.6进行药物规律可视化处理。结果:单味药频次排名前十位中药:黄柏、冰片、甘草、苦参、白鲜皮、青黛、苍术、石膏、防风、滑石。药味辛>甘>咸=酸。归经以脾胃表里两经为主。方剂功效以"止痒清热、解毒除湿、祛风"为主。结论:湿疹以风、湿、热、毒相兼协同致病,药性多寒、温,药味多苦、辛、甘,而清热、燥湿、解毒为中医治疗湿疹的主要治法。

金银花口服液对HaCaT特应性皮炎细胞模型的保护作用研究

目的:研究金银花口服液在抑制炎症、促进皮肤屏障分化方面的抗特应性皮炎效果。方法:以不同浓度的金银花口服液处理正常HaCaT细胞,四甲基偶氮唑蓝(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)法检测药物对细胞存活率的影响;使用10μg/L肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)/干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)处理HaCaT细胞,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR)检测金银花口服液对造模后HaCaT细胞中相关炎症因子[趋化因子(Chemoattractant Cytokine Ligand,CCL)17、CCL22、CCL5、白细胞介素(Interleukin,IL)-8、胸腺基质淋巴细胞生成素(Thymic Stromal Lymphopoietin,TSLP)] mRNA的表达。同时使用20μg/L的IL-4处理HaCaT细胞引起的特应性皮炎角质以形成细胞分化障碍模型,用RT-qPCR法检测金银花口服液对造模后HaCaT细胞中相关皮肤结构蛋白、丝聚合蛋白(Filaggrin,FLG)、兜甲蛋白(Loricrin,LOR)mRNA的表达。结果:金银花口服液处理后,HaCaT细胞中相关促炎细胞因子CCL17、CCL22、IL-8、TSLP的mRNA表达水平均明显降低,同时一定程度上恢复了皮肤屏障蛋白FLG、LOR的mRNA表达,结果差异均具有统计学意义,并呈浓度依赖性。结论:金银花口服液可抑制HaCaT特应性皮炎细胞模型相关细胞炎症因子的表达,并促进皮肤相关结构蛋白的形成,达到抗炎并修复皮肤屏障的效果。