黄芪总皂苷对体外培养大鼠神经干细胞增殖的影响

目的:体外研究不同浓度黄芪总皂苷(TSA)对神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法:体外分离培养大鼠胚胎NSCs,nestin免疫荧光标记鉴定NSCs;不同浓度TSA(0.1、0.2、0.5、1、2、5和10μg/ml)处理NSCs 24、48和72h,采用MTT法、Brd U/Nestin免疫荧光双标检测细胞增殖情况。结果:体外分离培养的神经干细胞nestin染色为阳性;MTT实验结果显示,与空白对照组比较,TSA呈剂量和时间依赖性促进NSCs增殖,其中1、2μg/ml TSA处理48h效果最显著(P<0.01);Brd U/Nestin免疫荧光双标结果显示,与空白对照组比较,TSA 1、2μg/ml处理48h后,Brd U阳性细胞显著增多(P<0.01)。结论:TSA促进体外培养的NSCs增殖,且1、2μg/ml处理48h效果最好。

低剂量鱼藤酮诱导BV2细胞IL-6产物及montelukast的作用

目的在体外帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）模型观察低剂量鱼藤酮诱导的BV2小胶质细胞白介素6（IL-6）生成及montelukast的作用。方法以PD诱导因子鱼藤酮处理小鼠小胶质细胞系BV2细胞。Western blot方法检测BV2细胞前炎症细胞因子IL-6蛋白表达,ELISA方法检测BV2细胞IL-6释放。观察Cys LT1R拮抗剂montelukast对鱼藤酮诱导的小胶质细胞IL-6的影响。结果低剂量鱼藤酮（0.3～3 n M）浓度依赖性地增加IL-6蛋白表达;以鱼藤酮（3 n M）处理细胞1～24h,时间依赖性的诱导IL-6释放增加。Cys LT1R拮抗剂montelukast降低鱼藤酮增高的BV2细胞IL-6水平。结论低剂量鱼藤酮诱导小胶质细胞前炎症细胞因子IL-6增加,montelukast抑制鱼藤酮诱导BV2细胞效应。

补阳还五汤上调miR-199a-5p表达促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成

目的:探讨补阳还五汤促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成的机制。方法:实验大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、补阳还五汤组、拮抗剂组、拮抗剂对照组,各14只。除手术对照组外,其余组采用线栓法诱导大脑中动脉阻塞模型,缺血90 min后再灌注14 d;补阳还五汤组、拮抗剂组和拮抗剂对照组在缺血后24 h灌胃补阳还五汤(13 g/kg);所有大鼠腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU,50 mg/kg),1次/d,连续14 d;缺血后第5天,拮抗剂组和拮抗剂对照组分别于侧脑室注射miR-199a-5p拮抗剂和miR-199a-5p拮抗剂对照10 nmol。采用改良神经损伤严重程度评分(mNSS)和角试验评价神经功能缺损,甲苯胺蓝染色检测脑梗死体积,免疫荧光双标记法检测脑缺血大鼠神经发生和血管生成,实时逆转录PCR检测miR-199a-5p表达,蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达。结果:补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复(P<0.05或P<0.01),减小梗死体积(P<0.05),增加BrdU^+/DCX^+、BrdU^+/NeuN^+、BrdU^+/vWF^+细胞数(均P<0.01),上调miR-199a-5p表达(P<0.01),促进VEGF和BDNF蛋白表达(均P<0.05);侧脑室注射miR-199a-5p拮抗剂后则逆转上述效应。结论:补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经发生和血管生成,其机制可能与上调miR-199a-5p增加VEGF和BDNF表达有关。

川芎嗪预处理骨髓间充质干细胞移植对脑缺血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的:探讨川芎嗪(TMP)预处理骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脑缺血大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响。方法:采用全骨髓贴壁法分离BMSCs,川芎嗪(50、100μmol/L)预处理24h。线栓法诱导大鼠大脑中动脉阻塞模型,分假手术组、模型组、BMSCs组和川芎嗪预处理组。缺血后第1、7和14天,采用改良的神经损伤严重程度评分(m NSS)和角试验进行神经功能评价;缺血后第14天,采用原位末端标记(TUNEL)法观察神经细胞凋亡,Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:与BMSCs组比较,川芎嗪预处理组大鼠m NSS评分和右转次数均显著减少,TUNEL阳性细胞数显著减少(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著上调,Bax蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论:川芎嗪预处理BMSCs移植促进脑缺血大鼠神经功能恢复,机制可能与其调控Bcl-2/Bax表达抑制神经细胞凋亡有关。

微针透皮技术在疫苗接种中应用的研究现状

微针是一种新型的给药系统,能穿透皮肤角质层,形成微孔通道,促进药物的渗透,在疫苗递送中有重要作用。本文从微针透皮的原理,以不同类型微针在疫苗递送中的作用等方面系统地阐述了微针透皮技术在疫苗接种中的应用,并展望了微针疫苗未来的发展方向。