端粒酶RNA反义基因对肝癌细胞的影响

用RT-PCR的方法钓取端粒酶RNA基因的cDNA,并将其反向插入到逆转录病毒载体pLNCX上,构建hTR基因的反义表达质粒。将质粒经脂质体介导转染人肝癌SMMG-7721细胞中表达。结果表明hTR反义基因的表达有效地封闭或抑制肝癌细胞的端粒酶活性,抑制细胞的生长和增殖,延长细胞的倍增时间并促进细胞凋亡。

新型双萘酰亚胺类化合物与DNA作用研究

运用紫外吸收光谱、荧光光谱和圆二色光谱等技术方法,研究了5种不同长短烷基异硫脲阳离子作为连接臂的新型双萘酰亚胺类化合物(DN2～DN6)与DNA的作用.紫外吸收光谱结果表明,该类化合物能使DNA发生明显的减色效应并伴有微弱的红移现象,其减色效应随化合物烷基链的延长而增强;化合物的荧光可被DNA强烈猝灭,室温下DN3～DN6与DNA的结合常数随烷基链的延长而增大,分别为1.18×105、1.36×105、1.67×105、2.32×105 L/mol;化合物能够将嵌入在DNA中的吖啶橙游离出来,烷基链越长的化合物该作用力也越强;圆二色光谱表明,DNA的双螺旋结构发生了碱基堆积和局部解旋,碱基堆积程度与化合物烷基链的长度成正相关.实验结果表明,DN2～DN6均以嵌入方式与DNA发生作用,其作用强度顺序为DN6>DN5>DN4>DN3>DN2.

端粒酶RNA基因在白细胞中表达的研究

用 RT- PCR的方法钓取端粒酶 RNA ( h TR)基因的 c DNA,将 h TR基因克隆到逆转录病毒载体( p L NCX)构建哺乳动物细胞表达质粒 ,然后经脂质体介导转染人体正常的外周血白细胞中表达。结果表明端粒酶RNA基因的表达 ,不能激活或重建白细胞的端粒酶活性。流式细胞技术分析结果显示 ,外源 h TR基因的表达不能延长白细胞的寿命 ,反而抑制白细胞的增殖并促进其凋亡。这可能是因为外源 h TR基因的表达一定程度上阻碍了细胞内端粒酶 RNA同端粒酶催化亚基的结合 ,同时也阻碍了端粒酶 RNA模板区与端粒 DNA之间的结合 ,从而影响端粒酶活性 。

银染端粒重复序列检测端粒酶活性方法的研究

为了建立一种便于检测端粒酶活性的方法 ,在Kim等开发的TRAP法的基础上作了一些改进。即把细胞提取液与TS引物混合 ,30℃保温 30min以延伸TS引物之后经过酚 /氯仿抽提、乙醇沉淀 ,再做PCR扩增。PCR产物经 12 %非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,用银染法来显示电泳结果。结果表明该方法可以有效去除抑制Taq酶活性的因素 ,得到清晰的 6bp阳性条带 ,具有特异性好、灵敏度高、易操作、无放射性危害等优点。

水产动物溶菌酶研究的最新进展

抗生素的滥用导致耐药菌的产生，促使人们寻求新的途径开发抗生素替代品。抗菌肽是从自然界中获得的天然抗菌剂，能够作用于细胞膜杀死细胞，避免产生耐药性，且作用迅速、抗菌谱宽。

溶菌酶及其在食品工业中的应用

溶菌酶是一种对人安全且具有保健作用的蛋白酶,是国际公认的绿色天然酶制剂。它在食品工业中被广泛用作食品添加剂和防腐剂。溶菌酶广泛存在于人、动植物及微生物体内,尤以鸡蛋清中含量较高,具有巨大的开发应用价值。

机械化学法辅助提取刺五加总黄酮的工艺研究

目的研究机械化学法辅助提取刺五加总黄酮的最佳工艺。方法以总黄酮提取率为考察指标,通过单因素及正交实验考察机械化学法辅助提取刺五加总黄酮的主要影响因素,确定最佳工艺条件;采用分光光度法测定总黄酮含量。结果最佳工艺条件为:Na2CO3/Na2B4O7助剂用量4%(W/W),物料粒度D95≤37μm,乙醇浓度为20%(V/V),料液比为1∶60(g∶ml)。该工艺条件下,总黄酮提取率比热回流法提高13.2%。结论机械化学法辅助提取具有提取率高,时间短,无需加热,乙醇用量少等特点,是提取刺五加总黄酮的一种有效方法。

抗金黄色葡萄球菌卵黄抗体的制备及活性研究

目的:制备金黄色葡萄球菌特异性卵黄抗体并考察其活性。方法:采用灭活的金黄色葡萄球菌免疫产蛋母鸡,通过水稀释法、硫酸铵和硫酸钠盐析及凝胶过滤法分离、纯化抗体。抗体效价测定及体外抑菌试验分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和液体培养基比浊法。结果:纯化所得抗体纯度达95.10%,回收率为20.08%。抗体对金黄色葡萄球菌具有特异性,效价最高可达1:6400。体外抑菌试验表明,抗体抑菌活随IgY浓度的增加而增强,当特异性IgY的浓度为10mg/ml时,能完全抑制细菌生长。结论:抗体制备及纯化所述方法简便、可行,所制抗体具有特异性和抑菌活性。

胡桃楸提取液诱导K562细胞凋亡机制的研究

目的 :考察胡桃楸提取液是否具有诱导K5 6 2细胞p5 2蛋白及p2 1蛋白的作用 ,初步探讨胡桃楸提取液诱导K5 6 2细胞凋亡机制。方法 :以Western blot方法检测胡桃楸提取液对K5 6 2细胞p5 3蛋白及p2 1蛋白的影响。结果 :加入胡楸提取液K5 6 2细胞p5 2蛋白及p2 1蛋表达量增加。结论 :胡桃楸提取液可诱导K5 6 2细胞p5 3蛋白和p2 1蛋白的表达。

胡桃楸提取液诱导Hela细胞凋亡的研究

目的 :初步探讨胡桃楸提取液对 Hela细胞的凋亡诱导作用。方法 :通过形态学观察 ,琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术 (FCM)检测凋亡细胞。结果 :形态学观察发现核固缩、出现凋亡小体。琼脂糖凝胶电泳可见 DNA ladder条带。流式细胞仪检测有凋亡峰。结论 :胡桃楸提取液可诱导 Hela细胞凋亡。

抗氧化剂在糖尿病中的应用研究进展

氧化应激是自由基的促氧化与机体的抗氧化失衡造成的自由基的高反应活性可以使细胞组分发生化学变化,并导致脂质过氧化。越来越多的证据表明:糖尿病患者体内活性氧物质明显增多,并且抗氧化防御系统功能紊乱。抗氧化剂可以降低糖尿病患者体内的氧化应激水平,清除自由基并改善抗氧化防御体系,所以将抗氧化剂应用于糖尿病是可行的。许多抗氧化剂已经用于糖尿病的研究与治疗,本文主要将作用于糖尿病的各种抗氧化剂做一综述。

齐墩果酸和甘草次酸衍生物的合成与表征及抗癌活性研究

齐墩果酸和甘草次酸属于五环三萜类化合物,在自然界中分布广泛并显示出多种生物活性,如保肝、抗炎、抗菌、抗病毒等多种药理作用,并具有良好的抗癌活性.首先以齐墩果酸和甘草次酸为先导化合物,对其结构进行了修饰,共合成了15种中间体和最终产物,利用IR和1H NMR波谱技术对其结构进行了表征.然后对部分化合物进行了人宫颈癌细胞(Hela)和人乳腺癌细胞(MCF—7)体外抗肿瘤活性测试.结果显示,2个化合物抑制癌细胞的活性优于先导化合物.

噬菌体控制主要食源性致病菌的研究进展

食源性细菌疾病是当今世界上最广泛的公共卫生问题之一。由抗生素滥用导致的耐药菌株出现,以及抗生素禁用,使得人们对食源性细菌疾病的控制更加困难。噬菌体是细菌的天敌,具有感染并裂解细菌的功能,与抗生素相比,噬菌体制剂具有特异性强、自我增殖快、抗菌能力强、研发时间短等优点,因此近年来有关噬菌体作为抗菌制剂的研究受到普遍关注。本文就噬菌体在食源性病原微生物控制方面的应用研究进展作一综述,以期为噬菌体及其制剂在保障动物性食品安全领域的深入研究提供一定的参考。

抗金黄色葡萄球菌IgY的酶解稳定性及活性研究

目的:考察抗金黄色葡萄球菌特异性IgY的酶解稳定性和酶解产物的活性。方法:以灭活的金黄色葡萄球菌免疫产蛋母鸡,抗体经水稀释及盐析分离纯化。抗体在不同条件下经胃蛋白酶或胰蛋白酶消化。抗体及酶解产物的特异性和活性分别用ELISA法和凝集法检测,酶解产物用SDS-PAGE和Western-blotting鉴定。结果:免疫产生的抗体具有特异性,能与金黄色葡萄球菌凝集而抑制其生长。分离纯化后抗体纯度与标准IgY相近。IgY在pH<4时完全酶解;pH等于4时部分酶解生成Fab片断,具有特异性和凝集活性;pH>4时,抗体稳定,不发生酶解。结论:抗金黄色葡萄球菌特异性IgY及其酶解生成的Fab片断,具有特异性和抑菌活性,有望代替抗生素用于细菌感染性疾病的治疗。

桃叶珊瑚苷对糖尿病大鼠线粒体的抗氧化作用

目的研究桃叶珊瑚苷对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠血糖和线粒体抗氧化能力的影响。方法通过STZ腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,将其随机分为糖尿病组、STZ低剂量组和STZ高剂量组,并与空白对照组比较。观察桃叶珊瑚苷治疗前后糖尿病大鼠的形态、体质量、血糖、线粒体内脂质过氧化和抗氧化体系的变化。结果与空白对照组比较,糖尿病大鼠血糖、MDA显著升高,CAT、GSH-Px、SOD活力显著下降;桃叶珊瑚苷治疗后血糖、MDA显著降低,CAT、GSH-Px、SOD活力显著升高。结论桃叶珊瑚苷能显著降低糖尿病大鼠的血糖值,改善线粒体的抗氧化水平,是一种潜在的防治糖尿病药物。

微切助互作技术辅助提取穿心莲内酯的工艺研究

目的研究微切助互作技术辅助提取穿心莲内酯的最佳工艺。方法以穿心莲内酯提取率为考察指标,通过单因素及正交实验考察微切助互作技术辅助提取穿心莲内酯的主要影响因素,确定最佳工艺条件;采用高效液相色谱法测定穿心莲内酯含量。结果最佳工艺条件为:Na2CO3助剂用量3%(W/W),研磨时间为45 min(物料粒度D95≤44μm),水作溶剂,料液比为1∶60(g∶ml)。该工艺条件下,穿心莲内酯提取率比热回流法提高23.2%。结论微切助互作技术辅助提取具有提取率高、时间短、无需加热、乙醇用量少等特点,是提取穿心莲内酯的一种有效方法。

鹿茸活性成分及其药理功能的研究进展

鹿茸是我国传统的名贵中药,它的化学成分和药理功能比较复杂。近年来,许多科学家对鹿茸的药理作用进行了深入研究,包括免疫增强、神经保护、生殖促进、抗骨质疏松、抗衰老、抗肝纤维化和抗关节炎等方面的药理作用。文章对鹿茸的活性成分及其药理作用的研究进展作一综述,旨在为进一步开发、利用鹿茸提供相应的理论依据。

大肠杆菌耐热肠毒素b及其致动物腹泻的机理

介绍了大肠杆菌耐热肠毒素b(STb)的编码基因、理化性质、免疫学特征、分泌特征、毒性相关氨基酸残基、空间结构、膜受体以及STb致动物腹泻的机理。认为STb是一种十分重要的肠毒素,应进一步加强对STb及其致腹泻机理的研究。

刺参饲料的使用与研究新进展

随着刺参养殖的高密度集约化发展,饲料问题成为刺参养殖的关键和瓶颈,文中对目前刺参的天然饵料、人工配合饲料及饲料加工工艺的最新研究进展进行了详细阐述,并对出现的问题及未来发展的方向进行了探讨,旨在为刺参饲料的应用提供参考。

金黄色葡萄球菌外毒素及荚膜特异性卵黄抗体联合治疗奶牛乳房炎效果研究

本研究目的是评价金黄色葡萄球菌外毒素特异性卵黄抗体(IgY-toxins)及5、8、336型金黄色葡萄球菌荚膜特异性卵黄抗体(IgY-T5、IgY-T8及IgY-T336)联合使用对奶牛乳房炎的治疗效果。乳酸脱氢酶试验表明,IgYtoxins能够有效中和外毒素对乳腺上皮细胞MAC-T的破坏作用。荧光显微镜观察发现,5mg·mL-1的IgYT336可有效阻断金黄色葡萄球菌RN6390对MAC-T的侵袭。与单独使用IgY-T336相比,5mg·mL-1的IgYT336和0.5mg·mL-1的IgY-toxins联合使用能够更加有效地保护MAC-T细胞,同时显著改善细胞的生长形态。临床型乳房炎试验表明,与PBS对照相比,对金黄色葡萄球菌感染乳池每天注射各20mg的IgY-T5、IgY-T8、IgYT336及IgY-toxins可显著降低(P<0.001)病牛乳汁的体细胞数(SCC),20mg的IgY-T5、IgY-T8、IgY-T336或者20mg的IgY-toxins虽然也可降低体细胞数,但是降低幅度显著低于联合治疗组(P<0.01)。所有治疗组奶牛乳汁的凝块水平都显著低于对照组(P<0.05)。本研究表明,荚膜及外毒素特异性卵黄抗体联合使用比其单独使用对乳房炎的治疗效果更好,在应用卵黄抗体治疗乳房炎时应该将荚膜和外毒素都列为抗体的靶点。