静脉注射同种异体骨髓间充质干细胞对血管性痴呆大鼠海马区脑组织形态及微管相关蛋白2表达的影响

目的:骨髓间充质干细胞移植进入脑组织后,能否影响脑组织的形态及微管相关蛋白2的表达从而改善痴呆状态下的认知功能?观察静脉注射同种异体骨髓间充质干细胞后,血管性痴呆模型大鼠脑海马CA1区脑组织形态及微管相关蛋白2的变化。方法:实验于2004-08/2005-05在解放军第二军医大学完成。①实验动物:健康雄性SD大鼠60只,随机数字表法分为细胞移植组、模型对照组、假手术组,20只/组。②实验方法:另取20只大鼠用于体外分离、培养扩增骨髓间充质干细胞,传至第2代时加入BrdU进行标记,制备单细胞悬液,调整细胞浓度为3×109L-1。细胞移植组、模型对照组采用双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆动物模型,假手术组仅暴露双侧颈总动脉但不结扎。造模后4周,细胞移植组尾静脉注射骨髓间充质干细胞悬液1mL,模型对照组注射等量磷酸盐缓冲液,假手术组不进行尾静脉注射。③实验评估:细胞移植后4周,苏木精-伊红染色检测各组大鼠脑海马CA1区脑组织形态变化,免疫荧光染色观察经BrdU标记的骨髓间充质干细胞示踪情况,免疫组织化学染色检测脑海马CA1区微管相关蛋白2的表达。结果:细胞移植组5只大鼠死亡,模型对照组3只大鼠死亡,假手术组均进入结果分析。①脑海马CA1区锥体细胞形态变化:细胞移植组和模型对照组CA1区锥体细胞较假手术组排列稀疏、紊乱,细胞肿胀、脱失,核固缩,但细胞移植组细胞排列较模型对照组规则,且细胞肿胀、脱失及核固缩较模型对照组减轻。②脑海马内骨髓间充质干细胞的示踪:细胞移植后4周,大鼠脑海马内可见被绿色荧光标记的骨髓间充质干细胞。③脑海马CA1区微管相关蛋白2的表达:与假手术组比较,细胞移植组及模型对照组脑海马CA1区锥体细胞层微管相关蛋白2阳性产物的吸光度值均明显降低(P<0.05);细胞移植组明显高于模型对照组(P<0.05)。结论:静脉注射骨髓间充质干细胞能够使血管性痴呆大鼠脑海马CA1区神经元损伤及脱失减轻,并使微管相关蛋白2表达增加。

骨髓间充质干细胞对血管性痴呆大鼠海马CA1区突触素表达的影响

目的:观察静脉注射同种异体骨髓间充质干细胞对血管性痴呆(VaD)模型大鼠海马CA1区突触素表达的影响。方法:体外分离、扩增大鼠骨髓间充质干细胞(MSC),并用BrdU标记。大鼠双侧颈总动脉结扎法制备血管性痴呆模型。1周后经尾静脉注射MSCs,观察注射后4周大鼠海马CA1区突触素(SYN)表达的变化。结果:4周后VaD大鼠海马CA1区锥体细胞层内SYN表达较正常对照组减少,差异有显著性(P<0.01);MSCs注射后4周,大鼠海马CA1区可见荧光标记的MSCs,SYN表达较未注射组增加,差异有显著性(P<0.01)。结论:静脉注射MSCs使VaD大鼠海马CA1区突触素表达增加。

干燥综合征神经系统病变的临床及病理分析

目的探讨原发性干燥综合征(Sjogren综合征;pSS)神经系统病变的临床及组织病理特征。方法对18例并发神经系统损伤的pSS患者的临床及病理资料进行回顾性分析。结果周围神经系统病变pSS(PNS-pSS)表现为对称性感觉运动性周围神经病、多发性单神经病、感觉性周围神经病、颅神经损伤。中枢神经系统病变pSS(CNS-pSS)表现为多发性硬化、缓慢进展的认知障碍和共济障碍、脑炎。头颅MRI显示脑白质多发异常信号、脑白质、脑干及小脑多发异常信号、脑脓肿。唇黏膜活检示部分腺体萎缩,腺泡及间质内可见淋巴、单核吞噬细胞浸润。腓肠神经活检既有典型血管炎改变也有非血管炎性改变。脑活检可见白质脱髓鞘及小静脉周围炎性细胞浸润以及典型血管炎改变。结论Sjogren综合征导致的神经系统损伤呈多样性,且常先于Sjogren综合征的诊断之前出现。了解其神经系统损伤的临床表现、影像学特点及组织病理改变对认识本病具有重要的临床意义。

神经肽Y对癫痫大鼠海马齿状回内FOS蛋白表达的影响

采用海人藻酸 (KA)癫痫模型 ,观察侧脑室内注射神经肽 Y (NPY)对癫痫大鼠海马齿状回内 FOS蛋白表达的影响。结果发现脑室内注射 NPY后海马齿状回内 FOS蛋白的表达较对照组降低 ,有显著性差异 (P<0 .0 1)。认为 NPY能抑制 FOS蛋白的表达 ,具有抗癫痫作用。

骨髓间充质干细胞移植对血管性痴呆大鼠海马胆碱能系统的影响

目的观察同种异体骨髓间充质干细胞(BMSCs)对血管性痴呆(VaD)模型大鼠海马胆碱能系统的影响。方法体外分离、扩增大鼠BMSCs,并用BrdU标记。采用双侧颈总动脉结扎法(2-VO)制备VaD模型。将大鼠随机分为3组:A组(BMSCs移植组):于双侧颈总动脉结扎后4周经尾静脉注射BMSCs;B组(对照组):注射同等剂量PBS;C组(假手术组):暴露双侧颈总动脉但不结扎,不进行尾静脉注射。BMSCs注射后4周,采用免疫荧光染色观察大鼠海马BrdU标记细胞;测定海马结构内乙酰胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)的活性。结果BMSCs移植后4周A组大鼠海马结构可见荧光标记的BMSCs;A、B组AChE和ChAT活性均较C组降低(P<0.05),且A组较B组显著增强(P<0.05)。结论静脉移植BMSCs可增强VaD大鼠海马胆碱能系统活性。

大鼠汞中毒时小脑颗粒细胞凋亡与半胱氨酸蛋白酶-3及Bcl-2的关系

目的 探讨大鼠汞中毒时小脑颗粒层细胞凋亡与半胱氨酸蛋白酶 (caspases) 3及Bcl 2的关系。方法 在大鼠服用氯化甲基汞 (MMC) 4mg/kg每日 1次的动物汞中毒模型上 ,观察汞中毒第 11、15、18、19d大鼠的组织及免疫病理改变 ,并采用激光微分离术结合逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,观察了颗粒层细胞凋亡与caspases 3及Bcl 2的关系。结果 汞中毒 18d组 ,大鼠小脑脑回深部近白质区的颗粒层出现TUNEL染色阳性的凋亡细胞 ;汞中毒 19d组 ,凋亡细胞的数量明显增加 ,颗粒层细胞破坏 ,但Calvidine染色显示Purkinje细胞的结构及形态正常。MRF 1及GFAP染色可见大量的小胶质细胞反应及星形细胞增生。汞中毒第 11d开始 ,与凋亡密切相关的因子caspases 3mRNA的表达开始上调 ,并逐渐增加 ,至 18d时达到高峰 ,但第 19d时明显下降。主要的抗凋亡因子Bcl 2则呈现相反的变化 ,在中毒后第 11d表达下调 ,第 19d时尤为明显 ,颗粒细胞的标志物Zic 1在汞中毒后即逐渐下降 ,提示颗粒细胞破坏。结论 汞中毒导致的小脑颗粒层细胞变性与caspases 3介导的细胞凋亡及Bcl 2下调有关。

TIA患者血小板GMP-140、GP_(53)的变化及临床意义

目的了解ＴＩＡ患者血小板ＧＭＰ－１４０及ＧＰ５３的变化。方法用流式细胞术，检测了ＴＩＡ患者血小板ＧＭＰ－１４０、ＧＰ５３的阳性表达率。结果梗塞型ＴＩＡ组（短期进展为脑梗塞者），两种ＧＰ表达率显著高于单纯ＴＩＡ组（Ｐ＜０．０１）和健康对照组（Ｐ＜０．００５）；单纯ＴＩＡ组与对照组比较差异无显著性；梗塞型ＴＩＡ组梗塞前后比较，梗塞后又高于梗塞前（Ｐ＜０．０１）。结论有助于预测ＴＩＡ的发展趋向，对ＴＩＡ发作频繁、间歇时间短，症状持续长和血小板活化程度高的患者，可视为血栓前状态，应积极进行治疗。

脑梗死患者抗血小板药物二级预防后脑梗死复发类型及其危险因素研究

目的:研究脑梗死患者抗血小板药物二级预防后脑梗死复发类型及其危险因素。方法:选取我院神经内科2014年5月~2016年5月收治的抗血小板药物二级预防后复发脑梗死患者30例,将这些患者作为抗血小板组,另选取笔者所在医院神经内科同期收治的未服用抗血小板药物二级预防后复发脑梗死患者40例作为未抗血小板组,对两组患者脑梗死复发类型中AT、SCI的危险因素进行统计分析。结果:抗血小板组中糖尿病、冠心病、高低密度脂蛋白血症患者脑梗死复发类型中AT发生率均显著高于未抗血小板组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抗血小板药物二级预防后脑梗死复发类型中AT的危险因素包括糖尿病、冠心病、高低密度脂蛋白血症,SCI的危险因素包括冠心病、吸烟史。

ROCK2在大鼠脊髓损伤后损伤区局部的表达规律研究

目的：研究脊髓损伤后不同时间点ROCK2在损伤局部的表达规律,为Rho激酶抑制剂治疗脊髓损伤提供理论依据。方法：成年健康雌性SD大鼠60只随机分为2组,每组30只,脊髓横断组：选取大鼠脊髓T10节段为损伤节段,剪断脊髓的后3/4深度损伤;假手术组：大鼠只行椎板切除术,不进行脊髓横断。于术前及术后3d、1w、2w、4w、6w采用BBB运动功能评分法对大鼠进行后肢运动功能评价,于术后8h、3d、1w、2w、4w、6w用免疫组化法检测大鼠脊髓组织ROCK2表达水平。结果：假手术组术后双后肢活动正常,BBB评分21分;术后3天~1周内横断组大鼠BBB评分均为0分,1周后BBB评分逐渐上升,至伤后4周可达9~10分左右,6周时评分无明显改变。脊髓横断组大鼠双后肢BBB评分于术后各时间点均较假手术组明显降低。横断组损伤后3天ROCK2的表达开始增加,1周达到高峰,且持续高表达4周,4周后表达开始下降,6周时恢复至低水平表达。横断组ROCK2的表达在损伤后3天~4周的各时间点均较假手术组明显增加,6周时ROCK2的表达与假手术组比较无显著性差异。结论：脊髓损伤后ROCK2可持续高表达4周,4周后ROCK2的表达恢复至假手术组水平,而运动功能不能再继续恢复。

脑室内灌注神经肽Y对戊四氮致痫大鼠海马结构内脑源性神经营养因子表达的影响

目的 :探讨脑室内注入神经肽 Y(Neuropeptide Y,NPY)对戊四氮 (PTZ)致痫大鼠海马结构内脑源性神经营养因子 (Brain- derived Neurotrophic Factor,BDNF)表达的影响。方法 :将 18只健康雄性 Wistar大鼠随机分为 NPY实验组 (n=10 )和对照组 (n=8)。 NPY实验组 ,于 PTZ造模前给予侧脑室注射 NPY(6 nmol/ 10μl) ,对照组给予等容量生理盐水。侧脑室注射后 5分钟 ,腹腔注射 PTZ(6 0 mg/ kg) ,观察痫性发作持续时间并于痫性发作后 2小时处死动物。用免疫组化方法观察海马齿状回 (DG)和 CA1区 BDNF的免疫反应性。结果 :NPY实验组痫性发作时间短于对照组 (P<0 .0 0 1)。实验组 DG颗粒细胞层、分子层的 BDNF免疫反应性高于对照组相应各层 ,各组比较有显著性差异。实验组CA1区锥体细胞层、放射层及腔隙层免疫反应性均高于对照组相应各层 ,各组比较有显著性差异。实验组 DG分子层和 CA1区放射层及腔隙层免疫反应性分别高于颗粒细胞层和锥体细胞层免疫反应性 ,各组比较有显著性差异。 CA1区分子层未见 BDNF免疫反应性表达。结论 :脑室内注射 NPY可缩短痫性发作时间 ,并促进致痫大鼠海马内 BDNF的表达。

额颞叶痴呆患者的临床病理学特征:1例分析

目的:探讨额颞叶痴呆的临床和病理学特点。方法:对1例额颞叶痴呆患者进行临床分析,并对死亡后脑和脊髓进行了组织学观察和免疫组化研究。结果:此例患者隐袭起病,渐进性发展,以言语障碍、吞咽呛咳、记忆力减退及情绪改变为主要表现,较早出现运动障碍及延髓麻痹,脑部及脊髓组织病理及免疫组化检查显示额颞叶皮质神经元大量丢失,组织微空泡变,tau及ubiqutin免疫组化染色阳性,无明显的胶质细胞增生。结论:额颞叶痴呆在影像学检查正常的情况下仅根据临床表现很难与其他脑部病变相鉴别,故病理检查对其诊断有十分重要的价值。

儿童鼻源性头痛230例诊断分析

353例7～16岁主诉为头痛的患者经螺旋CT或MRI扫描检查证实230例是由副鼻窦炎所致的鼻源性头痛。认为鼻窦炎症是儿童鼻源性头痛的最常见原因,鼻窦螺旋CT或颅脑MRI检查是确诊鼻源性头痛的最佳方法。

羊水性状在产程中的变化与新生儿的结局

目的：观察产程中羊水形状的改变及其与新生儿结局的关系。方法：进入活跃期宫口开大3～5cm时，胎膜自然破裂或人工破膜后观察羊水颜色、产程过程中羊水颜色的改变，胎儿娩出时流出的后羊水颜色。结果：晚期羊水粪染对新生儿Apgar评分没有影响。结论：晚期胎粪排出，并非缺氧因素所致，与胎儿窘迫并无直接关系。羊水污染的胎儿是否异常，最关键的是判断胎粪排出的时间及量的多少。

短暂脑缺血发作患者血小板膜糖蛋白的变迁

目的：观察短暂脑缺血发作（ＴＩＡ）患者血小板颗粒膜糖蛋白ＧＭＰ－１４０，ＧＰ５３的变化及其临床意义。方法：用流式细胞术，以单克隆抗体作分子探针，检测了１５例单纯型ＴＩＡ和１１例梗塞型ＴＩＡ患者血小板ＧＭＰ－１４０，ＧＰ５３的阳性表达率，并与２０名健康人作对照。结果：梗塞型ＴＩＡ组，ＧＭＰ－１４０，ＧＰ５３阳性率显著高于单纯型ＴＩＡ组和健康对照组（Ｐ＜００１～０００５），但后两组比较无显著差异。梗塞型ＴＩＡ组在发生梗塞后，其阳性率较梗塞前进一步升高（Ｐ＜００１）。结论：动态监测ＴＩＡ患者的ＧＭＰ－１４０，ＧＰ５３，有助于预测ＴＩＡ的发展趋势。对血小板活化率较高的ＴＩＡ患者，可视为血栓前状态。

三类降血压药物联合治疗皮质下动脉硬化性脑病方案的随机对照研究

目的 :对比观察三类降血压迟效制剂和三类普通制剂联合应用对皮质下动脉硬化性脑病患者血压的影响。方法 :皮质下动脉硬化性脑病患者 6 6例 ,随机分为迟效制剂组 33例与普通制剂组 33例。分别口服迟效和普通剂型钙通道阻滞剂、β受体阻断剂和血管紧张素转换酶抑制剂 ,连续口服用药 10wk。动态观察患者心率、血压的变化。评估治疗前后病人日常生活活动独立程度。结果 :迟效制剂组与普通制剂组降压总有效率分别为 93.9%和87.9% (P >0 .0 5 )。迟效制剂对昼夜血压具有平稳的降压作用。不良反应发生率迟效制剂组和普通制剂组分别为 15 .2 %和 4 2 .4 % (P <0 .0 5 )。迟效制剂组不良反应多为轻度且一过性 ,对心率无明显影响。2组治疗后病人日常生活活动独立程度均无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论 :降血压迟效制剂治疗皮质下动脉硬化性脑病的疗效好 。

影响双侧颈总动脉直径差的因素分析

目的 分析影响双侧颈总动脉直径差的因素及其临床意义。材料与方法 46例患不同脑血管疾病的患者均行数字减影血管造影 ,同时行多普勒超声检查测量双侧颈总动脉 (commoncarotidartery ,CCA)直径。结果 脑血管造影正常组病人双侧CCA直径之差均小于 0 .7mm ,当双侧CCA直径之差大于 0 .7mm时 ,脑血管造影即可观察到不同的血管病变。结论 Willis环的变异和一些血管病变可影响双侧CCA的直径之差 ,当其值大于 0 .7mm时 ,应行进一步检查以期早期发现脑部血管病变。

白三烯受体拮抗剂对自身免疫性神经炎大鼠IL-17表达的影响

目的观察白三烯受体拮抗剂普鲁司特对实验性自身免疫性神经炎(EAN)中白细胞介素-17(IL-17)表达的影响,为临床探索自身免疫性神经炎的治疗提供一种新的途径。方法对Lewis大鼠进行免疫,制备EAN模型,把40只EAN大鼠随机分为4个组,分别为普鲁司特A组、普鲁司特B组、甲泼尼龙琥珀酸钠组以及正常对照组。分别注射普鲁司特、甲泼尼龙琥珀酸钠不同药物进行免疫,对照组注射生理盐水。免疫后第16天处死处于发病高峰期的大鼠,然后取其坐骨神经,病理检查坐骨神经中炎性细胞浸润数目;免疫组化检查坐骨神经中IL-17阳性细胞表达;RT-PCR技术检测脾脏、淋巴结、坐骨神经中IL-17mRNA的表达。结果与空白对照组相比,普鲁司特A组、普鲁司特B组发病时间明显延迟,高峰期评分明显降低;而且普鲁司特A组和普鲁司特B组均能减少大鼠坐骨神经中的炎性细胞数目;降低IL-17阳性细胞的表达;降低脾脏、淋巴结、坐骨神经中的IL-17mRNA的表达(P<0.05)。结论白三烯受体拮抗剂可降低大鼠高峰期临床瘫痪评分、减少坐骨神经中的炎性细胞数目、降低IL-17阳性细胞的过度表达、降低脾脏、淋巴结、坐骨神经中的IL-17mRNA的表达。

慢性特发性轴索性周围神经病一例

慢性特发性轴索性周围神经病（chronic idiopathic axonal polyneuropathy,CIAP）是一种不明原因的慢性进行性周围神经病,电生理及神经病理检查结果提示轴索损害为主,多于50岁以后起病,是中老年人中比较常见的周围神经病类型之一[1-2].

赛莱乐对多梗死性痴呆患者CD_(62)P、CD_(63)P、P_(10)、DI的变化影响

目的 :观察赛莱乐治疗对多梗死性痴呆 (MID)患者CD6 2 P、CD6 3、P10 、DI变化的影响。方法 :将禁用阿司匹林及尼莫地平的 78例MID患者分 2组 ,治疗组 4 8例 ,应用赛莱乐 15 0mg静滴 ,1次 /日× 15天 ;对照组 30例 ,复方丹参 2 0ml静滴 ,1次 /日× 15天 ,观测治疗前、后CD6 2 P、CD6 3、P10 及DI变化。结果 :治疗后治疗组CD6 2 P、CD6 3、P10表达明显降低 ,DI明显增强 (P <0 0 1)与对照组比差异显著 (P <0 0 5 )。CD6 2 、P10 与DI呈负相关 (P <0 0 5 ) ,CD6 3与DI无相关。结论 :赛莱乐可降低CD6 2 P、CD6 3、P10 表达 ,抑制血小板活化 ,增强红细胞变形能力 ,对MID恢复有益。