小鼠金属硫蛋白──I cDNA在蓝藻中的克隆和表达

生物工程技术在工业、农业和环境保护上的应用日益广泛，将工程微生物应用于环境污染的治理，是一条快速、安全又经济的途径。本文报道了获得一种清除重金属污染工程藻的研究。将小鼠金属硫蛋白－Ｉ（ｍｏｕｓｅｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ－Ｉ，ｍＭＴ－Ｉ）ｃＤＮＡ基因片段插入到质粒ｐＲＬ４３９上的强启动子ＰｐｓｂＡ之后，并与穿梭载体ｐＤＣ－８相连构建成功大肠杆菌──蓝藻穿梭表达载体ｐＤＣ－ＭＴ，然后通过三亲结合转移法将ｐＤＣ－ＭＴ转入固氮丝状体蓝藻鱼腥藻（Ａｎａｂａｅｎａ）７１２０中，经新霉素筛选获遗传稳定的转外源ＤＮＡ藻株；纯化单藻落扩大培养后，提取蓝藻质粒，斑点杂交确定ｍＭＴ－ＩｃＤＮＡ的转人；在培养基中加入重金属Ｃｄ，培养后收集藻细胞，用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ，极谱法和原子吸收等多种方法确定金属硫蛋白的表达，并计算表达量约为４０μｇＭＴ／ｇ藻鲜重。

HPLC法同时测定菝葜和金刚藤糖浆中4种成分

目的建立HPLC法同时测定菝葜Smilax china L.和金刚藤糖浆（菝葜）中4种成分的含有量。方法该药材和药物甲醇提取液的分析采用Diamonil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长290 nm（落新妇苷）、306 nm（白藜芦醇）、360 nm（芦丁和山柰酚）。结果落新妇苷、白藜芦醇、芦丁、山柰酚分别在0.006 64~0.664μg（r=0.999 7）、0.006 58~0.658μg（r=0.999 9）、0.001 01~1.01μg（r=0.999 6）、0.0078~0.78μg（r=0.9999）范围内呈良好的线性关系,金刚藤中其平均加样回收率分别为98.40%、100.89%、99.11%、100.17%,RSD分别为2.1%、3.2%、2.1%、2.8%;金刚藤糖浆中其平均加样回收率分别为101.70%、97.50%、101.55%、101.23%,RSD分别为2.2%、1.3%、1.4%、1.4%。4种成分含有量在各批药材和制剂中均有明显差异,仅白藜芦醇能在所有样品中被检出。结论白藜芦醇可作为菝葜和金刚藤糖浆质量评价的指标成分。

基于主成分分析的茶叶预防肺癌药效物质研究

目的:采用主成分分析(PCA)法研究6种茶叶预防肺癌的药效物质基础。方法:以UPLC对各茶叶中各成分进行含量测定,MTT法检测CSE诱导的NHBE细胞的存活率,5,5-二硫二硝基苯甲酸(DTNB)比色法测定GSH/GSSG(还原型/氧化型谷胱甘肽)的比例,采用主成分分析计算共有峰面积的相关系数矩阵、特征值和方差贡献率,确定其具有预防肺癌的化学成分。结果:6种茶叶中龙井保护NHBE细胞损伤的作用最强,其IC50为0.2559mg/mL,使GSH/GSSG的比例由0.142恢复至0.858,且具有剂量依赖性;主成分分析得出GCG预防肺癌的贡献率为79.602%,GA的贡献率为11.307%,两者之和为90.909%。结论:不同品种茶叶对NHBE细胞的保护作用不同,主成分分析法确定GCG和GA是茶叶中预防肺癌的主要活性成分。

侗药黄蜡果不同部位总皂苷含量的测定

为建立黄蜡果总皂苷含量的测定方法,定量评价不同部位总皂苷含量的差异,采用紫外分光光度法,测定不同部位总皂苷含量,并建立线性回归方程。结果显示,测得其叶、藤茎、根的平均总皂苷含量分别为0.701%、0.4203%、0.4937%,说明大孔树脂柱色谱能有效富集皂苷,紫外分光光度法可用于黄蜡果皂苷的定量及定性分析,特别是叶的总皂苷含量最高,这为其质量标准研究提供了科学依据。

我国律师性质的合理定位

律师性质在我国主要经历了国家法律工作者、市场经济的中介人员、为社会提供法律服务的专业人员三个发展阶段。法治理念、保障职业理念、适应和维护市场经济的理念构成了律师性质的理念依据。我国的律师性质应界定为：为委托人提供法律服务的自由职业者，其具有政治性、独立性、社会性、专业性和商业性。

高效液相色谱法测定不同产地枇杷叶中的3种黄酮类成分

建立了高效液相色谱同时测定枇杷叶中3种黄酮类成分的分析方法。该方法分析了不同产地枇杷叶中芦丁、槲皮素和山柰酚的含量差异。枇杷叶粉末用甲醇超声提取后,加盐酸回流,制备样品测试液。采用Diamonsil C18色谱柱(250 m m×4.6 m m,5μm),以0.4%(v/v)磷酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱。分别对7个不同产地的枇杷叶样品中的芦丁、槲皮素和山柰酚进行测定。结果表明,芦丁、槲皮素、山柰酚在各自的质量浓度范围内线性关系良好(r>0.99),加标回收率分别为96.33%、95.81%和95.80%,RSD分别为6.48%、0.90%和3.02%。该方法操作简单、分离度好、重复性高。不同产地枇杷叶中3种黄酮类成分的含量存在差异,其中芦丁的差异最大,而山柰酚的含量最稳定且在不同产地样品中均可检出,或可用作枇杷叶药材质量控制的标志成分。

SPE-HPLC法测定三尖杉中的三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱

目的采用固相萃取-高效液相色谱（SPE-HPLC）法测定三尖杉Cephalotaxus fortunei Hook.f.中的三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱。方法三尖杉90%乙醇提取液的分析采用迪马Diamonil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈∶水（含0.1 g十二烷基磺酸钠和0.1%磷酸,42∶58）,等度洗脱;体积流量为0.5 m L/min;检测波长为291 nm。结果三尖杉酯碱、高三尖杉酯碱在2.48~49.60、2.51~50.20μg/m L范围内线性关系良好,平均回收率（n=5）分别为95.4%、95.1%,RSD分别为1.83%、1.91%。两种成分的含有量在茎中最高,而在叶中最低。结论该方法可用于测定该植物中的三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱,效果理想。

高效液相色谱法测定枇杷叶及其制剂中三萜类成分

目的采用高效液相色谱(HPLC)法测定枇杷叶及其制剂中三萜类成分含量,初步探索熊果酸和齐墩果酸作为枇杷叶制剂定量检测标志性化合物的可能。方法比较枇杷叶膏样品两种脱糖方式。用HPLC分析枇杷叶药材及其制剂中熊果酸和齐墩果酸的含量。色谱柱为迪马Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水(95∶5)为流动相,流速0.5 m L·min^(-1),柱温30℃,进样量10μL,检测波长210 nm。结果枇杷叶药材及其制品中均含有熊果酸和齐墩果酸,且含量均比较稳定。结论熊果酸和齐墩果酸可作为枇杷叶制剂定量控制的标志性化合物。

荧光猝灭法研究二氢槲皮素和二氢杨梅素与牛血清白蛋白的相互作用

目的研究二氢槲皮素和二氢杨梅素与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。方法运用荧光光谱法结合Stern-Volmer方程和Line Weaver-Burk双倒数函数计算出BSA与二氢槲皮素和二氢杨梅素相互作用的猝灭常数和结合常数,通过反应前后热力学参数如焓变ΔH和熵变ΔS的大小对作用力类别进行判断。结果测得二氢槲皮素与BSA在不同温度下的结合常数293K为2.27×10~4L·mol^(-1),298 K为2.06×10~4L·mol^(-1),303 K为1.89×10~4L·mol^(-1),二氢杨梅素与BSA在不同温度下的结合常数293 K为2.43×10~4L·mol^(-1),298 K为2.39×10~4L·mol^(-1),303 K为2.13×10~4L·mol^(-1)。确定其使牛血清白蛋白荧光猝灭的过程为静态猝灭过程,通过热力学参数确定其结合力主要为疏水作用。结论应用荧光猝灭法了解二氢槲皮素和二氢杨梅素与牛血清白蛋白之间有较强的结合反应,结合力以疏水作用力为主。

靖州茯苓三萜类成分对A549细胞中Nrf2信号通路的调控机制研究

目的研究靖州茯苓三萜类成分体外对A549细胞增殖的影响及对核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、人醌NADH脱氢酶1(NQO1)蛋白表达的影响。方法采用噻唑盐比色(MTT)法检测A549细胞的存活率,Western blot法测定Nrf2,GST,NQO1蛋白表达水平。结果茯苓三萜质量浓度大于15μg/mL时,A549细胞存活率开始降低,且质量浓度与存活率呈负相关;质量浓度大于30μg/mL时,A549细胞中Nrf2,GST,NQO1蛋白表达水平显著升高(P <0. 05),且此时质量浓度与蛋白表达水平呈正相关。结论靖州茯苓三萜类成分可通过下调Nrf2信号通路相关蛋白的表达抑制A549细胞的增殖。

磷脂酰丝氨酸/茯苓组合对快速老化模型小鼠学习记忆能力的作用及其机制

目的探讨磷脂酰丝氨酸/茯苓组合对快速老化模型小鼠学习记忆的影响和其作用机制。方法选用50只8周龄雄性C-57小鼠随机分为空白组、生理盐水组、磷脂酰丝氨酸组、茯苓组和磷脂酰丝氨酸/茯苓组合组等5组,每组10只,灌胃给药2周,首先通过Morris水迷宫实验检测各组小鼠空间学习记忆能力,其次检测小鼠的原位LTP,最后取脑组织进行HE染色和基因枪Di I染色。结果与空白组相比,磷脂酰丝氨酸组、茯苓组和磷脂酰丝氨酸/茯苓组合组的学习记忆能力均有所提高,LTP增幅提高,海马CA1区神经元数目增多,神经元树突棘的密度增加,其中磷脂酰丝氨酸/茯苓组合组效果最为明显。结论磷脂酰丝氨酸/茯苓组合能提高快速老化模型小鼠学习记忆能力,其机制可能与保护神经元有关。

吴茱萸碱和吴茱萸次碱含药血清抑菌活性研究

目的:研究吴茱萸生物碱含药血清的抗菌活性。方法:以Dimonsil C18(2)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,水-甲醇-乙腈(42∶20∶38)为流动相,流速为1 m L/min,在波长为240 nm时,用HPLC法对血清中吴茱萸碱和吴茱萸次碱进行定量;并用比浊法测定吴茱萸生物碱含药血清对8种临床常见病原菌的抑菌作用。结果:吴茱萸生物碱含药血清对伤寒杆菌(MICEV为0.4329μg/m L,MICRU为0.3784μg/m L)、甲型副甲伤寒杆菌(MICEV为1.0824μg/m L,MICRU为0.9465μg/m L)、痢疾志贺菌(MICEV为2.1645μg/m L,MICRU为1.8921μg/m L)和福氏痢疾杆菌有抑菌(MICEV为1.0824μg/m L,MICRU为0.9465μg/m L)作用。结论:吴茱萸生物碱含药血清对伤寒杆菌、甲型副伤寒杆菌和福氏痢疾杆菌具有较好的抑菌作用。

磷脂酰丝氨酸/陈皮组合对快速老化模型小鼠学习记忆能力的作用及其机制

目的：探讨磷脂酰丝氨酸／陈皮组合对快速老化模型小鼠学习记忆的影响及其作用机制。方法：选用8周龄雄性SAM-P8小鼠，随机分为空白组、生理盐水组、磷脂酰丝氨酸组、陈皮组和磷脂酰丝氨酸／陈皮组合组5组，灌胃给药2周。首先通过Morris水迷宫实验检测各组小鼠空间学习记忆能力，其次检测小鼠的原位长时程增强（LTP），最后取脑组织行尼氏染色和基因枪DiI染色。结果：与空白组相比，磷脂酰丝氨酸组、陈皮组和磷脂酰丝氨酸／陈皮组合组的学习记忆能力有所提高，LTP增幅提高，海马CAI区神经元数目增多，神经元树突棘的密度增加，其中磷脂酰丝氨酸／陈皮组合组效果最为明显。结论：磷脂酰丝氨酸／陈皮能提高快速老化模型小鼠学习记忆能力，其机制可能与保护神经元有关。

白绢病的研究

白绢病是一种在热带、亚热带地区普遍发生的病害,其寄主范围广,可危害多种植物,严重危害时,常造成作物减产。关于各种植物白绢病的发生与防治研究,一直是植物病害研究中的热点问题。但白绢病的有效控制必须建立在对该病充分了解的基础上,为此,首先介绍白绢病病原菌的特征、分布、寄主种类、危害症状、侵染循环与致病机理,然后进一步总结阐述影响花生白绢病、马铃薯白绢病、烟草白绢病、茶苗白绢病、桑白绢病、水稻白绢病和药用植物白绢病发病的主要因素,如气候、土壤和栽培条件等,并从农业防治、生物防治和化学防治等方面总结白绢病的防治方法。提出防治白绢病应尽可能采取"绿色植保"的措施,农业防治、生物防治和化学防治等各项防治措施,可依不同地区、不同耕作制度和不同植物种类有所侧重;但只有进行综合治理,才能从根本上控制白绢病的发生与危害,从而取得良好的经济和社会效益。

以药剂学为中心的药学专业多课程综合性实验构建与实施

进行药学专业多课程综合性实验的构建,开展以药剂学为中心的多课程综合性实验,培养了学生缜密科研思维能力,激发了学生创新精神,有效提升了学生毕业论文设计与撰写能力,达到对药学专业学生实验技能实行系统性、科学性、创造性训练的目的,成为药学专业实践教学改革的必要环节之一。

萝卜霜霉病、黑斑病、白斑病、白锈病、炭疽病和黑根病的识别与防治技术

介绍了萝卜霜霉病、黑斑病、白斑病、白锈病、炭疽病及黑根病的危害症状、发病特点,指出各种病害的识别特点,并从农业措施、化学防治等方面提出了相应的防治方法。

对满族珍珠球在高校推广、普及的研究

珍珠球是满族人民模仿采珍珠人的劳动演变而来的民族传统体育项目。在全国及各省民运会中积极开展,但在高校推广普及过程中仍遇到诸多问题。本文运用文献资料法、专家调查法和,对珍珠球的开展现状进行分析,研究珍珠球在高校推广普及的必要性和可行性,探讨高校开设大学体育珍珠球课程的影响因素,提出了珍珠球运动在高校开展推广、普及的意见和建议,为我国满族传统体育珍珠球的推广、普及提供了理论基础。

果树二次开花的原因及预防

果树二次开花是指秋季采收果实后,果树继续再次开花结果的现象,严重影响产量和经济效益。在分析了导致果树二次开花的因素的基础上,总结了果树二次开花的补救措施,并提出了预防措施,旨在为科学制定防控措施、实现我国果树优质高产栽培提供参考依据。

葡萄房枯病、褐斑病、栓皮病、扇叶病、蔓枯病和白纹羽病的识别与防治

介绍了葡萄房枯病、褐斑病、栓皮病、扇叶病、蔓枯病和白纹羽病的危害症状、发病特点,提出防治这些病害应采取农业防治和化学防治的综合防治方法。为减轻病害危害,提高葡萄的产量和品质提供了一定的依据。

高校体育开设花样跳绳课程的可行性研究——以延边大学体育学院为例

跳绳是一项传统的体育运动项目。花样跳绳是在传统跳绳的基础上发展而来。如今,花样跳绳已成为国内许多学校的特色校本课程,尤其是在中小学开展的尤为广泛,普通体育院校本科生面临的是中小学教学,如果在体育院校开设花样跳绳课程,将深化体育教学改革,促进人才培养。本文主要采用问卷调查法等研究方法,对花样跳绳运动在延边大学体育学院开设的可行性进行了调查研究。