金属硫蛋白与糖尿病并发心肌病

糖尿病（DM）是当今影响人口众多，分布范围广泛的慢性疾病，糖尿病心肌病是其主要的并发症之一。流行病学研究发现，糖尿病患者心血管疾病的发病率较非糖尿病患者高2-3倍。近期研究发现，血糖代谢正常者心力衰竭发病率为3.2%，而糖代谢异常者（糖耐量减低和空腹血糖受损者）和2型糖尿病患者心力衰竭发病率分别是6.0%和11.8%[1]。

组学在转化医学中的应用进展

作为当前医学科学研究领域的热点方向,转化医学(translational medicine)是指以患者为中心,从临床应用的实际需求出发,将基础研究成果快速有效地转化为临床技术的过程,并通过临床数据的深入分析进一步指导基础研究,以循环的方式不断高效促成医疗水平的提升与完善,从而更好地服务于人类健康。作为转化医学的重要研究手段,基因组学、转录组学、蛋白组学和代谢组学等技术平台为其高速发展提供了强劲的动力。文章对转化医学及其相关组学平台的应用进行了阐述,并对其发展趋势进行了探讨。

白内障晶状体核蛋白质组学的初步研究

目的研究年龄相关性白内障晶状体核不同组分晶状体蛋白的组成。方法取12例年龄相关性白内障晶状体软核,提取晶状体核中的水溶性蛋白及尿溶性蛋白进行二维电泳及UPD-蛋白质染料染色试剂盒对凝胶染色后,用Image Master2D Platinum6.0软件对获得的蛋白图谱进行分析,再利用MALDI-TOF MS分析及数据库搜索对差异表达的蛋白质点进行鉴定。结果二维电泳结果显示,年龄相关性白内障晶状体核中水溶性蛋白和尿溶性蛋白大部分为相对分子质量14400~97400,pI5~9。高丰度蛋白质斑点相对分子质量分布在20000~31000,pI6~8区域内。年龄相关性白内障晶状体核水溶性蛋白二维电泳图识别出31个蛋白质斑点,尿溶性蛋白二维电泳图识别出26个蛋白质斑点,相差2倍以上表达的差异点有14个。对选取的蛋白质斑点进行MALDI-TOF MS分析,经数据库检索后鉴定出6种蛋白质,其中3种蛋白质表达下调（γS-晶状体蛋白、βA3-晶状体蛋白、βA4-晶状体蛋白）,1种蛋白质表达上调（βB1-晶状体蛋白）,2种蛋白质表达缺失（截取的人βB1-晶状体蛋白A链、截取的人γD-晶状体蛋白X链）。结论年龄相关性白内障晶状体核不同组分晶状体蛋白中主要由β-晶状体蛋白组成,与尿溶性晶状体蛋白相比,水溶性蛋白鉴定出γD-晶状体蛋白,而βA4-晶状体蛋白阙如。

缺血再灌注损伤与细胞信号转导

短暂的缺血会对器官造成损伤，但是在恢复灌注后，损伤反而进一步加剧，这种现象称为缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury，IRI）。临床上涉及缺氧／复氧过程的手术都不可避免地会发生1RI，比如重大器官的移植、冠脉搭桥、溶栓术等。

细胞自噬作用及其在相关疾病中的重要生理意义——2016年诺贝尔生理学或医学奖解读

＂自噬＂的概念最早在1963年首先被提出,但受限于当时的研究条件,人们对自噬的具体机制一直所知甚少。直至20世纪90年代早期,随着大隅良典（Yoshinori Ohsumi）利用面包酵母定位了细胞自噬的关键基因并阐释了酵母细胞自噬发生的机制,细胞自噬这一现象逐渐进入科学家们的视野并成为当前生命科学最热的研究领域。

正常心肌缺血与糖尿病心肌缺血大鼠蛋白质组的差异

目的:运用蛋白质组学方法比较正常与糖尿病性大鼠心肌缺血再灌注损伤时心肌蛋白质组表达图谱的差异。方法:将SD大鼠随机分为心肌缺血再灌注组(IR组)和糖尿病心肌缺血再灌注组(DMIR组)。分别取各组左心室心肌蛋白进行二维电泳及凝胶染色后,用ImageMaster 2D Platinum软件对获得的蛋白图谱加以分析,寻找差异蛋白点。结果:二维电泳结果显示,IR组心肌蛋白二维电泳图谱与DMIR组相比共有29个显著差异点,其中6个点表达上调,6个表达下调,17个表达不匹配。结论:IR组与DMIR组大鼠心肌的二维电泳结果显示蛋白表达图谱有明显差异,但其差异蛋白为何种蛋白、起何种功能需要进一步的质谱数据进行分析。

蛋白质组学及其在糖尿病相关疾病中的应用

随着人类基因组计划的实施和推进，生命科学研究已经进入了后基因组时代。在这个时代，生命科学的主要研究对象是功能基因组学，包括结构基因组研究和蛋白组研究等。蛋白质组学是对基因编码的蛋白质进行大规模分析的一门新兴学科，是目前研究的热点。其对于寻找疾病的诊断标志物、筛选药物作用靶点及进行毒理学研究等具有重要的实际意义，因此成为医药研究的一个新方向。目前作为一种新的研究手段，

几种可见染色法对特殊蛋白的检测

目的:比较7种可见染色法对特殊蛋白灵敏度的检测差异。方法:采用一向电泳分离5种蛋白,1种为普通蛋白,其他4种为糖蛋白或磷蛋白代表。考察比较传统考马斯亮蓝染色、UPS染色、BYT-银染、YAN-银染、BIO-银染以及UPS1-银染,UPS2-银染7种可见染色方法对特殊蛋白灵敏度检测的差异。结果:7种可见染色法的共同点是对普通蛋白的灵敏度都要高于特殊蛋白。染料染色中UPS染色优于传统考染,5种银染法中UPS1-银染染出的蛋白条带均一性较强且背景清晰,UPS2-银染次之。结论:考察的7种可见染色法对特殊蛋白的染色结果显示,UPS1-银染染色时间较短,灵敏度最高。

琼脂糖凝胶中DNA检测方法的研究进展

作为研究生命遗传物质载体——核酸的工具,琼脂糖凝胶电泳已成为高效分离和分析核酸分子的必备手段,而在电泳后对DNA的检测是关键环节,因为它直接关系到实验结果显现与否。目前,常用的琼脂糖凝胶上DNA检测方法有荧光染色法、染料染色法、金属离子染色法、负染法等。近几十年来,许多研究者对染色方法进行了改进,

凝胶上蛋白质染色方法研究进展

凝胶电泳是分离蛋白质及多肽的一种强有力的生化分析工具。而蛋白质染色在凝胶电泳系统中则是一个重要的组成部分，随着蛋白质组学的飞速发展，凝胶蛋白质染色技术已成为衔接二维电泳和下游质谱分析的关键环节。目前，常用的凝胶上蛋白质染色方法主要有染料染色法、银染法、负染法和荧光染色法。本文对近几十年来在凝胶上蛋白质染色技术方面所取得的进展和突破进行总结，并对未来的发展方向做出展望。

血液蛋白质组学的研究进展

蛋白质组学研究已经成为当今生命科学的热点之一。蛋白质作为生命活动的主要承担者,在机体生理功能中发挥着重要作用,一直以来也是研究的重点。

温莪术蛋白双向电泳技术的建立

目的:建立温莪术的双向电泳技术(2-DE)体系。方法:采用TCA/丙酮沉降法提取蛋白,并用超速离心去除杂质。采用固相pH胶条在IPGphor TM Ⅲ等电聚焦系统上进行等电聚焦,采用Bio-Rad电泳仪进行SDS-PAGE电泳,以银染法染色。结果:得到了上百个点的双向电泳图谱。结论:本研究成功建立了温莪术蛋白双向电泳技术体系。

蛋白质组学在肺癌研究中的应用进展

蛋白质组学（proteomics）指的是在大规模水平上研究细胞内动态变化的蛋白质的翻译后修饰、组成与表达水平，探究蛋白质之间的相互作用，揭示蛋白质功能与细胞活动规律的学科。蛋白质组学技术主要包括蛋白质的分离、质谱鉴定及生物信息学等技术。

白内障晶状体的蛋白质组学研究进展

白内障是国内外居首位的致盲性眼病，其病因和发病机制一直是眼科学研究的热点，且取得了一定进展。目前，白内障的形成普遍认为有两种可能：一是凝集，即晶状体蛋白的不溶性增加致蛋白凝集而影响晶状体的透明度；二是构象异常，即晶状体蛋白的有序性被破坏致稳定性丧失。因此，晶状体蛋白的变化与白内障的形成有着重要联系。本文就近年来白内障晶状体蛋白的蛋白质组学研究进展进行综述，并展望其未来发展方向。

尿液蛋白质组学中样品前期处理方法的研究进展

尿液是血液经肾小球滤过，肾小管和集合管重吸收、排泻及分泌产生的终末代谢产物，其组成与性状可反映整个泌尿系统的状况。尤其是尿液中蛋白质种类和数量的变化携带有泌尿系统疾病发生、发展及预后的各种信息，而尿液蛋白质组学是诠释尿液蛋白所携带信息的最有效方法之一，而且此研究可以发现体内很多疾病的生物标志，例如膀胱癌和肾炎等。然而尿液中的盐浓度高，代谢废物多，还有很多低浓度的复合物，复杂的组成成分大大增加了尿液蛋白质组学的研究难度。因此，尿液样品的前期处理在尿液蛋白质组学分析和疾病分析过程中是一个相当重要的环节。本文着重阐述近年来国内外尿液蛋白质组学样品的前期处理方法以及各方法的比较。

氧化还原稳态与自噬在糖尿病心肌病中的研究进展

糖尿病(DM)患者心肌细胞长期处于高糖环境下极易发生凋亡并导致心功能异常,诱发糖尿病心肌病(DCM)[1]。DCM 是糖尿病发病过程中最为严重的并发症,是糖尿病患者发病和死亡的主要原因之一[2]。

金属硫蛋白对氧化应激引起的糖尿病心肌病的保护作用

糖尿病心肌病(DC)发生的氧化应激(OS)学说成为当前研究热点,即高血糖引起的氧化和硝基化促使了DC的发生。金属硫蛋白(MT)是一种广泛存在于真核细胞的抗氧化蛋白,本文对DC的氧化损伤机制及MT的保护作用进行综述。

紫草素通过上调C-X-C基序趋化因子受体4促进细胞自噬加快糖尿病创面愈合的机制研究

目的:探讨紫草素是否通过上调C-X-C基序趋化因子受体4(CXCR4)的表达调控细胞自噬促进糖尿病大鼠创面愈合。方法:将24只Sprague-Dawley(SD)大鼠按照随机数字表法分成4组:对照组、糖尿病组、糖尿病+紫草素组和糖尿病+紫草素+干扰CXCR4的短发卡RNA(sh-CXCR4)组,每组6只。通过腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型,利用直径为1 cm的皮肤打孔器在大鼠背部建立溃疡模型。分别于创伤后第0、7、14和21天计算创面愈合率。于创伤后第21天,采集皮肤组织,进行HE染色和Masson染色分析创面病理变化,采用CD31免疫组织化学法分析创面微血管密度以及Western blotting法检测创面组织CXCR4和细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1和可溶性p62蛋白的相对表达量,透射电镜观察自噬小体。组间比较采用单因素方差分析。结果:与对照组相比,糖尿病组大鼠创面愈合率(第21天分别为72.44%±6.21%和93.71%±6.76%)、创面组织新生血管和胶原沉积、微血管密度以及创面组织中CXCR4和细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1水平及自噬小体数量降低,而p62水平升高,差异均具有统计学意义( P<0.05)。与糖尿病组比较,糖尿病+紫草素组大鼠创面愈合率(第21天分别为86.74%±4.86%和72.44%±6.21%)、创面组织新生血管、胶原沉积情况、微血管密度、创面组织中CXCR4和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1水平及自噬小体数量升高,而p62水平降低,差异均具有统计学意义( P<0.05)。与糖尿病+紫草素组比较,糖尿病+紫草素+sh-CXCR4组大鼠创面愈合率(第21天分别为76.15%±3.85%和86.74%±4.86%)、创面组织新生血管、胶原沉积情况、微血管密度、创面组织中CXCR4、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1水平及自噬小体数量降低,而p62水平升高,差异具有统计学意义( P<0.05)。 结论:紫草素通过上调CXCR4的表达并激活细胞自噬,促进糖尿病溃疡创面的愈合。

离子对染色体系细菌蛋白染色效果分析

目的评价蛋白离子对染色体系（使用2种带反向电荷物质）对细菌蛋白染色效果,并比较其与同类试剂的异同。方法纯化扩增金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌等菌株,提取菌体蛋白,定量,4倍梯度稀释,十二烷基磺酸钠（SDS）聚丙烯酰胺凝胶电泳。分别用离子对染色体系与商品化进口试剂盒对凝胶进行染料染色和银染,对比分析染色效果。结果离子对染料最低可使0.16μg细菌蛋白显出条带,与进口染色试剂盒接近,但背景更干净,条带更清晰;离子对银染与国外进口试剂银染比较,操作更加简便,蛋白条带着色迅速而清晰,且可耐受较长时间显色（10~20 m in）;离子对染色体系中染料是银染的敏化剂,染料染色后再行银染与直接银染效果一致,且可省去敏化过程。结论离子对染色体系的染料染色与银染有很好的兼容性,染色结果重复性明显提高,更贴近蛋白分离染色检测的需要。

ATP合成酶的翻译后修饰

ATP合成酶(ATP synthase)是生物体内能量代谢的关键酶,是天然存在的分子旋转马达,为细胞生命活动提供所需能量,在生命体中具有重要作用。翻译后修饰(Post-translational modification,PTM)可改变蛋白的物理、化学性质、影响生物学活性,并调控许多生物反应过程,在某些病理情况下,ATP合成酶发生异常的翻译后修饰,导致机体损伤。