Sec62对结直肠癌细胞的增殖作用及其潜在机制

目的探索Sec62对结直肠癌细胞的增殖作用及其潜在机制。方法应用Western blotting技术在结直肠癌细胞和永生化正常结肠上皮细胞中检测Sec62蛋白的表达。依据结直肠癌细胞中Sec62蛋白的表达情况,选取两株结直肠癌细胞分别构建Sec62过表达稳定转染细胞及其对照(NC:过表达阴性对照组,以过表达组阴性对照病毒转染细胞;OE:过表达组,以过表达慢病毒转染细胞)和Sec62敲减稳定转染细胞及其对照(shNC:敲减阴性对照组,以敲减组阴性对照病毒转染细胞;KD-1:敲减组1,以敲减慢病毒1转染细胞;KD-2:敲减组2,以敲减慢病毒2转染细胞)。采用CCK-8、平板克隆形成等增殖相关体外实验检测稳定转染组及其对照组细胞的增殖能力。构建裸鼠皮下移植瘤模型评估Sec62对结直肠癌细胞体内增殖能力的影响,将24只雄性BALB/c裸鼠随机分为NC、OE、shNC、KD-14组,每组6只,将稳定转染组及其对照组细胞分别接种于裸鼠腹股沟处,5周后处死裸鼠,观察各组裸鼠皮下成瘤形成情况。采用流式细胞术检测稳定转染组及其对照组细胞周期变化。利用Western blotting检测稳定转染组及其对照组细胞周期相关蛋白Cyclin D1、CDK4和PCNA的表达。结果Western blotting发现Sec62在结直肠癌细胞中的表达显著高于正常结肠上皮细胞(P<0.01)。CCK-8和平板克隆实验结果均表明与NC细胞相比,OE细胞的增殖能力增强(P<0.05),而与shNC相比,KD-1和KD-2细胞的增殖能力明显降低(P<0.05)。裸鼠皮下移植瘤模型显示Sec62过表达细胞种植后形成的皮下肿瘤质量显著高于NC(P<0.01),而Sec62敲减(KD-1)细胞种植后裸鼠皮下成瘤的质量低于shNC(P<0.01)。流式细胞术检测细胞周期的结果显示,Sec62表达升高后细胞周期进程加快,而Sec62表达被抑制后细胞周期停滞。Western blotting结果表明,与NC细胞相比,OE细胞中Cyclin D1、CDK4和PCNA蛋白表达水平升高,而与shNC细胞相比,KD-1和KD-2细胞中Cyclin D1、CDK4和PCNA蛋白表达水平降低。结论Sec62可通过调控结直肠癌细胞的细胞周期影响结直肠癌的体内外增殖,从而在结直肠癌细胞的恶性增殖中发挥促癌作用。

单中心溃疡性结肠炎患者2010至2019年用药趋势分析

目的分析近10年空军军医大学西京医院消化内科溃疡性结肠炎(UC)患者的用药趋势。方法回顾性收集2010至2019年空军军医大学西京医院消化内科1425例UC确诊患者的临床资料,根据用药时间段将UC患者分为2010至2014年组和2015至2019年组,分析2组UC患者的一般情况和用药趋势,再分别根据患者性别和年龄(<40岁和≥40岁)进行亚组分析。统计学方法采用独立样本t检验和卡方检验。结果2010至2014年组和2015至2019年组的UC患者数分别为369和1056例,缓解患者分别占9.5%(35/369)和12.0%(127/1056),轻度患者分别占40.4%(149/369)和41.6%(439/1056),中度患者分别占37.4%(138/369)和28.9%(305/1056),重度患者分别占12.7%(47/369)和17.5%(185/1056)。2010至2014年组不同程度的UC患者比例与2015至2019年组患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。2010至2014年组与2015至2019年组的患者年龄和女性比例[(46.2±15.3)岁比(44.6±30.6)岁,45.8%(169/369)比44.8%(473/1056)]比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。2015至2019年组患者5-氨基水杨酸(5-ASA)、糖皮质激素、免疫抑制剂和生物制剂的使用率均高于2010至2014年组[分别为96.8%(1022/1056)比90.0%(332/369)、29.9%(316/1056)比14.6%(54/369)、8.4%(89/1056)比2.4%(9/369)、4.8%(51/1056)比0.5%(2/369)],差异均有统计学意义(χ^(2)=26.766、33.256、15.315、14.038,P均<0.01)。2010至2014年组与2015至2019年组组内女性和男性UC患者的年龄、5-ASA、糖皮质激素、免疫抑制剂和生物制剂的使用率[(47.2±13.6)岁比(45.3±16.5)岁、(43.1±12.9)岁比(45.8±39.5)岁,88.8%(150/169)比91.0%(182/200)、96.8%(458/473)比96.7%(564/583),13.6%(23/169)比15.5%(31/200)、28.3%(134/473)比31.2%(182/583),2.4%(4/169)比2.5%(5/200)、7.0%(33/473)比9.6%(56/583),0比1.0%(2/200)、5.3%(25/473)比4.5%(26/583)]比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。2010至2014年组年龄≥40岁的患者中,女性比例高于年龄<40岁的患者[50.2%(121/241)比37.5%(48/128)],5-ASA使用率低于年龄<40岁的患者[85.9%(207/241)比97.7%(125/128)],差异均有统计学意义(χ^(2)=5.438、12.824,P=0.020、P<0.01);2010至2014年组年龄≥40岁与<40岁的患者糖皮质激素、免疫抑制剂和生物制剂使用率[13.7%(33/241)比16.4%(21/128)、2.1%(5/241)比3.1%(4/128)、0比1.6%(2/128)]比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。2015至2019年组中年龄≥40岁的患者生物制剂使用率低于年龄<40岁的患者[3.7%(23/630)比46.5%(198/426)],差异有统计学意义(χ^(2)=4.721,P=0.030);2015至2019年组中年龄≥40岁与<40岁的患者女性比例和5-ASA、糖皮质激素、免疫抑制剂使用率[43.7%(275/630)比46.5%(198/426)、96.0%(605/630)比97.9%(417/426)、29.7%(187/630)比30.3%(129/426)、8.6%(54/630)比8.2%(35/426)]比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论与2010至2014年相比,2015至2019年空军军医大学西京医院消化内科单中心UC患者数明显较多;UC患者的5-ASA、糖皮质激素、生物制剂和免疫抑制剂使用率均增高;不同性别患者的用药趋势基本一致;不同年龄段的UC患者的用药趋势有所不同。