假单胞菌ZS1鼠李糖基转移酶migA和wapR的缺失对细胞壁结构及鼠李糖脂合成的影响

假单胞菌ZS1是本实验室在前期工作中从油污中分离出的1株高产鼠李糖脂菌株。本实验拟探究阻断脂多糖O-抗原添加鼠李糖基对假单胞菌ZS1鼠李糖脂合成的影响。通过两步法敲除技术,构建了假单胞菌ZS1的wapR和migA缺失突变菌株。发酵结果表明wapR缺失突变株在培养过程中鼠李糖脂合成量显著增加,而migA缺失突变株则只有少量的提升。SDS-PAGE银染结果表明,wapR缺失突变菌株的脂多糖的组分出现显著变化,O-抗原部分几乎完全消失。而migA缺失突变菌株脂多糖组成无显著变化。通过对突变株和野生株在不同抗生素的梯度浓度培养,发现wapR缺失突变菌株对四环素浓度敏感性从125μg·mL^(-1)降低至31.2μg·mL^(-1),而migA缺失突变菌株对四环素的敏感性与野生株相仿,说明假单胞菌脂多糖的缺失能够提高细菌对抗生素的敏感性,从而降低病原菌的危害性。