乙醇对鱼精蛋白与DNA相互作用的影响

鱼精蛋白是近年发展起来的又一新型的天然高分子非病毒载体,可以作为一种良好的基因载体用作输运DNA,而它在不同体积分数乙醇溶液中也会影响其输运效果,作者利用鱼精蛋白这一性质,用单分子荧光电泳技术以及原子力显微镜探究它在不同体积分数的乙醇溶液下对DNA的凝聚效果以及DNA的电荷逆转规律的影响。单分子荧光电泳实验结果表明,DNA的电泳迁移率符号随鱼精蛋白浓度的增大由负变正,即DNA发生电荷逆转现象。溶液中乙醇的浓度越大,DNA的电泳迁移率绝对值越小。DNA的电荷逆转不仅取决于DNA的表面电荷量,可能还取决于DNA的凝聚情况,利用原子力显微镜可观察到DNA凝聚效果随着鱼精蛋白浓度的增加而增强。接着在鱼精蛋白(0.5 ng·μL-1)溶液中,加入不同体积分数的乙醇,发现乙醇会促进鱼精蛋白对DNA的凝聚作用,且凝聚效果明显。两组实验结果均表明鱼精蛋白可凝聚DNA并能使DNA发生电荷逆转,且乙醇在鱼精蛋白导致的DNA凝聚与电荷逆转过程中起着一定的作用。

壳聚糖与DNA作用过程中pH值对DNA电荷逆转及凝聚状态的影响

壳聚糖(chitosan)作为良好的基因载体能使DNA发生电荷逆转及凝聚,溶液p H值不同时,促使DNA发生电荷逆转的chitosan浓度及DNA的凝聚状态都会发生改变。作者通过单分子荧光电泳、动态光散射及原子力显微镜技术研究不同p H值下chitosan对DNA电荷逆转及凝聚状态的影响。首先单分子荧光电泳实验结果显示,p H值越大,导致DNA发生电荷逆转的chitosan浓度越大,同时还用动态光散射实验也得到类似的实验结果,进一步验证p H值在chitosan导致DNA的电荷逆转过程中的影响。DNA的电荷逆转主要与DNA的表面电荷量有关,但也可能与DNA的凝聚状态有关,本文用原子力显微镜观察到不同p H值及浓度下的chitosan导致DNA凝聚的凝聚状态的确不同,而且浓度高于一定值时,云母片上面看不到任何凝聚物的存在,也说明DNA电荷逆转的发生。可见,p H值在chitosan导致DNA电荷逆转及DNA的凝聚过程中起重要作用。