阻断牛皮蝇产卵环节防治牛皮蝇蛆病的方法研究

阻断牛皮蝇产卵环节防治牛皮蝇蛆病的方法研究金兆庆，刘金凤，张林，芦俊杰，常增荣（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）（甘肃省天祝县畜牧兽医站）牛皮蝇蛆病是一种流行广泛、危害十分严重的寄生虫病。以往在防治该病中，大量地采用了杀灭体内幼虫、捕杀体外...

弓形虫自然弱毒株QHO毒力稳定性研究——QHO株速殖子回归绵羊毒力变异的观察

本试验将弓形虫自然弱毒株QHO(绵羊源)通过小白鼠连续继代中,毒力增强后的速殖子回归于本动物绵羊,待弓形虫血清抗体滴度达到IHA 1:256以上,体内包囊形成之后,宰杀采集内脏组织,分离虫体,进行毒力测定。其结果表明回归绵羊后第1代速殖子的毒力比回归前明显减弱。

兰州地区实验用家兔寄生虫调查及药物防治试验

经对兰州地区几家实验动物饲养场和部分个体养兔户的２５６只家兔的寄生虫感染情况调查表明，兰州地区实验家兔群存在兔栓尾线虫（Ｐａ－ｓｓａｌｕｒｕｓａｍｂｉｇｕｕｓ）、兔尖柱线虫（Ｏｂｅｌｉｓｃｏｉｄｅｓｌｅｐｏｒｉｓ）、兔痒螨（Ｐｓｏｒｏｒｏｐｔｅｓｃｏｍｍｕｎｉｓｃｕｎｉｃｕｌｉ），弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）和多种兔球虫的感染。其中以兔球虫的感染率较高、流行广、危害严重。经用氯苯胍和克球粉治疗，对球虫卵囊的驱净率在９０％以上，证明该药仍是防治球虫病的有效药物。

^(60)钴γ射线致弱弓形虫免疫猪的研究

在弓形虫辐射免疫研究方面,已有许多学者进行了大量的工作。Seah 等人早在1975年报道了 X 射线照射弓形虫免疫小白鼠的研究。他们在照射剂量、免疫强度和免疫持续期等方面进行了探索并取得满意结果。Chhabraf 等人对^(60)钴辐射免疫的研究也取得了一定的成效,我们于1984年,进行了以^(60)钴γ射线照射猪弓形虫 GJP 株的免疫研究。

弓形虫自然弱毒株毒力稳定性及生物学特性的研究

研究结果表明:①用弓形虫自然弱毒株(QHO)包囊继代繁殖的速殖子和经不间断连续20次继代的速殖子10~2～10~7虫量分别感染小鼠,进行稳定性试验。前者不致死小鼠,并可持续存活30～150天以上,后者可在6～11天使小鼠全部致死,表现与RH株毒力相同。继之,将毒力变异和未变异的速殖子分别经-196℃液氮冻存4～9个月,复苏后感染小鼠,仍表现各自毒力特性。②用不同剂量的QHO株包囊(1～100个)和速殖子10~4分别腹腔感染小鼠观察虫体消长规律,二者在腹液中都可形成大量速殖子,同时在10～14天逐渐消失,通过镜检和盲传证明虫体在腹液中不复存在。继经21天左右在脑组织中形成大量包囊,终生存留。③温度敏感性和低温保存期的观察:包囊在4℃12天、-12℃和-25℃5天、56℃5分钟均不再具有感染性;速殖子4℃27天仍具有感染性;而经-196℃液氮中长期保存的包囊和速殖子都可成功地复苏,并具有各自的毒力和致病性。

应用弓形虫McAb—RIHA对甘肃省羊猪血清弓形虫循环抗原的检测

应用已建立的分泌抗弓形虫MCAb杂交瘤细胞株(3C_2)诱导小鼠腹水,在50％(NH_4)_2SO_4溶液中4℃保存二年后,经盐析纯化,致敏戊二醛化鞣化绵羊红细胞制备抗弓形虫单克隆抗体反向间接血凝诊断试剂(MCAb-RIHA)检测已纯化的弓形虫可溶性抗原,灵敏度为7.43μg/ml;应用该诊断试剂对甘肃省部分弓形虫流产高发区的绵山羊血清435份(其中天祝县125份、古浪县121份、景泰县189份、高台县种猪场猪血清65份和人工感染羊兔的血清29份进行了弓形虫循环抗原(CAg)检测,共检出CAg阳性血清160份,阳性率30.3％(160/529),同时用IHA和RIHA诊断法对529份血样进行了血清、抗体(Ab)和CAg的检测和比较。结果表明,用以上两法同时检测的529份血样结果:151份Ab阳性,阳性率28.5％(151/529),107份中Ab、Ab均为阳性,占CAg阳性总数66.9％(107/160),占Ab阳性总数70.9％(107/151)。仅检出CAg阳性数53份,仅Ab阳性数44份,各占阳性总数的33.1％(53/160)和29.1％(44/151)。证明受检羊群和猪场同时存在既往感染史(Ab)和现症感染(CAg)。进而证明McAb-RIHA方法对弓形虫病早期诊断、流行病学监测具有实用价值。

抗弓形虫单克隆抗体试剂的研究——分泌抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本研究选用了弓形虫QHO株活虫抗原免疫BALB/C小鼠,摘取脾细胞与SP_2/O骨髓瘤细胞融合,获得了分泌抗弓形虫McAb杂交瘤细胞株(2A_(11),3C_2)。其细胞分泌抗体效价为1:64(IHA),诱生腹水效价为1:1024和1:16384,经3个月连续培养和2次液氮冻存复苏培养,细胞生长良好,持续稳定分泌抗体效价不变,用诱生腹水经(NH_4)_2SO_4盐析、DEAE-Sephadex-A50层析和PEG浓缩,所得McAb致敏5％鞣酸化绵羊红细胞,与弓形虫可溶性抗原显示良好凝集效果,证明McAb与弓形虫可溶性抗原反应特异、敏感,并在血凝诊断试剂上具有应用价值。

弓形虫病免疫的研究─—弓形虫GJS和QHO株在不同浓度血清培养条件下的生物学特性观测

在用低浓度犊牛血清（２．５％）和不含血清的１６４０培养液培养的ＢＨＫ－２１细胞中，接种毒力不同的弓形虫ＧＪＳ和ＱＨＪＯ株，于５％ＣＯ＿２３７℃培养。结果两虫株的生物学特性存在一定差异；在含２．５％血清培养液培养的细胞中，虫体繁殖显示两个高峰，在无血清条件下只有一个高峰值，ＢＨＫ－２１细胞在含虫、不含虫及含血清和不含血清条件下均只有一个高峰值；两虫株培养上清蛋白含量均以递增方式增加，至１９０小时蛋白含量牧最初２小时分别增加１．９３、２．５２倍，对照ＢＨＫ－２１细胞上清蛋白无明显变化；培养上清虫体分泌排泄抗原（Ｅ／ＳＡ）滴度随培养时间的延长而上升，ＢＨＫ－２１对照上清呈阴性。

甘肃省羊流产病原血清学调查

针对甘肃省羊群流产严重的病情,我们对不同地区6个县1047只绵山羊进行了血清学调查。结果表明,弓形虫病感染率为17.19％(180/1047)、衣原体病为34.38％(360/1047)、布氏杆菌病未检出。弓形虫病和衣原体病并发感染为73.9％(133/180)。初步证明,甘肃省羊流产的病原为弓形虫和衣原体。

抗弓形虫单克隆抗体的被动保护和体外中和试验(初报)

应用抗弓形虫McAb(3C_2)株诱生腹水McAb,经纯化后被动免疫小鼠,4小时和24小时后用弓形虫强毒(RH)攻击,获得40％和20％的保护率;用McAb(3C_2)与RH在体外中和24和48小时后接种小鼠,获得60％的保护率。各对照组小鼠全部死亡,并查到大量弓形虫。对各个存活小鼠进行弓形虫包囊检查和盲传均未发现弓形虫病原存在。初步证明仅单一型的抗弓形虫McAb对小鼠具有抗弓形虫强毒感染的被动保护效力。

兰州地区实验动物寄生虫携带情况调查

兰州地区实验动物寄生虫携带情况调查陈国怀宁磊景志忠１）金兆庆１）周东兰２）周斌月２）曹和询２）孙以方２）（卫生部兰州生物制品研究所７３００４６）１９９６年１２月，我们对兰州地区繁殖饲养实验动物的３个主要单位送检的、不同种类不同等级的实验动物，作了寄生...

弓形虫单克隆抗体试剂的研究——应用RIHA及IHA法对弓形虫感染兔、羊循环抗原和抗体的检测

应用抗弓形虫单克隆体(McAb)致敏绵羊红细胞建立的反向间接血凝诊断法(RIHA)和间接血凝诊断方法(IHA),对人工感染弓形虫的兔、羊血清进行了循环抗原(CAg)和抗体(Ab)检测。结果表明,弓形虫弱毒(QHO)株和强毒(RH)株感染的兔和羊血清,用RIHA检出CAg的时间在感染后1～2天,平均4天;IHA检出Ab的时间在感染后8～16天,平均12天。用毒力不同的弓形虫感染后,CAg检出时间有一定差异:QHO株感染的兔平均5.3天,羊平均6.25天;RH株感染的兔平均2.3天,羊为1天。兔、羊CAg的阳性检出率均为100％。兔、羊血清CAg于感染后23～66天先后消失,而Ab滴度长期维持在一定高度(1:64～1:4096)。证明RIHA方法对不同毒力弓形虫感染的动物血清CAg可以达到早期诊断的目的。为弓形虫病急性期和早期现症感染提供了可靠的诊断方法和手段。

弓形虫单克隆抗体试剂的研究——单克隆抗体微量反向间接血凝试验

本文首次报道用杂交瘤细胞株3C_2分泌的抗弓形虫单克隆抗体腹水经饱和硫酸胺盐析纯化后致敏绵羊红细胞而建立了弓形虫微量反向间接血凝试验。结果表明:它可检测出含量仅为5μg/ml的弓形虫速殖子可溶性抗原,并且在弓形虫QHO株速殖子感染绵羊和家兔之后的2～6天,血清中即能检测到循环抗原;与正常绵羊、家兔和小白鼠的血清以及其它寄生虫感染的动物血清无非特异性反应和交叉反应;试剂经冷冻真空干燥处理后其活性不受影响,且至少能保存3个月之久。从而为早期弓形虫感染和现症急性感染等提供了一种特异性强、灵敏度较高和简便实用的诊断方法。

抗弓形虫单克隆抗体试剂的研究——抗弓形虫单克隆抗体理化特性的测定

以分泌物抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株3C_2接种BALB/C小鼠腹腔,所诱发的腹水McAb经反复冻融8次、冻干1次、饱和(NH_4)_2SO_4盐析3次,室温4℃及-20℃下保存5个月和不同pC缓冲液稀释等不同条件处理之后,其抗体活性无明显变化。从而证明该McAb性质稳定,能适应较复杂的环境,为建立弓形虫病免疫学诊断试剂盒以及该试剂盒的贮存、包装和运输等提供了科学依据。

羊夏伯特线虫一新种记述

羊夏伯特线虫一新种记述张林卢俊杰金兆庆（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６笔者在整理本所寄生虫标本室标本的过程中，在１９５６～１９７５年间从内蒙古等地的羊大肠采集的虫体标本中发现夏伯特属（Ｃｈａｂｅｒｔｉａ）而不同于已知牛夏伯特线虫（Ｃ．ｂｏｖ...