导师在研究生思想政治工作中的地位和作用

加强研究生导师参与思想政治教育工作是全面提高研究生培养质量的根本保证。本研究从研究生思想教育中的科学调研入手,充分说明了导师在研究生培养和教育中起着至关重要的作用。

新生大鼠反复惊厥对脑内γ-氨基丁酸A受体α1和β2亚单位表达的短期影响

目的γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)作为脑内最重要的抑制性受体在脑功能中起重要作用。该实验通过研究新生期反复惊厥对大鼠脑内GABAARα1和β2亚单位表达的短期影响,探讨其与发育中脑损伤的关系。方法生后7d的Sprague-Dawley大鼠随机分成两组,每组32只,惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次,每次持续30min,连续6d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。分别于反复惊厥后1d和7d每组各处死16只大鼠,每个时间点分别采用免疫组化方法和Western blot方法观察大鼠大脑皮层及海马GABAARα1和β2亚单位表达的变化。结果反复惊厥后1d时,在惊厥组大鼠顶叶及海马齿状核、CA3和CA4区GABAARα1亚单位免疫化学累积光密度(AOD)较对照组明显增高(P<0.05),反复惊厥后7d时,在惊厥组大鼠顶叶及海马齿状核、CA1至CA4区GABAARα1亚单位免疫化学AOD较对照组明显增高(P<0.05),反复惊厥后1d和7d时,在惊厥组大鼠大脑皮层和海马区GABAARα1亚单位蛋白表达均明显高于对照组(P<0.01)。反复惊厥后7d时,在惊厥组大鼠海马CA1、CA2区GABAARβ2亚单位免疫化学AOD明显高于对照组(P<0.05),在丘脑区明显低于对照组(P<0.05),惊厥组大鼠海马区GABAARβ2亚单位蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。结论新生大鼠反复惊厥造成脑内GABAARα1和β2亚单位表达的短期改变,这种改变可能参与发育期惊厥性脑损伤。

围生期窒息继发白内障11例临床分析

目的:探讨围生期窒息与继发性白内障之间关系。方法:2001年1月至2006年2月期间在对围生期窒息患儿随访过程中发现11例继发性白内障患儿,对其在本院新生儿科住院期间的临床资料进行回顾性分析。结果:1例患儿包括7例早产儿及4例足月儿,均有围生期窒息史。其中合并多器官功能衰竭6例,占54.5%,另5例合并多器官功能受累。全部患儿均为双侧晶状体发病,发现时平均日龄为(55.4±19.4)d。结论:白内障可能是围产期窒息造成多器官功能损伤在眼部的表现,对围产期窒息的婴儿在随访时应注意眼部检查,做到早期发现,早期治疗。

儿童抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎的临床特征

目的:分析抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)脑炎患儿的临床特点及预后,为临床早期识别本病提供依据。方法:回顾性分析2015年1月至2018年3月在中南大学湘雅二医院儿科住院的42例抗NMDAR脑炎患儿的临床资料及随访情况,总结其临床特点、治疗效果及预后情况。结果:42例患儿中男15例(35.7%),女27例(64.3%),男女比例1꞉1.8,年龄(9.20±4.66)岁(最小4个月,最大17岁)。首发症状以癫痫发作(47.6%,20/42)和精神行为异常(35.7%,15/42)最为常见;患儿在病程中累积出现精神行为异常(36/42,85.7%)、癫痫发作(36/42,85.7%)、言语障碍(32/42,76.2%)、运动障碍(28/42,66.7%)、意识障碍(28/42,66.7%)、自主神经功能紊乱(26/42,61.9%)及睡眠障碍(24/42,57.1%)等症状。42例患儿脑脊液抗NMDAR抗体均为阳性;50.0%(21/42)的患儿头颅MRI检查结果异常,病变累及顶叶、额叶、颞叶、枕叶、基底节及视神经等部位,1例患儿病变累及视神经合并髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)抗体阳性;40例患儿行脑电图检查,92.5%(37/40)出现异常,以弥漫性慢波为主要表现,1例可见δ刷;合并肠系膜畸胎瘤1例,占2.4%(1/42)。出院时mRS评分为2.14±1.46,较住院期间最高mRS评分(3.88±1.38)显著降低(P<0.05),疗效显著;随访3~39个月,出院后3个月时mRS评分仅为0.81±1.29,与出院时mRS评分比较仍有显著改善,其中76.2%(32/42)mRS评分≤2,预后良好;4.8%(2/42)的患儿复发,无死亡病例。开始免疫治疗时间和病程中最高mRS评分是影响预后的因素,开始免疫治疗时间越早、病程中mRS评分越低,预后越好。结论:癫痫发作、精神行为异常、运动障碍、言语障碍及自主神经功能紊乱是儿童抗NMDAR脑炎的常见临床表现;免疫治疗效果显著,开始免疫治疗的时间和病情严重程度是影响预后的重要因素;抗NMDAR脑炎可合并其他自身抗体,其临床意义及机制有待深入研究。

76例惊厥新生儿动态脑电图临床分析

目的探讨新生儿惊厥临床发作停止后的动态脑电图(CEEG)的背景活动、成熟度、EEG惊厥发作等情况,分析期间内在关联性,为减轻惊厥所致的脑损伤提供依据。方法收集2010年1月至2014年12月入住中南大学湘雅二医院新生儿科、符合纳入标准的新生儿,行CEEG检查,记录相关临床资料并进行分析。结果符合纳入标准共76例新生儿,导致新生儿惊厥的主要原因是新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)、新生儿颅内出血(ICH)和新生儿化脓性脑膜炎。CEEG正常者7例(9.2%),CEEG轻度异常者56例(73.7%),CEEG中度异常者11例(14.5%),重度异常者2例(2.6%),异常率为90.79%。CEEG背景活动无交替图形(TA)13例(17.1%),偶有TA 14例(18.4%);存在同步性异常10例。共26例存在CEEG成熟迟滞,存在EEG惊厥发作者为69例(90.8%)。睡眠期较觉醒期EEG惊厥发作发生率显著性增高(χ2=74.494,P<0.001),睡眠期EEG惊厥发作与CEEG的同步性异常和成熟迟滞有显著相关性(r=0.369,P=0.001;r=0.331,P=0.004),EEG异常程度与新生儿行为神经评分(NBNA)具有显著负相关关系(r=-0.293,P=0.018),与NBNA中的原始反射评分具有显著负相关关系(r=-0.324,P=0.023),CEEG中背景活动呈现低电压与NBNA具有显著负相关关系(r=-0.608,P<0.001)。结论在新生儿惊厥临床发作控制后,仍存在高比例的CEEG异常和CEEG惊厥发作;CEEG与NBNA在新生儿惊厥中评价脑功能损害具有一致性。

早产儿血糖对定量脑电图参数的影响

目的探讨定量脑电图(qEEG)在评价血糖对早产儿脑功能影响中的价值。方法选取2019年1~12月中南大学湘雅三医院新生儿科收治的早产儿为研究对象。根据血糖水平分为组1(<4.95 mmol/L)、组2(4.95 mmol/L-)、组3(6.60 mmol/L-)与组4(≥8.55 mmol/L),比较各组间qEEG参数的变化,并对血糖与qEEG参数进行相关性分析。结果共纳入早产儿39例,血糖测定采集点84个。与组4相比,其余各组各脑区总功率、额区和枕区各频带绝对功率均显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。各脑区总功率、δ/θ、(δ+θ)/(α+β)比值均与血糖呈负相关(P<0.05),θ频带相对功率与血糖呈正相关(P<0.05)。结论随着血糖的改变,早产儿总功率、各频带功率及频谱组成均发生变化,qEEG可能成为监测早产儿血糖异常对脑功能影响的重要工具。

地塞米松对体外培养胎鼠大脑皮质神经元胞浆Dynein重链和Dynactin表达的影响

目的研究地塞米松(dexamethasone,DEX)对体外培养胎鼠大脑皮质神经元胞浆动力蛋白Dynein重链(Dynein heavy chain,DHC)和Dynactin表达的影响。方法体外培养原代胎鼠大脑皮质神经元细胞,制作DEX干预细胞模型。依据DEX终浓度不同,分为对照组(未施加DEX)、0.1μmol/L组和1.0μmol/L组。分别于干预1 d、3 d及7 d时,应用实时荧光定量PCR研究DEX对DHC和Dynactin mRNA表达的影响;应用Western blot法研究DEX对DHC和Dynactin蛋白表达的影响。结果各时间点各组之间DHC mRNA和Dynactin mRNA比较差异均无统计学意义(P>0.05)。DEX干预后7 d,1.0μmol/L组胎鼠大脑皮质神经元DHC蛋白随时间推移表达至高峰,且明显高于对照组和0.1μmol/L组(P<0.05)。DEX干预后,对照组、0.1μmol/L组在3 d和7 d时体外培养神经元Dynactin蛋白表达均高于1 d时(P<0.05);对照组7 d时神经元Dynactin蛋白表达高于3 d时(P<0.05);0.1μmol/L组7 d时神经元Dynactin蛋白表达低于3 d时(P<0.05)。在DEX干预后3 d及7 d时,0.1μmol/L组及1.0μmol/L组胎鼠大脑皮质神经元Dynactin蛋白表达均明显低于对照组(P<0.05);且7 d时,1.0μmol/L组Dynactin蛋白表达低于0.1μmol/L组(P<0.05)。结论 DEX影响体外培养发育中胎鼠大脑皮质神经元DHC和Dynactin蛋白表达,并可能存在浓度依赖性及时间依赖性。[中国当代儿科杂志,2021,23 (6):639-644]

无镁诱导惊厥后发育中皮层神经元γ-氨基丁酸A受体α1亚单位的变化

目的研究无镁诱导对惊厥后发育中皮层神经元表达γ-氨基丁酸A受体（GABAAR）α1亚单位的影响。方法以原代培养的大鼠大脑皮层神经元无镁诱导的反复惊厥样放电为模型，根据对培养6d皮层神经元的不同处理分为正常细胞外液组和无镁细胞外液组。神经元在上述2种液体中孵育3h，然后恢复正常DMEM培养液继续培养，1、7及12d后应用流式细胞技术、免疫细胞化学技术及实时荧光定量PCR测定2组大鼠皮层神经元GABAARα1亚单位表达的变化。结果应用流式细胞技术发现无镁损伤后12d时无镁组GABAARα1阳性细胞率较对照组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；应用免疫细胞化学方法发现无镁损伤后7d、12d时实验组GABAARα1蛋白表达较对照组明显下降，差异有统计学意R（P〈0．05）；应用实时荧光定量PCR发现无镁损伤后1d时，无镁组GABAARα1mRNA表达较对照组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论早期无镁细胞外液处理可以诱导发育中大鼠皮层神经元GABAARα1表达的改变。

高氧暴露下早产大鼠血清皮质醇变化的动态研究

目的研究高氧暴露下,早产大鼠皮质醇(GC)动态变化,探讨其与支气管肺发育不良(BPD)发生之间的关系。方法妊娠21d剖宫产娩出的早产大鼠随机分为实验组和对照组,实验组大鼠持续吸入>90%O2,对照组大鼠呼吸空气。于生后1d,3d,7d,14d,和21d取肺组织行HE染色。于生后3d,7d和14d,从两组中随机选取仔鼠断头取血,应用放射免疫法测定血清皮质醇浓度。结果对照组早产大鼠血清皮质醇浓度在检测的各时间点无显著性改变,实验组大鼠的血清皮质醇浓度在生后3d时与对照组比较无显著性差异(n=25,P=0.56),在生后7d时显著高于对照组(n=25,P=0.04),在生后14d时显著低于对照组(n=21,P=0.0018)。高氧组早产鼠肺脏表现出BPD样病理改变,各时间点高氧组辐射状肺泡计数明显低于对照组(P<0.05),生后3d,7d,14d和21d时,高氧组肺纤维化评分明显高于对照组(P<0.05)。结论高氧暴露可以导致早产大鼠肺纤维化,影响肺发育。早产大鼠的血清皮质醇浓度在高氧暴露时有明显改变,可能参与肺损伤的发生过程,影响糖皮质激素的疗效。

新生大鼠反复惊厥对皮质区糖皮质激素受体表达的影响

目的研究新生期反复惊厥对大鼠大脑皮层内糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达的影响。方法生后(postnatal,PN)7d的Sprague-Dawley大鼠48只,随机分成两组,惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次,每次持续30min,连续6d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。分别于PN-13d、15d和19d每组各处死8只大鼠,Western blot法和免疫组化法观察大鼠大脑皮层GR表达的变化。结果与对照组相比,在PN-15d时惊厥组大鼠大脑皮层胞浆中GR的表达明显下调(P<0.01),在PN-15d、PN-19d时胞核中GR表达水平明显下调(P<0.05)。与对照组相比较,PN-13d时,惊厥组大鼠顶叶区GR免疫化学累积光密度(AOD)明显降低(P<0.05);PN-15d时,惊厥组大鼠皮层顶叶区GR免疫化学AOD明显降低(P<0.01);PN-19d时,惊厥组大鼠皮层顶叶、颞叶、额叶区GR免疫化学AOD明显降低(P<0.01)。结论新生大鼠反复惊厥造成皮质GR表达的异常,可能参与发育期脑损伤。

无镁对体外原代培养胎鼠皮层神经元糖皮质激素受体表达的影响

目的研究无镁诱导惊厥后发育中皮层神经元表达糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的影响。方法以原代培养的胎鼠大脑皮层神经元无镁诱导的反复惊厥样放电为模型,根据对培养6d皮层神经元的不同处理分为正常细胞外液组和无镁细胞外液组。神经元在上述2种液体中孵育3h,然后恢复正常DMEM培养液继续培养,在无镁损害后1d、7d及12d时应用免疫细胞化学技术及实时定量PCR测定发育中大鼠皮层神经元无镁细胞外液处理后GR表达的变化。结果应用免疫细胞化学方法发现无镁损伤后12d惊厥组GR蛋白表达较对照组显著下降(P<0.01);实时定量PCR发现无镁损伤后1d、7d惊厥组GRmRNA表达较对照组显著增高(P<0.05)。结论无镁细胞外液处理可以诱导发育中大鼠皮层神经元GR表达的改变。

围生期窒息继发白内障11例临床分析

目的探讨围生期窒息与继发性白内障之间关系。方法2001年1月～2006年2月期间在随访过程中发现继发性白内障的11例患儿，对其住院期间的临床资料进行回顾性分析。结果11例患儿包括7例早产儿及4例足月儿，均有围生期窒息史。11例患儿中在新生儿期表现多器官功能衰竭6例，占54．5％，另5例发生多器官功能受累。全部患儿均为双侧晶状体发病，发现时平均日龄为（55．4±19．4）d。结论白内障可能是围产期窒息造成多器官功能损伤在眼部的表现，对围产期窒息的婴儿在随访时应注意眼部检查，做到早期发现，早期治疗，可减少儿童致盲率。

皮质酮对体外培养发育中胎鼠脑皮层神经元迁移蛋白LIS1表达的影响

目的研究皮质酮对发育中胎鼠脑皮层神经元迁移蛋白Lissencephaly 1(LIS1)表达的影响。方法体外原代培养Wistar胎鼠脑皮层神经元并分为对照组、低浓度干预组和高浓度干预组,各组给予含有不同浓度皮质酮(对照组:0μmol/L,低浓度干预组:0.1μmol/L,高浓度干预组:1.0μmol/L)的培养基干预,分别于干预后1、4、7 d收集细胞,采用Werstern blot法及免疫细胞化学染色法观察神经元LIS1蛋白表达的变化。结果 Western blot结果显示干预后7 d,低浓度干预组及高浓度干预组胎鼠脑皮层神经元胞浆及胞核内LIS1表达均明显低于对照组(P<0.05),且高浓度干预组胞浆内LIS1表达明显低于低浓度干预组(P<0.05)。免疫细胞化学染色法结果显示皮质酮干预后1、4、7 d,高浓度干预组LIS1平均光密度值明显低于对照组及低浓度干预组(P<0.05),且干预后7 d,低浓度干预组LIS1平均光密度值明显低于对照组(P<0.05)。结论皮质酮可下调体外培养发育中胎鼠脑皮层神经元迁移蛋白LIS1的表达水平,且与皮质酮浓度高低、作用时间长短相关。