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题名基于KASP平台的转基因玉米高通量特异性检测方法
被引量:1
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作者
朱少喜
金肇阳
葛建镕
王蕊
王凤格
路运才
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机构
黑龙江大学现代农业与生态环境学院
北京市农林科学院玉米研究所玉米DNA指纹及分子育种北京市重点实验室
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期133-140,共8页
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基金
国家“十三五”重点研发计划(2016YFD0101803)
黑龙江省自然科学基金联合引导项目(LH2019C056)。
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文摘
为了促进转基因玉米产业化发展,加快优良性状转化体与骨干自交系的转育工作,适用于回交群体的高通量前景选择方法亟待开发。本研究以转基因玉米DBN9936为材料,根据其外源插入片段及其侧翼序列,采用primer5软件设计了6对特异性引物,与内标准基因zSSIIb引物进行组合用于评估,获得最优引物组合后,进一步开展特异性验证、检出限测试和多样品验证。结果显示,最优引物组合为DBN9936-LB1*zSSIIb-k1;10份DBN9936 BC1代种子的KASP基因分型结果与琼脂糖凝胶电泳结果完全一致;10份转化体DBN9858、DBN9501、C0010.1.3、C0010.3.1、C0010.3.7、C0030.2.5、BT11、GA21、MIR162和2A-7的转基因玉米样品在双平台上检测结果均表现为阴性;转基因玉米DBN9936的检出限为10%;48份不同DBN9936杂交种材料的KASP基因分型结果均表现为阳性。综上,本研究方法可用于转基因玉米DBN9936回交转育过程中的前景选择,且样品通量高,为其他农作物在转基因育种过程中的目标基因检测提供了技术参考。
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关键词
转基因玉米
回交转育
前景选择
KASP平台
高通量
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Keywords
transgenic maize
backcross breeding
foreground selection
KASP platform
high throughput
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分类号
S513
[农业科学—作物学]
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