血HBV DNA定量检测中的疑难结果分析及其对策

目的分析荧光定量PCR检测HBV DNA过程中出现的疑难结果并探讨相应的处理对策。方法采用荧光定量PCR检测血标本HBV DNA含量,分析2008年至2011年本实验室所有送检标本所出现的疑难结果,同时采用两种不同的试剂对疑难结果的标本进行复查;统计两次结果一致性和不一致的比例,并对两次结果不一致原因进行分析。结果 2008年至2011年共有115 154例HBV DNA定量检测血标本,疑难结果的标本数为1 969例,总平均复查率为1.70%;两次结果一致的例数为1 588例(80.65%),两次结果不一致为381例(19.35%);两次结果不一致的原因由试剂因素和试剂外因素造成,试剂因素包括无扩增曲线造成的假阴性和有扩增曲线但扩增效率低下,试剂外因素包括操作污染和其它因素,试剂因素造成两次结果不一致的比例呈逐年上升的趋势。结论采用两种不同的试剂复查疑难结果的标本,大大降低HBV DNA定量的漏检率,避免了因试剂因素和非试剂因素引起的实验误差,提高了检验质量,有效地保证了HBV基因突变标本的HBV DNA准确定量,有利于正确地指导乙肝患者的抗病毒治疗。

实时荧光定量PCR检测血HBV DNA的疑难结果分析及其对策

目的分析实时荧光定量PCR检测血HBV DNA过程中出现的疑难结果，并探讨制定相应的处理对策，以提高HBV DNA检测质量。方法用实时荧光定量PCR检测温州医学院附属第一医院2008至2011年期间，115154份血标本中HBV DNA含量，结合当次HBV DNA定量结果与历史结果、PCR扩增图、乙型肝炎血清5项指标及临床诊断，建立本实验室疑难结果复查标准，回顾性分析2008至2011年本实验室所有送检标本的疑难结果，同时用原试剂（careHBV PCR Kit）和验证复查试剂（careHBV PCR Kit V2）对1969份疑难结果标本进行复查；统计2次结果一致性和不一致的比例，并分析试剂与非试剂因素等造成2次结果不一致的比例，其中试剂因素包括无扩增曲线造成的假阴性和有扩增曲线但扩增效率低2种情况，非试剂因素包括操作污染、标本等其他因素；最后统计careHBV PCR Kit的漏检率。结果2008至2011年共定量检测115154份HBV DNA血标本，疑难结果标本1969份，占总检测标本的1．71％；2次结果一致的为1588份（80．65％）；2次结果不一致为381份（19．35％），其中，4年中试剂因素造成结果不一致的比例分别为18．87％、20．23％、51．33％和59．57％，呈逐年上升趋势，原试剂因素的漏检率分别为2．49％、4．08％、10．09％、14．47％，呈逐年上升趋势；4年中非试剂因素造成结果不一致所占比率分别为81．13％、79．77％、48．67％和40．43％，呈逐年下降趋势。结论用2种不同的试剂复查疑难结果标本，可降低HBV DNA定量检测的漏检率，避免试验误差，有效保证HBV基因突变标本的HBV DNA准确定量，以正确指导乙型肝炎患者的抗病毒治疴0（中华检验医学杂志，2013，36：217-221）