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经直肠热旋磁按摩治疗顽固性血精症 被引量:9
1
作者 金化民 詹炳炎 王玲珑 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期60-61,65,共3页
目的:探讨经直肠热旋磁按摩治疗顽固性血精症的有效性。方法:68例反复出血6个月以上的血精症患者采用常规方法结合经直肠热旋磁按摩治疗。每次45min,1次/d,10次为1个疗程。比较治疗前后前列腺和精囊的B超改变和观察精液红细胞变化... 目的:探讨经直肠热旋磁按摩治疗顽固性血精症的有效性。方法:68例反复出血6个月以上的血精症患者采用常规方法结合经直肠热旋磁按摩治疗。每次45min,1次/d,10次为1个疗程。比较治疗前后前列腺和精囊的B超改变和观察精液红细胞变化,并追踪观察。结果:经1~4个疗程的治疗显示:64例因前列腺炎、精囊炎引起的血精症显效52例(81.25%),有效12例(18.75%);随访1~10年。6例因饮酒、劳累、无节制的性生活而问断复发,再次采用热旋磁治疗,血精得到控制。4例精阜息肉经电灼术后血精停止。结论:采用常规方法配合经直肠热旋磁按摩,对提高顽固性血精症的疗效具有显著的效果。 展开更多
关键词 血精症 热旋磁 按摩
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老年大鼠睾丸Leydig细胞移植后血浆睾酮和抗疲劳的观察 被引量:2
2
作者 金化民 刘玉来 +3 位作者 吴荣芹 李庆昌 边瑞跃 张俊格 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2008年第3期335-337,F0003,共4页
目的:观察老年大鼠Leydig细胞移植后的血浆睾酮和抗疲劳能力的变化。方法:受体鼠为18个月龄的老年鼠60只,分为移植一组、移植二组、对照组,每组20只。供体鼠采用90只1月龄的同种大鼠,手术摘取睾丸经体外细胞培养后取纯化的Leydig细胞行... 目的:观察老年大鼠Leydig细胞移植后的血浆睾酮和抗疲劳能力的变化。方法:受体鼠为18个月龄的老年鼠60只,分为移植一组、移植二组、对照组,每组20只。供体鼠采用90只1月龄的同种大鼠,手术摘取睾丸经体外细胞培养后取纯化的Leydig细胞行细胞移植。结果:老年鼠睾丸呈退行性改变,生精上皮、间质细胞数都显著减少;血浆睾酮下降。Leydig细胞移植后血浆睾酮明显升高,负重游泳试验显示:游泳时间移植组较对照组显著延长。结论:Leydig细胞移植可以提高老年大鼠血浆睾酮水平,提升抗疲劳能力,对延缓中老年男子雄激素部分缺乏综合征有一定帮助。 展开更多
关键词 Leydig细胞移植 老年大鼠 睾酮 负重游泳
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硫酸铝钾溶液膀胱冲洗治疗泌尿道急性大出血58例 被引量:1
3
作者 金化民 金玮 +2 位作者 盛晖 王玲珑 詹炳炎 《医药导报》 CAS 2006年第3期222-224,共3页
目的探讨硫酸铝钾溶液(简称:铝溶液)行膀胱冲洗用于控制泌尿道大出血的效果及操作方法。方法泌尿道大出血患者111例,分为治疗组58例,用1.0%硫酸铝钾溶液经导尿管冲洗膀胱,每次2000~3000mL,依患者情况分为持续冲洗法和保留冲... 目的探讨硫酸铝钾溶液(简称:铝溶液)行膀胱冲洗用于控制泌尿道大出血的效果及操作方法。方法泌尿道大出血患者111例,分为治疗组58例,用1.0%硫酸铝钾溶液经导尿管冲洗膀胱,每次2000~3000mL,依患者情况分为持续冲洗法和保留冲洗法;对照组53例,以0.9%氯化钠溶液冲洗,比较两组冲洗前后的尿血红蛋白(Hb)含量变化。结果治疗组平均每例冲洗1.3d.显效77.6%(45/58),有效22.4%(13/58),总有效率100.0%;对照组平均每例冲洗3.2d,显效50.9%(27/53),有效22.6%(12/53),总有效率73.5%。治疗组止血效果和缩短止血时间均明显优于对照组(P〈0.01)。保留冲洗比持续冲洗效果更好,但须注意操作方法。结论硫酸铝钾溶液膀胱冲洗用于控制泌尿道大出血疗效确切,方法简单,操作安全,值得推广。 展开更多
关键词 硫酸铝钾溶液 出血 泌尿系疾病 投药 膀胱内
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明矾液犬泌尿道灌注止血后的膀胱组织学变化及铝的吸收观察 被引量:1
4
作者 金化民 邱启裕 +1 位作者 王玲珑 詹炳炎 《中国中医药科技》 CAS 1994年第4期30-31,38,共3页
本文观察了明矾液灌注犬泌尿道止血后的膀胱组织学及铝在泌尿道的吸收情况。灌注后膀胱镜检提示:2h~4h膀胱粘膜苍白、皱缩、血管影消失;24h后膀胱粘膜转为红润,血管又隐约可见。光镜观察:血管管壁皱缩、管腔缩小,血管内皮细胞呈立方形... 本文观察了明矾液灌注犬泌尿道止血后的膀胱组织学及铝在泌尿道的吸收情况。灌注后膀胱镜检提示:2h~4h膀胱粘膜苍白、皱缩、血管影消失;24h后膀胱粘膜转为红润,血管又隐约可见。光镜观察:血管管壁皱缩、管腔缩小,血管内皮细胞呈立方形、固有层上1/3可见淋巴细胞浸润。电镜观察:细胞完整、线粒体无肿胀、核膜清楚、核染色质排列无异常改变。测定了三种浓度的明矾液灌注前后的血铝含量,经对比分析无显著性差异(P>0.5)。结果表明:低浓度的明矾液灌注作用部位浅表,细胞仍具有活性,对粘膜的损伤短暂且可逆,泌尿道灌注明矾液不会增加血铝含量。 展开更多
关键词 明矾液 泌尿道 止血 膀胱 药理
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尿液白细胞计数诊断尿路感染的意义
5
作者 金化民 詹炳炎 《临床荟萃》 CAS 1987年第9期409-410,共2页
尿路感染的实验诊断方法很多。以Kass创立的尿培养菌落计数应用最广。近年来研究表明:尿路感染的病原除细菌以外,衣原体、支原体及病毒等也是尿路感染的致病微生物。由于抗菌药物的广泛应用,以及尿路感染患者常常在发病初期即已求治,因... 尿路感染的实验诊断方法很多。以Kass创立的尿培养菌落计数应用最广。近年来研究表明:尿路感染的病原除细菌以外,衣原体、支原体及病毒等也是尿路感染的致病微生物。由于抗菌药物的广泛应用,以及尿路感染患者常常在发病初期即已求治,因而相当数量的有症状的膀胱和尿道感染患者常常尿液培养细菌计数不足10~5/ml或无菌生长。Brumfitt在一组有尿频、尿急、尿痛和明显脓尿的病人中,报告菌尿的检出率不足50%,因此Brumfitt介绍了一种以新鲜清洁尿液白细胞计数进行尿路感染的诊断方法。这一方法较常规检查尿沉渣白细胞数更精确、且操作简便、迅速。我们采用这一方法检查正常人36例、非感染性泌尿道疾病34例及尿路感染54例的尿白细胞计数,进行分析比较。报告如下。 展开更多
关键词 尿路感染 尿白细胞 白细胞计数 尿液
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欢快虫草口服液对去势大鼠性腺的影响
6
作者 金化民 王玲珑 +1 位作者 张茨 李德鸿 《医学新知》 CAS 2000年第4期214-215,共2页
关键词 欢快虫草口服液 男性性功能减退 中医药疗法
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完美您的人生——专家谈勃起功能障碍(ED)
7
作者 金化民 张茨 +1 位作者 宋超 黄楠 《中国处方药》 2002年第4期59-63,共5页
记者:随着人类社会文明的不断提高,人们越来越关注生活质量。勃起功能障碍(ED)作为一种男性的多发性疾病,不但影响人们的生活质量,而且也是困扰广大医务人员的棘手难题。作为泌尿外科的专家,请您谈谈ED疾病的药物治疗和临床方面情况。
关键词 ED 勃起功能障碍 生活质量 性疾病 多发性 医务人员 临床 专家 记者 完美
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“减肥”前列腺
8
作者 金化民 金玮 +1 位作者 张茨 宋超 《中国处方药》 2002年第8期50-53,共4页
希求长生,渴望不老,是人类自古以来梦寐以求的愿望.伴随着人类寿命的延长,人口老龄化日益显现.作为一种老年男性常见病,良性前列腺增生症(BPH)--又称前列腺肥大,越来越受到人们的重视.
关键词 良性前列腺增生症 药物治疗 5Α-还原酶抑制剂 氟他胺
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大鼠自体原位肾移植缺血再灌注损伤模型的建立 被引量:8
9
作者 田龙 罗小敏 +2 位作者 刘芸 金化民 王玲珑 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2001年第3期202-204,210,共4页
目的 :建立一种简便的大鼠自体原位肾移植模型 ,以便于研究肾移植后缺血再灌注损伤 (IRI)与肾移植后肾脏损伤的关系。方法 :雄性SD大鼠 2 0只 ,自体原位肾移植组 (A组 )和假手术组 (B组 )各 10只。左腰部纵切口 ,采用显微外科技术在后... 目的 :建立一种简便的大鼠自体原位肾移植模型 ,以便于研究肾移植后缺血再灌注损伤 (IRI)与肾移植后肾脏损伤的关系。方法 :雄性SD大鼠 2 0只 ,自体原位肾移植组 (A组 )和假手术组 (B组 )各 10只。左腰部纵切口 ,采用显微外科技术在后腹膜间隙游离左侧输尿管及肾脏、肾蒂。A组 :以无损伤动脉夹闭合肾动脉 ,采用管径0 .2mm的玻璃穿刺针经肾动脉恒压 ( 10 0mmHg)灌注 1ml 0~ 4℃生理盐水 ,至肾脏颜色变白后暂时阻断肾动、静脉 ,吻合肾动脉切口 ,采用自制的局部冷保存装置 ,将肾脏置于 0~ 4℃生理盐水中 ,8h后开放肾动、静脉使肾脏复灌 ,复灌前切除右侧肾脏。B组 :采用同样方法游离暴露肾脏后 ,不实施肾脏血流阻断和肾脏灌注 ,单纯低温保存 8h ,随后同法切除右肾。A、B组分别于肾脏复灌后 2h、2 4h抽取血液 2ml;肾脏复灌后 2 4h后切除左侧肾脏。结果 :A组 2h、2 4h血清Cr、Bun值均高于B组 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;A组肾脏病理切片可见典型肾脏缺血再灌注损伤改变。结论 :大鼠自体原位肾移植缺血再灌注损伤模型手术操作简便 ,手术成功率高 ,充分模拟临床肾移植IRI特点 。 展开更多
关键词 再灌注损伤 肾移植 动物疾病模型 大鼠 SPRAGUE-DAWLEY 自体原位移植
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输尿管细胞外基质修复输尿管缺损的实验研究 被引量:6
10
作者 宋超 杨宇如 +3 位作者 杨嗣星 金化民 王玲珑 詹炳炎 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2004年第2期264-267,共4页
为了寻求理想的输尿管替代材料 ,采用生化方法制备了一种新型的组织工程材料细胞外基质 (Extra-cellular Matrix ,ECM) ,并用于替代同种异体输尿管缺损 ,结果表明 ECM很好的促进了缺损组织的再生 ,替代术后 16周再生组织的形态与功能已... 为了寻求理想的输尿管替代材料 ,采用生化方法制备了一种新型的组织工程材料细胞外基质 (Extra-cellular Matrix ,ECM) ,并用于替代同种异体输尿管缺损 ,结果表明 ECM很好的促进了缺损组织的再生 ,替代术后 16周再生组织的形态与功能已与正常组织无明显差异。 展开更多
关键词 细胞外基质 输尿管缺损 组织工程 ECM 氨基酸序列
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三种建立小鼠乳腺癌移植模型方法的比较 被引量:8
11
作者 孙金中 孙圣荣 +5 位作者 金化民 姚峰 涂毅 魏文 姚晓莉 张冰 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2006年第3期335-337,i0002,共4页
目的:用MA782细胞建立稳定的小鼠乳腺癌模型,选择最佳的模型制作方法。方法:60只BALB/c小鼠随机分为3组,每组20只,分别采用小鼠左腋窝皮下细胞悬液注射法、组织块悬液注射法、组织块种植法制作小鼠乳腺癌模型,比较各组的种植成活率、肿... 目的:用MA782细胞建立稳定的小鼠乳腺癌模型,选择最佳的模型制作方法。方法:60只BALB/c小鼠随机分为3组,每组20只,分别采用小鼠左腋窝皮下细胞悬液注射法、组织块悬液注射法、组织块种植法制作小鼠乳腺癌模型,比较各组的种植成活率、肿瘤生长率,并观察肿瘤的生物学形态。结果:组织块悬液注射法操作简便,经济,成瘤率高,肿瘤大小均一,肿瘤呈浸润性生长,增殖旺盛;细胞悬液注射法操作复杂,价格昂贵;组织块种植法操作复杂,成瘤率较低,大小相差较大。结论:三种方法中,组织块悬液注射法是最佳的模型制作方法。 展开更多
关键词 乳腺癌 动物模型 MA782细胞株 BALB/C小鼠 组织块悬液注射
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丹参与CsA对移植肾缺血再灌注损伤防治作用的对比研究 被引量:25
12
作者 雷伟 周江桥 +1 位作者 王玲珑 金化民 《临床外科杂志》 2005年第6期366-368,共3页
目的探讨药物对移植肾缺血再灌注损伤(IRI)的防治作用。方法40只健康雄性日本大耳兔随机分为四组:生理盐水对照组、单纯灌注液组、丹参+灌注液组、环孢素A(CsA)+灌注液组。用套管针穿刺左肾动、静脉,形成局部循环,灌注后原位低温保存2h... 目的探讨药物对移植肾缺血再灌注损伤(IRI)的防治作用。方法40只健康雄性日本大耳兔随机分为四组:生理盐水对照组、单纯灌注液组、丹参+灌注液组、环孢素A(CsA)+灌注液组。用套管针穿刺左肾动、静脉,形成局部循环,灌注后原位低温保存2h,结扎并切除右肾后使左肾复灌。于术后6、24h分别取血标本,24h后取左肾标本。测定血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr);TUNEL法检测左肾组织的细胞凋亡;免疫组化法测定左肾组织HSP70及NF-κB的表达。结果丹参组和CsA组能有效地改善肾功能(BUN、Cr),前者明显提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,减少丙二醛(MDA),而后者明显诱导HSP70的表达。二者均能减少细胞的凋亡。结论IRI是由多因素、多环节共同作用的结果,丹参及CsA能分别从不同方面对IRI进行防治。 展开更多
关键词 丹参 环孢素A 肾脏 缺血再灌注损伤
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聚β-羟基丁酸酯作为肾上腺细胞载体的实验研究 被引量:2
13
作者 李伟 胡平 +4 位作者 张孝斌 高峰 张杰 程帆 金化民 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2004年第4期606-609,共4页
为了探索聚 β-羟基丁酸酯 (PHB)作为肾上腺细胞移植载体的可行性。将肾上腺细胞与 PHB共培养 ,观察 PHB对体外培养的肾上腺细胞增殖、分泌功能的影响。将肾上腺细胞植入到受鼠体内 ,观察受鼠体内激素水平的动态变化及局部组织学变化。... 为了探索聚 β-羟基丁酸酯 (PHB)作为肾上腺细胞移植载体的可行性。将肾上腺细胞与 PHB共培养 ,观察 PHB对体外培养的肾上腺细胞增殖、分泌功能的影响。将肾上腺细胞植入到受鼠体内 ,观察受鼠体内激素水平的动态变化及局部组织学变化。肾上腺细胞可以在 PHB上生长 ,PHB对体外培养的肾上腺细胞的增殖、分泌功能无影响。实验组大鼠体内激素水平比单纯双侧肾上腺切除组的激素水平要高 ,两者差别有显著性 (P<0 .0 5 )。PHB对肾上腺细胞的生长、增殖、分泌功能无影响。PHB在体内逐步降解。PHB作为细胞载体应用于肾上腺细胞移植具有可行性。 展开更多
关键词 聚Β-羟基丁酸酯 肾上腺细胞 实验 细胞移植 细胞载体 生物材料
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昆明白小鼠间同种生精干细胞移植 被引量:3
14
作者 张茨 王玲珑 +1 位作者 宋超 金化民 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期417-420,共4页
目的 :研究同种生精干细胞移植的可行性。 方法 :在不采用免疫抑制剂的条件下 ,进行基因型相似的封闭群昆明白小鼠间的同种生精干细胞移植 ,观察其生精恢复情况。每次穿刺右侧睾丸网 ,左侧睾丸作自身对照。结果 :成功移植的小鼠睾丸生... 目的 :研究同种生精干细胞移植的可行性。 方法 :在不采用免疫抑制剂的条件下 ,进行基因型相似的封闭群昆明白小鼠间的同种生精干细胞移植 ,观察其生精恢复情况。每次穿刺右侧睾丸网 ,左侧睾丸作自身对照。结果 :成功移植的小鼠睾丸生精功能基本恢复正常。 结论 :在基因型类似的昆明白小鼠进行同种生精干细胞移植是可行的。 展开更多
关键词 生精干细胞 同种移植 昆明白小鼠
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镰刀状肾实质切开术治疗复杂性鹿角状肾结石的实验研究和临床应用 被引量:2
15
作者 杨嗣星 刘勇 +4 位作者 宋超 王玲珑 胡云飞 田龙 金化民 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2003年第1期71-73,共3页
目的 :探讨镰刀状肾实质切开对犬肾功能的影响及镰刀状肾实质切开术治疗复杂性鹿角状肾结石的临床疗效。方法 :18只成年犬分 3个手术组 (镰刀状肾实质切开组、肾后唇中下 1 3肾实质切开组、无萎缩性肾实质切开组 ) ,观测手术前后肾功能... 目的 :探讨镰刀状肾实质切开对犬肾功能的影响及镰刀状肾实质切开术治疗复杂性鹿角状肾结石的临床疗效。方法 :18只成年犬分 3个手术组 (镰刀状肾实质切开组、肾后唇中下 1 3肾实质切开组、无萎缩性肾实质切开组 ) ,观测手术前后肾功能的变化 ;采用镰刀状肾实质切开取石术治疗 37例复杂性鹿角状肾结石病人。结果 :镰刀状肾实质切开对肾功能的影响要明显轻于无萎缩性肾实质切开 ,而与肾后唇中下 1 3肾实质切开无显著性差异 ;临床应用 37例 ,全部一次取尽结石。结论 :镰刀状肾实质切开对肾功能影响小 ,是治疗复杂性鹿角状肾结石的理想术式。 展开更多
关键词 镰刀状肾实质切开术 治疗 复杂性鹿角状肾结石 实验研究 临床应用
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同种异体肾上腺细胞移植 被引量:4
16
作者 李伟 张孝斌 +3 位作者 张杰 程帆 金化民 吴天鹏 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2003年第2期157-160,共4页
目的 :探索肾上腺细胞移植治疗肾上腺皮质功能不全的可行性。方法 :利用聚 β 羟基丁酸酯 (PHB)作为细胞载体进行肾上腺细胞移植 ,观察PHB对肾上腺细胞增殖、分泌功能的影响。将种植了肾上腺细胞的PHB植入到双侧肾上腺切除的模型大鼠体... 目的 :探索肾上腺细胞移植治疗肾上腺皮质功能不全的可行性。方法 :利用聚 β 羟基丁酸酯 (PHB)作为细胞载体进行肾上腺细胞移植 ,观察PHB对肾上腺细胞增殖、分泌功能的影响。将种植了肾上腺细胞的PHB植入到双侧肾上腺切除的模型大鼠体内 ,观察受鼠体内激素水平的动态变化及局部组织学变化。结果 :肾上腺细胞可以在PHB上生长 ,PHB对肾上腺细胞增殖、分泌功能无影响。术后 6周实验组大鼠体内皮质酮水平比对照组高[(14 0± 6 0 )vs (2 0± 17)ng·ml- 1 ,P <0 .0 5 ]。随着PHB植入体内时间的延长 ,炎性细胞逐步减少 ,纤维结蒂组织逐步消散 ,材料逐步降解 ,血管长入。结论 :肾上腺细胞植入体内后存活并具有分泌功能。 展开更多
关键词 肾上腺皮质功能不全 细胞移植 生物材料
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白消安诱导小鼠无精子症模型 被引量:10
17
作者 张茨 王玲珑 +1 位作者 金化民 宋超 《医学新知》 CAS 2003年第4期201-202,共2页
目的 采用白消安诱导建立小鼠无精子症模型。方法 采用腹腔内单次注射白消安 (40mg/kg) ,对白消安的毒性、模型的形态学变化 ,小鼠的生育能力以及免疫功能进行了观察。结果 白消安单次注射可造成半数的小鼠死亡 ,用药后 4周 ,睾丸曲... 目的 采用白消安诱导建立小鼠无精子症模型。方法 采用腹腔内单次注射白消安 (40mg/kg) ,对白消安的毒性、模型的形态学变化 ,小鼠的生育能力以及免疫功能进行了观察。结果 白消安单次注射可造成半数的小鼠死亡 ,用药后 4周 ,睾丸曲细精管呈唯支持细胞样表现 ,3个月有 2 0 %的曲细精管恢复生精 ,存活小鼠中半数小鼠的生育力正常 ,模型小鼠的免疫学功能正常。结论 该小鼠无精症模型用作生精干细胞移植的受体模型是可行的。 展开更多
关键词 白消安 诱导 小鼠 无精子症 动物模型 免疫学功能 毒性反应
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兔膀胱移行上皮细胞的体外培养及鉴定 被引量:2
18
作者 葛名欢 程帆 +1 位作者 张孝斌 金化民 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2008年第5期596-598,I0004,共4页
目的:探索并建立兔膀胱移行上皮细胞的体外培养及扩增方法,为泌尿系器官的组织工程研究提供种子细胞。方法:采用刮削法取得移行细胞单细胞悬液,在加入了10%胎牛血清、表皮生长因子等营养物质的DMEM/F12培养基中进行原代及传代培养,并观... 目的:探索并建立兔膀胱移行上皮细胞的体外培养及扩增方法,为泌尿系器官的组织工程研究提供种子细胞。方法:采用刮削法取得移行细胞单细胞悬液,在加入了10%胎牛血清、表皮生长因子等营养物质的DMEM/F12培养基中进行原代及传代培养,并观察细胞形态变化和进行Giemsa染色和免疫组化染色证实细胞来源。结果:原代培养细胞3 d开始贴壁生长,10-14 d细胞融合成单层,可进行传代培养,传至第7代后细胞开始出现衰退现象,经Giemsa染色、免疫组化染色证实为移行上皮细胞。结论:该培养方法能在较短时间内获得大量的移行上皮细胞,具有细胞纯度高、成功率高及扩增迅速的特点。 展开更多
关键词 膀胱 移行上皮细胞 体外培养
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雌雄激素联用制作犬前列腺增生动物模型 被引量:12
19
作者 陈晖 刘修恒 金化民 《临床泌尿外科杂志》 2005年第1期44-46,共3页
   目的:探讨前列腺增生症(BPH)的动物模型的制备方法。方法:将模型组年轻家犬去势后,肌肉注射5α -雄甾烷- 3α、17β- 二醇和17β雌二醇,每周3次,每周每只的总剂量为雄激素 75 mg,雌激素0.75 mg,连续注射6个月,并与不用激素的正常...    目的:探讨前列腺增生症(BPH)的动物模型的制备方法。方法:将模型组年轻家犬去势后,肌肉注射5α -雄甾烷- 3α、17β- 二醇和17β雌二醇,每周3次,每周每只的总剂量为雄激素 75 mg,雌激素0.75 mg,连续注射6个月,并与不用激素的正常对照组和老年组前列腺进行比较。结果:模型组犬前列腺的体积、重量、病理变化和间质上皮比例与老年组犬前列腺基本相似,对照组犬前列腺未有变化。结论:表明用此方法能很好地复制出BPH。 展开更多
关键词 前列腺增生 性激素 疾病模型 动物
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大鼠肌源性干细胞的培养与鉴定(英文) 被引量:1
20
作者 李爱斌 王玲珑 +1 位作者 金化民 李晶晶 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第25期164-166,F0003,共4页
背景:肌源性干细胞是一种成体多能干细胞,已成为基因治疗和细胞介导的组织工程领域内的研究热点,临床应用自体肌源性干细胞注射治疗压力性尿失禁具有广泛前景。目的:探讨大鼠肌源性干细胞体外原代培养的方法,为临床应用自体肌源性干细... 背景:肌源性干细胞是一种成体多能干细胞,已成为基因治疗和细胞介导的组织工程领域内的研究热点,临床应用自体肌源性干细胞注射治疗压力性尿失禁具有广泛前景。目的:探讨大鼠肌源性干细胞体外原代培养的方法,为临床应用自体肌源性干细胞注射治疗压力性尿失禁提供实验依据。设计:重复观察测量。单位:武汉大学人民医院生殖中心与泌尿外科。材料:实验于2003-12/2004-05在武汉大学人民医院泌尿外科实验室完成。选取4~6周龄雌性SD大鼠20只,XI型胶原酶、胰酶、多聚赖氨酸(Sigma公司),dispase酶(Gibco公司),鸡胚提取液(自制)。方法:①将大鼠以质量浓度为10g/L的戊巴比妥钠30g/kg腹腔麻醉后,无菌条件下取腓肠肌,置入冷DMEM培养基中,D-Hank’s液洗涤组织块,除去筋膜、肌腱、神经和血管,剪成1.0~3.0mm3小块,移入离心管。向组织中加入0.2%XI型胶原酶及0.1%的胰酶,采用胶原酶分离大鼠骨骼肌细胞。②应用差速贴壁法大鼠骨骼肌细胞进行纯化。细胞筛网过滤后接种至多聚赖氨酸包被的培养瓶中,37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中孵育1h,未贴壁细胞移入新的培养瓶中,加入新的培养基37℃培养1h后,未贴壁细胞再次转瓶换液,37℃培养过夜,如此反复,每次间隔24h转瓶换液,培养第5~6天贴壁的细胞即肌源性干细胞。③细胞生长到70%融合后,胰蛋白酶消化,以1∶2的比例进行传代。传代细胞消化后接种于放有盖玻片的6孔培养板中,加入生长培养基,24h后制备细胞爬片,采用免疫组织化学方法鉴定所培养细胞上特异性结蛋白抗原和干细胞抗原-1的表达。主要观察指标:肌源性干细胞的形态及其鉴定结果。结果:①肌源性干细胞的形态观察:从骨骼肌组织中分离出来的肌源性干细胞呈球形,折光性强。培养12h后开始贴壁仍为圆形,48h后贴壁完全并开始增生,细胞逐渐延展成梭形或纺锤形,有两极,体积小。随培养时间的延长,细胞相互融合形成成熟的多核肌管。②肌源性干细胞的鉴定结果:细胞特异性结蛋白抗原和干细胞抗原-1染色呈阳性,荧光显微镜可见细胞浆发出红色荧光,阳性率达90%。结论:肌原性干细胞属于成体干细胞,具有取材方便、免疫原性低、移植后存活时间长等优点。高纯度的肌原性干细胞可通过体外原代培养获取,免疫组化技术可鉴定其肌源性和干细胞特性,在组织工程和基因治疗中具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 干细胞/细胞学 细胞分化 细胞分离 尿失禁 压力性/治疗 免疫组织化学 染色法
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