霍山地区4种石斛属植物的遗传多态性分析

利用AP-PCR方法对4种霍山来源的石斛属植物基因组DNA进行了多态性分析,从75种随机引物中筛选出10种扩增条带清晰、稳定的随机引物,通过PCR扩增共获得250条DNA片段,其中呈多态性的片段数为165条,占扩增条带数的66%,显示了霍山来源的石斛植物具有较高的遗传多态性;利用NT-syspc分析软件对不同石斛品种间的平均遗传距离进行了分析,并利用UPGMA聚类分析方法构建它们的亲缘关系聚类图,结果表明4种霍山来源的石斛品种具有较近的亲缘关系,它们之间的平均遗传相似系数为0.63,其中铁皮石斛和铜皮石斛的亲缘关系最近,两者间的遗传相似系数为0.78,它们与串珠石斛的遗传相似系数分别为0.6和0.61,与霍山石斛的遗传相似系数分别为0.63和0.58;但是,相对于形态接近的铜皮石斛,铁皮石斛与霍山石斛的亲缘关系更近。

灰树花胞内多糖抗辐射作用的初步研究

利用深层培养方法获得菌丝体,经热水提取后获得灰树花的菌丝体胞内多糖。以之为材料,研究了其对60Co-γ辐照小鼠白细胞数目以及存活率的影响,发现灰树花胞内多糖具有明显的促进辐照小鼠白细胞数目恢复以及提高存活率和存活时间的作用。此结果说明灰树花胞内多糖具有一定的抗辐射作用。

江苏省沿海野生栝楼资源分布特点与评价

对江苏省沿海野生栝楼的形态、分布、生态环境与群落类型等进行了资料分析、踏查、样地调查。结果表明,栝楼在东台、射阳沿海滩涂较多分布于人工刺槐林、银杏林下和林缘,在村落周围和滩涂草甸也有分布,极少分布于农田和沟渠。对东台市沿海130.04 km2代表区域内天花粉蕴藏量估算值达731.663 7 t;射阳县沿海113.89 km2代表区域内天花粉的蕴藏量约为125.618 6 t。对江苏省沿海栝楼野生资源的生产发展提出了建议,为开展栝楼野生资源的可持续利用奠定基础。

谈中药资源与开发专业的植物生理生态学教学

结合SFDA推动实施的中药材生产质量管理规范(GAP),在中药资源与开发新专业中开设植物生理生态学课程,具有重要意义。通过教学改革研究,预先编订教学纲要,合理进行教学内容的设计以及教学方式和手段的革新,使中药资源与开发专业的学生真正掌握中药资源与开发所需的基础知识,更好地服务于中药材GAP。

灵芝蛋白质的分离及其免疫活性研究

利用凝胶层析法对灵芝子实体和破壁孢子粉的蛋白初提液进行了分离,通过体外免疫反应初步检测了各蛋白质成分的免疫调节活性。小鼠脾淋巴细胞转化试验表明其中有三种灵芝蛋白体外具有较强的促进淋巴细胞增殖的活性,分别命名为LZP-1,LZP-2和LZP-3,其中来自于灵芝孢子粉的LZP-2和LZP-3用量为50μg/ml时,它们体外促进淋巴细胞的增殖率可达（41.3±3.1）％和（38.7±4.8）％,并且呈现出一定的剂量依赖效应,而来自于灵芝子实体的LZP-1促进淋巴细胞的增殖率较低（18.2±3.9％,使用剂量为50μg/ml）。SDS-PAGE测得它们的相对分子质量分别为67,000,43,000和45,700。该蛋白有可能是灵芝中具有免疫调节活性的成分之一,具有潜在的临床应用价值。

LZ-8基因在大肠杆菌中的表达

根据Murasugi等人发表的LZ 8基因的DNA序列 ,设计了两条引物 ,从灵芝孢子粉的基因组DNA中扩增到LZ 8基因 (3 5 6bp)。利用此基因及pET 3d质粒 ,构建了该基因的原核表达载体质粒 ,进一步将其转化进大肠杆菌HB10 1菌株中获得了表达该基因的基因工程菌株 ,并对IPTG诱导后的LZ 8蛋白进行了初步的SDS

红树植物秋茄根提取物的体外抑菌与抗肿瘤活性

目的红树植物秋茄(Kandelia candel)根提取物的体外抑菌和抗肿瘤活性筛选。方法采用微量稀释法和MTT法测定各提取部位的体外抑菌和抗肿瘤活性。结果秋茄根的石油醚提取物体外对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽胞杆菌和藤黄八叠球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别是3.13、1.56、0.78和3.13mg.mL-1,而乙酸乙酯和乙醇提取物体外对表皮葡萄球菌的MIC分别为3.13和6.25 mg.mL-1;此外,石油醚提取物体外对人肝癌细胞SMMC-7721、小鼠黑色素瘤细胞B16、人胃癌细胞BGC803和肝癌细胞株HepG2的半数抑制浓度(IC50)分别为355.2、378.6、275.6和411.6μg.mL-1,而其它提取物则对肿瘤细胞的增殖具有明显的刺激作用。结论秋茄根的各有机溶剂提取成分分别具有不同的生物活性,具有潜在的药用开发价值。

连云港沿海5种贝类生物的遗传多样性分析

利用随机引物多聚酶链式反应(AP-PCR)技术对来自江苏省连云港海区5种重要的水产贝类(文蛤、青蛤、杂色蛤仔、四角蛤蜊和缢蛏)的遗传多样性进行了分析。由选取的28条随机引物共扩增出482个DNA片段,遗传多态性高达100%,而帘蛤科内的3种贝类的遗传多态性平均为91%。利用NTSYSpc生物学软件计算出5种贝类种间的遗传相似系数和相对遗传距离,聚类分析(UPGAM)结果表明:5种贝类在系统进化上的关系较远,它们可聚类为3组,它们的平均遗传相似系数为0.520,其中Ⅰ组有文蛤和青蛤,组内遗传相似系数为0.570;Ⅱ组有四角蛤蜊,它与Ⅰ组的遗传相似系数为0.561;Ⅲ组有杂色蛤仔和缢蛏,组内的遗传相似系数为0.544。

五种海桑属植物的遗传多样性分析

利用AP-PCR技术对来自于海南东寨港红树林自然保护区的5种海桑属植物的遗传多态性进行了分析。由选用的46条随机引物共扩增出908个DNA片段,其中有403个DNA片段分别为不同种海桑所特有的,占总扩增条带数的44.4%,呈现出较高的多态性,它们是海桑属植物不同种间潜在的分子标记。以NT- SYSpc分析软件对这5种海桑属植物进行了聚类分析,结果表明:5种海桑属植物可聚类为3个组,其中Ⅰ组有海桑和拟海桑,Ⅱ组有无瓣海桑和海南海桑,Ⅲ组仅包括卵叶海桑一种,与传统的植物分类学研究结果略有不同,其原因有待进一步认识。

鸢尾属药用植物总DNA提取方法的比较研究

以鸢尾属(Iris L.)药用植物鸢尾Iris tectorum Maxim.叶片为材料,分别采用CTAB法、高盐低pH法、SDS法和试剂盒法四种方法提取植物总DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计、ISSR和RAPD四种方法对所提取的DNA样品进行检测。结果表明,用SDS-Ⅰ法提取的植物总DNA纯度、浓度和完整性都很高,从经济角度考虑优于用试剂盒提取,从提取效果考虑不亚于用CTAB法和高盐低pH法提取,是比较适合鸢尾属植物总DNA提取的方法。

环境因子对药用植物木榄遗传多态性及其分布的影响

目的探讨环境因子变化对木榄的DNA遗传多态性的影响。方法利用RP-PCR技术分析中国南部3省6个红树群落中木榄的DNA遗传多态性,并与6个群落环境因子数据对比。结果在扩增到的1277个DNA片段中,25.5%的DNA片断呈现多态性变化:聚类分析显示,来自于山口、高桥、东寨港以及三亚红树群落的木榄可聚为一支(群落间遗传相似系数大于0.90),文昌和特呈岛木榄分别属于另外两支(与上述4个红树群落的遗传相似系数小于0.90,二者间的遗传相似系数小于0.85);环境因子数据的聚类分析显示,这6个红树群落可分为4支,其中东寨港和文昌为一支,高桥和特呈岛为一支,山口以及三亚分别属于另外2支。结论地理位置的差异是导致木榄遗传水平出现多态性变化的重要原因之一。

浙贝母鳞茎总RNA提取方法的研究

建立适合功能基因分析的浙贝母Fritillaria thunbergiiMiq.鳞茎总RNA的提取方法,将为后续与药效成分相关功能基因的分析奠定良好的工作基础。本研究通过紫外分光光度法、非变性琼脂糖电泳法以及DDRT-PCR方法比较异硫氰酸胍法、改良的异硫氰酸胍法、改良的SDS法和改良CTAB法提取浙贝母鳞茎总RNA的质量。结果表明,通过改良的CTAB法提取出的总RNA的完整性好(28 s/18 s约为2),纯度高(其A260/A280和A260/A230分别为1.95和2.30),以其为模板进行DDRT-PCR分析时能获得清晰的差异条带。通过本研究建立的改良CTAB法可于浙贝母鳞茎总RNA的提取,并可为其它植物鳞茎的总RNA提取提供参考。

江苏省盐城地区沿海滩涂野生枸杞资源调查与质量分析评价

目的:对江苏省盐城地区沿海滩涂的野生枸杞资源进行调查及质量分析评价,为该地区野生枸杞资源保护和开发利用提供科学依据。方法:采用踏查和随机设置样方对东台的野生枸杞资源进行调查,观测沿海滩涂野生枸杞资源的分布、生长环境、生长特性、群落类型及伴生植物等;通过对总黄酮类、总生物碱类、总糖类、阿魏酸等资源性化学成分的分析,对产自江苏省东台、南京及山西等地的地骨皮药材进行了品质评价。结果:江苏盐城地区沿海滩涂野生枸杞资源分布密度较高,尤其是农田地埂、河堤;江苏东台与南京、山西闻喜县产地骨皮药材相比,其所含总黄酮类和总生物碱类的含量较高,但水溶性总糖类的含量明显低于后者,尚含有一定量的阿魏酸化学成分。结论:江苏盐城沿海滩涂地区适宜枸杞生长,质量优良,为我国沿海滩涂盐渍化地区枸杞资源的保护利用和生产布局提供参考和借鉴。

半寄生药用植物百蕊草的组织培养研究

为了研究半寄生药用植物百蕊草组织培养,为其工厂化育苗和获得药用活性成分的细胞悬浮培养奠定基础,以百蕊草茎和叶为外植体,MS为基本培养基,添加不同种类和浓度的激素,研究其愈伤组织、丛生芽诱导及其继代培养和生根诱导等一系列百蕊草植株再生条件。百蕊草的茎是愈伤组织诱导的最适外植体,并以MS+2,4-D 1.0 mg/L为最适培养基,愈伤组织继代培养的最适培养基是MS+2,4-D 0.5 mg/L;丛生芽诱导以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.125 mg/L为好,适当降低激素浓度完成丛生芽继代培养;百蕊草愈伤组织或丛生芽的瓶内诱导生根最佳组合是MS+ABT 0.3 mg/L+活性炭2.0 mg/L;丛生芽瓶外生根诱导以ABT 90 mg/L浸泡60 min效果最佳。文章建立了较为完善的百蕊草植株再生的技术体系。