癸酸能够活化CD8^(+)T细胞并提高其抗肿瘤免疫反应能力

目的:探究中链脂肪酸癸酸对CD8^(+)T细胞活化的影响,及其对CD8^(+)T细胞介导的抗肿瘤免疫反应的作用和机制。方法:建立C57BL/6小鼠黑色素瘤B16F10皮下荷瘤模型,随机分为癸酸组(10 mg/kg癸酸灌胃)和对照组(等量溶剂灌胃),观察癸酸对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响,采用流式细胞术检测肿瘤微环境中浸润CD8^(+)T细胞的活化水平。建立B16F10-OVA和OT-I T细胞共培养体系,采用流式细胞术检测癸酸对CD8^(+)T细胞的肿瘤细胞杀伤能力的影响。采用α-CD8抗体清除B16F10荷瘤小鼠体内CD8^(+)T细胞,观察对小鼠肿瘤体积的影响。小鼠原代CD8^(+)T细胞经癸酸处理后,采用WB、ELISA及qPCR、流式细胞术检测T细胞受体(TCR)活化、效应细胞因子产生以及增殖和代谢水平。在B16F10荷瘤小鼠模型中,观察α-PD-1抗体联合癸酸给药对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响。结果:在小鼠黑色素瘤荷瘤模型中,与对照组相比,癸酸组小鼠移植瘤体积显著降低且生存率显著提高(均P<0.05),肿瘤浸润CD8^(+)T细胞IFN-γ和TNF-α的表达水平显著升高(P<0.01)。经癸酸处理的OT-I T细胞对B16F10-OVA细胞的杀伤水平显著升高(P<0.01)。在荷瘤小鼠模型中用α-CD8抗体清除CD8^(+)T细胞后,癸酸对移植瘤的抑制作用显著降低(P<0.0001)。小鼠原代CD8^(+)T细胞经癸酸处理后,TCR活化水平显著升高、细胞因子IL-2和IFN-γ的产生增多、线粒体代谢水平显著上调(均P<0.05)。在黑色素瘤荷瘤小鼠模型中,癸酸与α-PD-1抗体联用,能够显著抑制小鼠移植瘤生长并提高其生存率(均P<0.05)。结论:癸酸能够促进CD8^(+)T细胞活化、增强其抗肿瘤免疫反应能力。

纳米银联合辐射后脑胶质瘤细胞凋亡与小胶质细胞的变化及其关系

目的:研究纳米银联合辐射后大鼠脑胶质瘤细胞凋亡与瘤内小胶质细胞的变化及其关系。方法:将C6细胞立体定向接种于大鼠右侧尾状核,建模后第8天将荷瘤鼠随机分成辐射对照组和纳米银联合辐射组,分别立体定向注入等体积的去离子水及20μg的纳米银,并行单次电离辐射。应用原位末端转移酶标记(TUNEL)法和OX42免疫组织化学染色分别检测辐射后瘤组织内细胞凋亡及小胶质细胞活性的动态变化。结果:TUNEL阳性细胞数目在辐射后6 h显著增加,24 h明显减少;辐射后6 h胶质瘤内小胶质细胞开始激活,随着时间的延长活性进一步增强。辐射后6 h和24 h,纳米银联合辐射组TUNEL阳性细胞数目和小胶质细胞活性均较辐射对照组增加,差异有统计学意义(P<0.001)。小胶质细胞活化与胶质瘤细胞凋亡的变化趋势不同,前者迟于后者。结论:纳米银联合辐射后胶质瘤细胞凋亡增加,小胶质细胞活化;激活的小胶质细胞可能没有参与胶质瘤细胞的急性凋亡过程。

同种异体肺移植术后血浆IL-10水平变化及与受者发生临床细菌感染死亡的关联

为探讨同种异体肺移植受者术后血浆IL-10水平变化及其与细菌感染死亡的关联,研究收集肺移植后死亡受者和存活受者、长期预后良好受者和健康志愿者的血浆样本。血常规分析死亡受者的外周血免疫细胞分布;影像学检查观察死亡受者肺部病原体的感染情况;细菌体外培养和病原微生物高通量基因组测序分析死亡受者的病原体感染类型;Luminex多因子检测法监测全体血浆样本多细胞因子的浓度。结果显示,死亡受者术后外周血白细胞计数、中性粒细胞计数和百分比、CRP浓度、中性粒细胞计数/淋巴细胞计数比值均增加,红细胞计数、血小板计数等则减少;术后肺部出现高密度影;血液、支气管肺泡灌洗液和痰液中出现多种细菌混合感染。动态监测细胞因子浓度发现相较于存活受者、预后良好受者和健康志愿者,死亡受者术后血浆IL-10浓度、IL-10/IFN-γ比值均显著升高(均P<0.0001)。综上,研究首次发现血浆IL-10水平变化与受者发生临床细菌感染死亡有密切关联。

肿瘤微环境可视化技术研究进展

肿瘤的发生、发展与转移等生物学行为与肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)密切相关。TME中的非癌细胞(如成纤维细胞、免疫细胞、内皮细胞等)及细胞外基质等对肿瘤细胞的生物学行为有着极其重要的影响;TME中的生理参数(如细胞的组成和丰度、关键基因的表达等)与肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关。免疫治疗是一种很有潜力的肿瘤治疗方法,然而,TME的异质性可能是导致免疫耐受的原因之一。对TME的可视化研究,可直观描绘TME中不同细胞类型的动态行为,在时间与空间维度揭示TME与肿瘤生长、侵袭的协同关系,发现更多潜在的免疫治疗靶点,提高免疫治疗的有效性。因此,TME研究模型与可视化技术对于TME的可视化研究至关重要。本文主要综述了3D培养系统、类器官与人源化PDX等TME可视化研究模型以及多重免疫组织化学、多重免疫荧光、成像型质谱流式和CRISPR/Cas9基因编辑等技术在TME可视化研究中的应用进展。